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- 上海
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- 2025年07月14日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20
- 保质期：
2年
- 英文名：
pUC-SPYCE(M)
- 库存：
100
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格：
干粉/液体
基本信息
名称：pUC-SPYCE(M)植物双分子荧光质粒
别称: pUC-SPYCE(M)
质粒属性
质粒简介
pUC-SPYCE(M)是一个植物细胞双分子荧光BIFC质粒。
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported 4140 bp ds-DNA circular SYN 04-JAN-2018
DEFINITION synthetic circular DNA
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..4140
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
promoter 863..1208
/label=CaMV 35S promoter
/note="strong constitutive promoter from cauliflower mosaic
virus"
misc_feature 1217..1300
/label=MCS
CDS 1304..1330
/codon_start=1
/product="HA (human influenza hemagglutinin) epitope tag"
/label=HA
/translation="YPYDVPDYA"
CDS 1331..1582
/codon_start=1
/product="C-terminal fragment of mVenus for use in
bimolecular fluorescence complementation (BiFC) (Kodama and
Hu, 2010)"
/label=VC155
/translation="DKQKNGIKVNFKIRHNIEDGSVQLADHYQQNTPIGDGPVLLPDNH
YLSYQSKLSKDPNEKRDHMVLLEFVTAAGITLGMDELYK"
terminator 1602..1854
/label=NOS terminator
/note="nopaline synthase terminator and poly(A) signal"
promoter 2353..2457
/gene="bla"
/label=AmpR promoter
CDS 2458..3318
/codon_start=1
/gene="bla"
/product="beta-lactamase"
/label=AmpR
/note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and
related antibiotics"
/translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI
ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS
PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW
EPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA
LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS
LIKHW"
rep_origin 3489..4077
/direction=RIGHT
/label=ori
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
ORIGIN
1 tttcctgcgt tatcccctga ttctgtggat aaccgtatta ccgcctttga gtgagctgat
61 accgctcgcc gcagccgaac gaccgagcgc agcgagtcag tgagcgagga agcggaagag
121 cgcccaatac gcaaaccgcc tctccccgcg cgttggccga ttcattaatg cagctggcac
181 gacaggtttc ccgactggaa agcgggcagt gagcgcaacg caattaatgt gagttagctc
241 actcattagg caccccaggc tttacacttt atgcttccgg ctcgtatgtt gtgtggaatt
301 gtgagcggat aacaatttca cacaggaaac agctatgacc atgattacgc caagcttgca
361 tgcctgcagg tccccagatt agccttttca atttcagaaa gaatgctaac ccacagatgg
421 ttagagaggc ttacgcagca ggtctcatca agacgatcta cccgagcaat aatctccagg
481 aaatcaaata ccttcccaag aaggttaaag atgcagtcaa aagattcagg actaactgca
541 tcaagaacac agagaaagat atatttctca agatcagaag tactattcca gtatggacga
601 ttcaaggctt gcttcacaaa ccaaggcaag taatagagat tggagtctct aaaaaggtag
661 ttcccactga atcaaaggcc atggagtcaa agattcaaat agaggaccta acagaactcg
721 ccgtaaagac tggcgaacag ttcatacaga gtctcttacg actcaatgac aagaagaaaa
781 tcttcgtcaa catggtggag cacgacacac ttgtctactc caaaaatatc aaagatacag
841 tctcagaaga ccaaagggca attgagactt ttcaacaaag ggtaatatcc ggaaacctcc
901 tcggattcca ttgcccagct atctgtcact ttattgtgaa gatagtggaa aaggaaggtg
961 gctcctacaa atgccatcat tgcgataaag gaaaggccat cgttgaagat gcctctgccg
1021 acagtggtcc caaagatgga cccccaccca cgaggagcat cgtggaaaaa gaagacgttc
1081 caaccacgtc ttcaaagcaa gtggattgat gtgatatctc cactgacgta agggatgacg
1141 cacaatccca ctatccttcg caagaccctt cctctatata aggaagttca tttcatttgg
1201 agagaacacg ggggactcta gagttaaccg ggctcaggcc tggcgcgcca ctagtggatc
1261 catcgatagt actgtcgacc tcgagggtac cgctcccggg atgtacccat acgatgttcc
1321 agattacgct gacaagcaga agaacggcat caaggtgaac ttcaagatcc gccacaacat
1381 cgaggacggc agcgtgcagc tcgccgacca ctaccagcag aacaccccca tcggcgacgg
1441 ccccgtgctg ctgcccgaca accactacct gagctaccag tccaagctga gcaaagaccc
1501 caacgagaag cgcgatcaca tggtcctgct ggagttcgtg accgccgccg ggatcactct
1561 cggcatggac gagctgtaca agtaagagct cgaatttccc cgatcgttca aacatttggc
1621 aataaagttt cttaagattg aatcctgttg ccggtcttgc gatgattatc atataatttc
1681 tgttgaatta cgttaagcat gtaataatta acatgtaatg catgacgtta tttatgagat
1741 gggtttttat gattagagtc ccgcaattat acatttaata cgcgatagaa aacaaaatat
1801 agcgcgcaaa ctaggataaa ttatcgcgcg cggtgtcatc tatgttacta gatcgggaat
1861 tcactggccg tcgttttaca acgtcgtgac tgggaaaacc ctggcgttac ccaacttaat
1921 cgccttgcag cacatccccc tttcgccagc tggcgtaata gcgaagaggc ccgcaccgat
1981 cgcccttccc aacagttgcg cagcctgaat ggcgaatggc gcctgatgcg gtattttctc
2041 cttacgcatc tgtgcggtat ttcacaccgc atatggtgca ctctcagtac aatctgctct
2101 gatgccgcat agttaagcca gccccgacac ccgccaacac ccgctgacgc gccctgacgg
2161 gcttgtctgc tcccggcatc cgcttacaga caagctgtga ccgtctccgg gagctgcatg
2221 tgtcagaggt tttcaccgtc atcaccgaaa cgcgcgagac gaaagggcct cgtgatacgc
2281 ctatttttat aggttaatgt catgataata atggtttctt agacgtcagg tggcactttt
2341 cggggaaatg tgcgcggaac ccctatttgt ttatttttct aaatacattc aaatatgtat
2401 ccgctcatga gacaataacc ctgataaatg cttcaataat attgaaaaag gaagagtatg
2461 agtattcaac atttccgtgt cgcccttatt cccttttttg cggcattttg ccttcctgtt
2521 tttgctcacc cagaaacgct ggtgaaagta aaagatgctg aagatcagtt gggtgcacga
2581 gtgggttaca tcgaactgga tctcaacagc ggtaagatcc ttgagagttt tcgccccgaa
2641 gaacgttttc caatgatgag cacttttaaa gttctgctat gtggcgcggt attatcccgt
2701 attgacgccg ggcaagagca actcggtcgc cgcatacact attctcagaa tgacttggtt
2761 gagtactcac cagtcacaga aaagcatctt acggatggca tgacagtaag agaattatgc
2821 agtgctgcca taaccatgag tgataacact gcggccaact tacttctgac aacgatcgga
2881 ggaccgaagg agctaaccgc ttttttgcac aacatggggg atcatgtaac tcgccttgat
2941 cgttgggaac cggagctgaa tgaagccata ccaaacgacg agcgtgacac cacgatgcct
3001 gtagcaatgg caacaacgtt gcgcaaacta ttaactggcg aactacttac tctagcttcc
3061 cggcaacaat taatagactg gatggaggcg gataaagttg caggaccact tctgcgctcg
3121 gcccttccgg ctggctggtt tattgctgat aaatctggag ccggtgagcg tgggtctcgc
3181 ggtatcattg cagcactggg gccagatggt aagccctccc gtatcgtagt tatctacacg
3241 acggggagtc aggcaactat ggatgaacga aatagacaga tcgctgagat aggtgcctca
3301 ctgattaagc attggtaact gtcagaccaa gtttactcat atatacttta gattgattta
3361 aaacttcatt tttaatttaa aaggatctag gtgaagatcc tttttgataa tctcatgacc
3421 aaaatccctt aacgtgagtt ttcgttccac tgagcgtcag accccgtaga aaagatcaaa
3481 ggatcttctt gagatccttt ttttctgcgc gtaatctgct gcttgcaaac aaaaaaacca
3541 ccgctaccag cggtggtttg tttgccggat caagagctac caactctttt tccgaaggta
3601 actggcttca gcagagcgca gataccaaat actgttcttc tagtgtagcc gtagttaggc
3661 caccacttca agaactctgt agcaccgcct acatacctcg ctctgctaat cctgttacca
3721 gtggctgctg ccagtggcga taagtcgtgt cttaccgggt tggactcaag acgatagtta
3781 ccggataagg cgcagcggtc gggctgaacg gggggttcgt gcacacagcc cagcttggag
3841 cgaacgacct acaccgaact gagataccta cagcgtgagc tatgagaaag cgccacgctt
3901 cccgaaggga gaaaggcgga caggtatccg gtaagcggca gggtcggaac aggagagcgc
3961 acgagggagc ttccaggggg aaacgcctgg tatctttata gtcctgtcgg gtttcgccac
4021 ctctgacttg agcgtcgatt tttgtgatgc tcgtcagggg ggcggagcct atggaaaaac
4081 gccagcaacg cggccttttt acggttcctg gccttttgct ggccttttgc tcacatgttc
//
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
名称：pUC-SPYCE(M)植物双分子荧光质粒
别称: pUC-SPYCE(M)
| 启动子: | 35s |
|---|---|
| 复制子: | pUC |
| 原核抗性: | Amp |
| 克隆菌株: | DH5a |
| 培养条件: | 37度 |
质粒属性
| 载体宿主： | 植物 |
|---|---|
| 载体用途： | 双分子荧光 |
| 基因种属： | |
| 基因类型： | |
| 原核抗性： | Amp |
| 筛选标记： | |
| 荧光蛋白： |
质粒简介
pUC-SPYCE(M)是一个植物细胞双分子荧光BIFC质粒。
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported 4140 bp ds-DNA circular SYN 04-JAN-2018
DEFINITION synthetic circular DNA
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..4140
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
promoter 863..1208
/label=CaMV 35S promoter
/note="strong constitutive promoter from cauliflower mosaic
virus"
misc_feature 1217..1300
/label=MCS
CDS 1304..1330
/codon_start=1
/product="HA (human influenza hemagglutinin) epitope tag"
/label=HA
/translation="YPYDVPDYA"
CDS 1331..1582
/codon_start=1
/product="C-terminal fragment of mVenus for use in
bimolecular fluorescence complementation (BiFC) (Kodama and
Hu, 2010)"
/label=VC155
/translation="DKQKNGIKVNFKIRHNIEDGSVQLADHYQQNTPIGDGPVLLPDNH
YLSYQSKLSKDPNEKRDHMVLLEFVTAAGITLGMDELYK"
terminator 1602..1854
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/note="nopaline synthase terminator and poly(A) signal"
promoter 2353..2457
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/label=AmpR promoter
CDS 2458..3318
/codon_start=1
/gene="bla"
/product="beta-lactamase"
/label=AmpR
/note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and
related antibiotics"
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ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS
PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW
EPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA
LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS
LIKHW"
rep_origin 3489..4077
/direction=RIGHT
/label=ori
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
ORIGIN
1 tttcctgcgt tatcccctga ttctgtggat aaccgtatta ccgcctttga gtgagctgat
61 accgctcgcc gcagccgaac gaccgagcgc agcgagtcag tgagcgagga agcggaagag
121 cgcccaatac gcaaaccgcc tctccccgcg cgttggccga ttcattaatg cagctggcac
181 gacaggtttc ccgactggaa agcgggcagt gagcgcaacg caattaatgt gagttagctc
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301 gtgagcggat aacaatttca cacaggaaac agctatgacc atgattacgc caagcttgca
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901 tcggattcca ttgcccagct atctgtcact ttattgtgaa gatagtggaa aaggaaggtg
961 gctcctacaa atgccatcat tgcgataaag gaaaggccat cgttgaagat gcctctgccg
1021 acagtggtcc caaagatgga cccccaccca cgaggagcat cgtggaaaaa gaagacgttc
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1261 catcgatagt actgtcgacc tcgagggtac cgctcccggg atgtacccat acgatgttcc
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1681 tgttgaatta cgttaagcat gtaataatta acatgtaatg catgacgtta tttatgagat
1741 gggtttttat gattagagtc ccgcaattat acatttaata cgcgatagaa aacaaaatat
1801 agcgcgcaaa ctaggataaa ttatcgcgcg cggtgtcatc tatgttacta gatcgggaat
1861 tcactggccg tcgttttaca acgtcgtgac tgggaaaacc ctggcgttac ccaacttaat
1921 cgccttgcag cacatccccc tttcgccagc tggcgtaata gcgaagaggc ccgcaccgat
1981 cgcccttccc aacagttgcg cagcctgaat ggcgaatggc gcctgatgcg gtattttctc
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2101 gatgccgcat agttaagcca gccccgacac ccgccaacac ccgctgacgc gccctgacgg
2161 gcttgtctgc tcccggcatc cgcttacaga caagctgtga ccgtctccgg gagctgcatg
2221 tgtcagaggt tttcaccgtc atcaccgaaa cgcgcgagac gaaagggcct cgtgatacgc
2281 ctatttttat aggttaatgt catgataata atggtttctt agacgtcagg tggcactttt
2341 cggggaaatg tgcgcggaac ccctatttgt ttatttttct aaatacattc aaatatgtat
2401 ccgctcatga gacaataacc ctgataaatg cttcaataat attgaaaaag gaagagtatg
2461 agtattcaac atttccgtgt cgcccttatt cccttttttg cggcattttg ccttcctgtt
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2821 agtgctgcca taaccatgag tgataacact gcggccaact tacttctgac aacgatcgga
2881 ggaccgaagg agctaaccgc ttttttgcac aacatggggg atcatgtaac tcgccttgat
2941 cgttgggaac cggagctgaa tgaagccata ccaaacgacg agcgtgacac cacgatgcct
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3121 gcccttccgg ctggctggtt tattgctgat aaatctggag ccggtgagcg tgggtctcgc
3181 ggtatcattg cagcactggg gccagatggt aagccctccc gtatcgtagt tatctacacg
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3301 ctgattaagc attggtaact gtcagaccaa gtttactcat atatacttta gattgattta
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3481 ggatcttctt gagatccttt ttttctgcgc gtaatctgct gcttgcaaac aaaaaaacca
3541 ccgctaccag cggtggtttg tttgccggat caagagctac caactctttt tccgaaggta
3601 actggcttca gcagagcgca gataccaaat actgttcttc tagtgtagcc gtagttaggc
3661 caccacttca agaactctgt agcaccgcct acatacctcg ctctgctaat cctgttacca
3721 gtggctgctg ccagtggcga taagtcgtgt cttaccgggt tggactcaag acgatagtta
3781 ccggataagg cgcagcggtc gggctgaacg gggggttcgt gcacacagcc cagcttggag
3841 cgaacgacct acaccgaact gagataccta cagcgtgagc tatgagaaag cgccacgctt
3901 cccgaaggga gaaaggcgga caggtatccg gtaagcggca gggtcggaac aggagagcgc
3961 acgagggagc ttccaggggg aaacgcctgg tatctttata gtcctgtcgg gtttcgccac
4021 ctctgacttg agcgtcgatt tttgtgatgc tcgtcagggg ggcggagcct atggaaaaac
4081 gccagcaacg cggccttttt acggttcctg gccttttgct ggccttttgc tcacatgttc
//
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
| P1111/pDawn光遗传学质粒 |
| P0085/pTXB1大肠表达质粒 |
| P0348/pTYB1大肠表达质粒 |
| P0066/pTWIN1大肠表达质粒 |
| P1840/pSmart1大肠表达质粒 |
| P0678/pSUMO大肠表达质粒 |
| P0904/pSUMO-mut大肠表达质粒 |
| P0932/pEZZ18大肠表达质粒 |
| P1174/pttq18大肠表达质粒 |
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文献和实验相关实验
【原创】6种核酸提取方法附引用文献：动植物RNA（总、m），DNA，质粒
mL，冰乙酸 23mL，无菌水 57mL，配制成 200mL 溶液)，充分混匀，冰浴 120 min．5> 12 000 r•min-1 离心 5 min，取上清，加入等体积氯仿抽提 1次，再取上清．6> 加人等体积预冷的异丙醇，轻轻倒转混匀，置于一2O℃放置 30 min．12 OOO r•min -1离心 5-10 min，弃上清，干燥沉淀．用 20 L无菌双蒸水溶解沉淀，一20℃保存备用．伍赠玲，黄天培，邱君志，等。一种改良的苏云金芽孢杆菌质粒DNA提取方法。福建农林大学学报(自然科学版
malachite green|孔雀（石）绿 malacophily|蜗媒[用于植物学] malaria vaccine|疟疾疫苗 maleimide|马来酰亚胺，顺丁烯二酰亚胺 maleylation|马来酰化，顺丁烯二酰化 malfolding|错折叠 malfunction|功能失常 malignancy|恶性肿瘤；恶性 malignant|恶性的
μL 体系 2× MasterMix 25 μL 上游 Primer （ 10 μM 1-5 μL 下游 Primer （ 10 μM ） 1-5 μL 模板 lamid DNA ～ 50 ng genomic DNA ～ 1000 ng cDNA ～ 500 ng 粗提液 ～ 2 μL 灭菌蒸馏水至 50 μL PCR 扩增实例： 一、plasmid DNA 扩增 1．提取的质粒 DNA 扩增 以pUC19 质粒为模板扩增 100，250，500
pUC-SPYCE(M)植物双分子荧光质粒
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