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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
100
- 英文名:
pcDNA3.1(+) CircRNA Mini Vector
- 保质期:
90天
- 供应商:
优利科(上海)生命科学有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
质粒干粉
产品名称:pcDNA3.1(+) CircRNA Mini Vector质粒
产品规格:质粒干粉
有效期:90天,请尽快转化。
保存温度:一般在-20℃,置于-80℃保存时间更长。
运输方式:常温运输,1周内。
应用领域:转录调控
生长条件:LB +氨苄青霉素,37℃(克隆菌株DH5a,5607bp)
注意事项:转化前请准确查找该质粒相应的抗性、感受态和培养温度。(请向客服QQ索要质粒信息目录)


1.溶解: 收到质粒干粉后,请加入 20μl 无菌水至管底,溶解质粒,室温静置 1min;
2.混合(吸附质粒): 200μl 感受态细胞 + 质粒 DNA 5~10μl 混匀,冰上放置 30min;
3.热激导入: 42℃静置 90s;
4.收缩膜孔: 冰浴 2min;
5.修复培养: 毎管加 800μl LB 液体培养基,37 ℃培养 1h 150 r/min;
6.筛选培养: 将适当体积(100 μl)的复苏细胞,涂布在相应抗性的 LB 平板上,正置平皿 30min(琼脂面务必干燥后), 倒置培养 12-16h,出现菌落。
7.提取: 挑取单克隆菌落至相应抗性 LB 液体培养基中,震荡培养 12-16h,根据试验需要提取质粒。
pcDNA3.1(+) CircRNA Mini Vector质粒培养基:LB+50mcg/ml氨苄青霉素:酵母膏 5.0g,蛋白胨 10.0g,NaCl 10.0g,蒸馏水 1.0L,pH 7.0。121℃,15min灭菌。灭菌结束后,培养基冷却至40-50℃时加入氨苄青霉素,浓度50mcg/ml。
| pENTR223-DENR人源基因质粒 |
| pENTR223-C1orf158人源基因质粒 |
| pENTR223-RAB39B人源基因质粒 |
| pENTR223-RGS2人源基因质粒 |
| pENTR223-LYPD4人源基因质粒 |
| pENTR223-TESC人源基因质粒 |
| pENTR223-ABHD14B-A17T人源基因质粒 |
| pENTR223-SENP8人源基因质粒 |
| pENTR223-SLC6A11人源基因质粒 |
| pENTR223-NOL3人源基因质粒 |
| pENTR223-ZFAND6人源基因质粒 |
| pENTR223-RAN人源基因质粒 |
| pENTR223-ZC3HC1人源基因质粒 |
| pENTR223-HMGB1人源基因质粒 |
| pENTR223-TCP10L人源基因质粒 |
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文献和实验wangch84 各位高手,兄弟最近忙于质粒构建,意图将一段长约4000 bp的片段,通过BamH1和EcoR1两个酶切位点连接到pcDNA3.1+载体上。情况如下: 1. 通过LA Taq酶扩增,并纯化回收目的片段(引物中带有酶切位点,保护性碱基=3,上游带有Kozak序列);由于回收效率很高,所以在进行下一步双酶切时只加了12 μl的目的片段,H2O 20 μl,10 X K BUFFER 4 μl,两种酶各2 μl,37℃作用过夜(12-14 h
1、质粒的概念 质粒(Plasmid)是一种存在于细菌、酵母等微生物细胞中的小型环状双链 DNA 分子,能够独立于宿主染色体进行自我复制,并通常携带对宿主生存非必需但具有特定功能的基因(如抗生素抗性基因)。质粒是分子生物学和基因工程中最重要的工具之一。 质粒根据其用途可以分为多种不同的类型,如用于保存序列信息的克隆质粒(如:pUC 系列质粒),用于表达蛋白的质粒(如哺乳动物细胞表达所用的 pcDNA3.1 系列质粒),用于基因编辑的质粒(如哺乳动物细胞基因编辑所用的 espCas9-2A
Plasmid Mini Purification Protocol(质粒纯化)
This protocol is for Mini (up to 20 µg) preparations of high-copy plasmid DNA from cultures of E. coli .Important notes before startingNew users are strongly recommended to read Appendix A (page 21) at the end of this handbook before starting











