- ￥100 - 1000
- Xybio
- 上海
- P0455
- 2025年07月13日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20
- 保质期：
2年
- 英文名：
pNFkB-Luc
- 库存：
100
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格：
干粉/液体
名称：pNF-kB-Luc哺乳报告质粒
别称: pNFkB-Luc
| 启动子: | SV40 |
|---|---|
| 复制子: | pUC |
| 终止子: | SV40 poly(A) signal |
| 质粒分类: | 哺乳细胞，信号通路报告载体 |
| 原核抗性: | Amp |
| 克隆菌株: | DH5a |
| 培养条件: | 37度 |
| 表达宿主: | 哺乳细胞 |
| 5'测序引物: | Sv40-polyA-R：GAAATTTGTGATGCTATTGC |
| 3'测序引物: | 根据序列设计引物 |
质粒属性
| 载体宿主： | 哺乳细胞 |
|---|---|
| 载体用途： | 信号报告 |
| 基因种属： | |
| 基因类型： | |
| 原核抗性： | Amp |
| 真核抗性： | |
| 荧光蛋白： | fLuc |
质粒简介
pNF-kB-Luc质粒由上海烜雅生物科技有限公司提供
质粒图谱
质粒序列：详询
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
| P4465/pCMV-SPORT6-FAM210B（1点突变）人源基因质粒 |
| P4466/pCMV-SPORT6-EBI3人源基因质粒 |
| P4467/pCMV-SPORT6-NDUFB3人源基因质粒 |
| P4468/pCMV-SPORT6-GNG10人源基因质粒 |
| P4469/pCMV-SPORT6-SYPL1人源基因质粒 |
| P4470/pCMV-SPORT6-RAB7A人源基因质粒 |
| P4471/pCMV-SPORT6-MICALL2(2同义突变）人源基因质粒 |
| P4472/pCMV-SPORT6-DCTN6人源基因质粒 |
| P4473/pCMV-SPORT6-SSX5（1点突变1同义突变）人源基因质粒 |
| P4474/pCMV-SPORT6-CMTM5人源基因质粒 |
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文献和实验【求助】请教荧光素酶报告基因检测NF-KB转录活性需要哪些试剂？
阿兰梦 之前没有做过，只是根据文献的简单描述依葫芦画瓢，但是毕竟是好几千的试剂，生怕弄错了 临床医生一下子做科研，确实很多地方不懂，很艰难 目的是想用双荧光素酶报告基因的方法检测药物内皮细胞的NF-KB的转录活性影响，需要买pNF-kB-Luc 报告质粒，碧云天有；然后需要双荧光素酶报告基因检测系统，promega有；另外还需要一个内参，文献是β-半乳糖苷酶 问题是： 1、不知道买哪一个对： http://www
panzerking 我在设计实验 想用NF-kB-luc做报告基因 是不是一定要用β-galactosidase 报告质粒或者Renilla荧光素酶报告质粒作为内参？ 我看了有些文献 好像有的用 有的一个都没用 是有这样的情况吗 或者是不是只要保证control组NF-kB-luc转染条件一样就可以做为可用的数据了？ lwjssry 不可以，一定要用内参，需要校正对照和处理组细胞数目的差异
longyue99 各位大虾好 ，试验需要活化和抑制 NF-kB的活性 ，我试着用HBx表达质粒转染增强其活性，用碧云天的BAY 11-7082抑制其活性，用pNF-kB-LUC检测NF-kB的活性变化，均告失败，哪位有其他办法？望不吝赐教 lwjssry BAY 11-7082是肯定可以抑制的，莫非你的试剂有问题？换家公司的试试 lwjssry 还有，你的荧光素酶质粒的插入片段是什么
