相关产品推荐更多 >
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保质期:
2年
- 英文名:
Plasmid#60648
- 库存:
100
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格:
干粉/液体
名称:pcDNA3.1(+) CircRNA Mini Vector哺乳环状RNA质粒
别称: Plasmid#60648
| 启动子: | CMV |
|---|---|
| 复制子: | pUC |
| 原核抗性: | Amp |
| 筛选标记: | G418 |
| 克隆菌株: | DH5a |
| 培养条件: | 37度 |
质粒属性
| 载体宿主: | 哺乳细胞 |
|---|---|
| 载体用途: | 转录调控 |
| 基因种属: | |
| 基因类型: | cirRNA |
| 原核抗性: | Amp |
| 真核抗性: | Neo/G418 |
| 荧光蛋白: |
质粒简介
pcDNA3.1(+) CircRNA Mini Vector质粒由上海烜雅生物科技有限公司提供
质粒图谱
质粒序列:详询
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后,请先根据产品管壁标签来判断产品形式,并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉(常温运输,存于-20度,90天保质期,请务必转化挑单克隆培养,不要直接使用和测序)
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒;
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min,加入2μl质粒,再冰浴30min后,42℃热激60s,不要搅动,再冰浴2min;(从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作)
③加入900μl无抗的LB液体培养基,180rpm震荡37℃培养45min;
④6000rpm离心5min,仅留100μl上清液重悬细菌沉淀,并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;(可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布,可以比传统涂布方法获得更多转化子)
⑤将平板正向培养1h,再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h;
(菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态,要先转克隆感受态,重提质粒后再导入表达感受态)
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中,加入对应抗生素,220rpm震荡培养14h,根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种(冰袋运输,存于-80℃,保质期90天,请务必划线挑单克隆培养)
四区划线后挑单菌落培养,酵母菌需要先液体复苏再四区划线,再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种(冰袋运输,存于4℃,保质期7天)
穿刺接种,液体培养后四区划线,再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板(冰袋运输,存于4℃,保质期7天)
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒(冰袋运输,存于-20℃,保质期90天)
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒(常温运输,存于-20度,90天保质期,请务必转化挑单克隆培养,不要直接使用和测序)
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中,加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min,吸取5ul质粒转化,离心全涂。
二、转化图片
| P4676/pCMV-SPORT6-ZNF607人源基因质粒 |
| P4677/pCMV-SPORT6-BECN1人源基因质粒 |
| P4678/pCMV-SPORT6-CLIP4人源基因质粒 |
| P4679/pCMV-SPORT6-OMA1人源基因质粒 |
| P4680/pCMV-SPORT6-HDAC6人源基因质粒 |
| P4681/pCMV-SPORT6-PPIG人源基因质粒 |
| P4682/pCMV-SPORT6-MAPK6人源基因质粒 |
| P4683/pCMV-SPORT6-CMAS人源基因质粒 |
| P4684/pCMV-SPORT6-ILK人源基因质粒 |
| P4685/pCMV-SPORT6-EME1(1点突变)人源基因质粒 |
| P4686/pCMV-SPORT6-ATP5F1B人源基因质粒 |
| P4687/pCMV-SPORT6-PPP2CB人源基因质粒 |
风险提示:丁香通仅作为第三方平台,为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全,合理判断,谨慎选购商品,商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品,请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验Nat Methods:陈玲玲/杨力/李劲松等开发新技术,实现环状 RNA 功能性筛选和研究
随着技术的发展,人类基因组中的所谓「垃圾」基因正在人们面前揭开面纱。近年来,非编码 RNA 的相关研究备受关注,影响因子居高不下。其中环状RNA 是一大类非编码 RNA,年发文量也呈现逐年倍增的趋势(2017 年之后)。数据来源:PubMed但是对很多研究组来讲,如何筛选具有功能的环状 RNA,如何开展进一步的功能研究,仍然相当困难!近期,中科院多家机构合作,在这一领域取得重大突破,给人们带来了一项实用的技术。环状 RNA 和 CRISPR-Cas 系统环状 RNA(circRNA),是一类
1、质粒的概念 质粒(Plasmid)是一种存在于细菌、酵母等微生物细胞中的小型环状双链 DNA 分子,能够独立于宿主染色体进行自我复制,并通常携带对宿主生存非必需但具有特定功能的基因(如抗生素抗性基因)。质粒是分子生物学和基因工程中最重要的工具之一。 质粒根据其用途可以分为多种不同的类型,如用于保存序列信息的克隆质粒(如:pUC 系列质粒),用于表达蛋白的质粒(如哺乳动物细胞表达所用的 pcDNA3.1 系列质粒),用于基因编辑的质粒(如哺乳动物细胞基因编辑所用的 espCas9-2A
素酶检测。 3. circRNA: circRNA即环形RNA(circular RNA)的简称,是一类不具有5’末端帽子和3’ 末端poly(A)尾巴、并以共价键形成环形结构的客观存在于生物体内的非编码RNA分子。 circRNA主要特征: circRNA由特殊可变剪切产生,大量存在与真核细胞的细胞质中,主要来源于外显子,少部分内含子来源的circRNA存在细胞核中。 表达水平具有种属、组织、时间特异性。 circRNA呈闭合环状结构,不易被核酸外切酶降解,比线性RNA更加稳定。 具有一定序列保守











