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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20
- 保质期:
2年
- 英文名:
Plasmid#16442
- 库存:
100
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格:
干粉/液体
名称:PG13-luc (wt p53 binding sites)哺乳报告质粒
别称: Plasmid#16442
| 原核抗性: | Amp |
|---|---|
| 克隆菌株: | DH5a |
| 培养条件: | 37度 |
质粒属性
| 载体宿主: | 哺乳细胞 |
|---|---|
| 载体用途: | 信号报告 |
| 基因种属: | |
| 基因类型: | |
| 原核抗性: | Amp |
| 真核抗性: | |
| 荧光蛋白: | fLuc |
质粒简介
pCDNA3.0-HA-p53质粒由上海烜雅生物科技有限公司提供
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported 6038 bp ds-DNA circular SYN 27-SEP-2017
DEFINITION synthetic circular DNA
ACCESSION .
VERSION .
KEYWORDS .
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE 1 (bases 1 to 6038)
AUTHORS .
TITLE Direct Submission
JOURNAL Exported Sep 27, 2017 from MiaoLingPlasmid
http://www.miaolingbio.com
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..6038
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
misc_feature 1..191
/label=wt p53 binding sites
CDS 491..2143
/codon_start=1
/gene="luc"
/product="firefly luciferase"
/label=luciferase
/translation="MEDAKNIKKGPAPFYPLEDGTAGEQLHKAMKRYALVPGTIAFTDA
HIEVNITYAEYFEMSVRLAEAMKRYGLNTNHRIVVCSENSLQFFMPVLGALFIGVAVAP
ANDIYNERELLNSMNISQPTVVFVSKKGLQKILNVQKKLPIIQKIIIMDSKTDYQGFQS
MYTFVTSHLPPGFNEYDFVPESFDRDKTIALIMNSSGSTGLPKGVALPHRTACVRFSHA
RDPIFGNQIIPDTAILSVVPFHHGFGMFTTLGYLICGFRVVLMYRFEEELFLRSLQDYK
IQSALLVPTLFSFFAKSTLIDKYDLSNLHEIASGGAPLSKEVGEAVAKRFHLPGIRQGY
GLTETTSAILITPEGDDKPGAVGKVVPFFEAKVVDLDTGKTLGVNQRGELCVRGPMIMS
GYVNNPEATNALIDKDGWLHSGDIAYWDEDEHFFIVDRLKSLIKYKGYQVAPAELESIL
LQHPNIFDAGVAGLPDDDAGELPAAVVVLEHGKTMTEKEIVDYVASQVTTAKKLRGGVV
FVDEVPKGLTGKLDARKIREILIKAKKGGKSKL"
CDS 2469..2489
/codon_start=1
/product="nuclear localization signal of SV40 (simian virus
40) large T antigen"
/label=SV40 NLS
/translation="PKKKRKV"
polyA_signal 2914..3048
/label=SV40 poly(A) signal
/note="SV40 polyadenylation signal"
rep_origin complement(3539..4127)
/direction=LEFT
/label=ori
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
CDS complement(4298..5158)
/codon_start=1
/gene="bla"
/product="beta-lactamase"
/label=AmpR
/note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and
related antibiotics"
/translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI
ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS
PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW
EPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA
LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS
LIKHW"
promoter complement(5159..5263)
/gene="bla"
/label=AmpR promoter
rep_origin complement(5289..5744)
/direction=LEFT
/label=f1 ori
/note="f1 bacteriophage origin of replication; arrow
indicates direction of (+) strand synthesis"
promoter 5909..5927
/label=T7 promoter
/note="promoter for bacteriophage T7 RNA polymerase"
ORIGIN
1 ccaggcaagt ccaggcaggc caggcaagtc caggcaggcc aggcaagtcc aggcaggcca
61 ggcaagtcca ggcaggccag gcaagtccag gcaggccagg caagtccagg caggccaggc
121 aagtccaggc agggccaggc aagtccaggc aggccaggca agtccaggca ggccaggcaa
181 gtccaggcag gatcgaattc gatctgtttt ttttagtatt aagcagaggc cgggggcccc
241 tggcctccgc ttactctgga gaaaaagaag agaggcattc cagaggcaac ttgtcaaaac
301 aggactggcg ccttggaggc gctgtggggc cacccaaatt gatataatta agccccaacc
361 gcctcttccc gcctcatttc agcctcacca ccctcgacaa gcttatcgat accgtcgggg
421 gatccactag ttctagagcg gccgccaccg cggtggagct cgagcttggc attccggtac
481 tgttggtaaa atggaagacg ccaaaaacat aaagaaaggc ccggcgccat tctatcctct
541 agaggatgga accgctggag agcaactgca taaggctatg aagagatacg ccctggttcc
601 tggaacaatt gcttttacag atgcacatat cgaggtgaac atcacgtacg cggaatactt
661 cgaaatgtcc gttcggttgg cagaagctat gaaacgatat gggctgaata caaatcacag
721 aatcgtcgta tgcagtgaaa actctcttca attctttatg ccggtgttgg gcgcgttatt
781 tatcggagtt gcagttgcgc ccgcgaacga catttataat gaacgtgaat tgctcaacag
841 tatgaacatt tcgcagccta ccgtagtgtt tgtttccaaa aaggggttgc aaaaaatttt
901 gaacgtgcaa aaaaaattac caataatcca gaaaattatt atcatggatt ctaaaacgga
961 ttaccaggga tttcagtcga tgtacacgtt cgtcacatct catctacctc ccggttttaa
1021 tgaatacgat tttgtaccag agtcctttga tcgtgacaaa acaattgcac tgataatgaa
1081 ttcctctgga tctactgggt tacctaaggg tgtggccctt ccgcatagaa ctgcctgcgt
1141 cagattctcg catgccagag atcctatttt tggcaatcaa atcattccgg atactgcgat
1201 tttaagtgtt gttccattcc atcacggttt tggaatgttt actacactcg gatatttgat
1261 atgtggattt cgagtcgtct taatgtatag atttgaagaa gagctgtttt tacgatccct
1321 tcaggattac aaaattcaaa gtgcgttgct agtaccaacc ctattttcat tcttcgccaa
1381 aagcactctg attgacaaat acgatttatc taatttacac gaaattgctt ctgggggcgc
1441 acctctttcg aaagaagtcg gggaagcggt tgcaaaacgc ttccatcttc cagggatacg
1501 acaaggatat gggctcactg agactacatc agctattctg attacacccg agggggatga
1561 taaaccgggc gcggtcggta aagttgttcc attttttgaa gcgaaggttg tggatctgga
1621 taccgggaaa acgctgggcg ttaatcagag aggcgaatta tgtgtcagag gacctatgat
1681 tatgtccggt tatgtaaaca atccggaagc gaccaacgcc ttgattgaca aggatggatg
1741 gctacattct ggagacatag cttactggga cgaagacgaa cacttcttca tagttgaccg
1801 cttgaagtct ttaattaaat acaaaggata tcaggtggcc cccgctgaat tggaatcgat
1861 attgttacaa caccccaaca tcttcgacgc gggcgtggca ggtcttcccg acgatgacgc
1921 cggtgaactt cccgccgccg ttgttgtttt ggagcacgga aagacgatga cggaaaaaga
1981 gatcgtggat tacgtcgcca gtcaagtaac aaccgcgaaa aagttgcgcg gaggagttgt
2041 gtttgtggac gaagtaccga aaggtcttac cggaaaactc gacgcaagaa aaatcagaga
2101 gatcctcata aaggccaaga agggcggaaa gtccaaattg taaaatgtaa ctgtattcag
2161 cgatgacgaa attcttagct attgtaatac tctagaggat ctttgtgaag gaaccttact
2221 tctgtggtgt gacataattg gacaaactac ctacagagat ttaaagctct aaggtaaata
2281 taaaattttt aagtgtataa tgtgttaaac tactgattct aattgtttgt gtattttaga
2341 ttccaaccta tggaactgat gaatgggagc agtggtggaa tgcctttaat gaggaaaacc
2401 tgttttgctc agaagaaatg ccatctagtg atgatgaggc tactgctgac tctcaacatt
2461 ctactcctcc aaaaaagaag agaaaggtag aagaccccaa ggactttcct tcagaattgc
2521 taagtttttt gagtcatgct gtgtttagta atagaactct tgcttgcttt gctatttaca
2581 ccacaaagga aaaagctgca ctgctataca agaaaattat ggaaaaatat tctgtaacct
2641 ttataagtag gcataacagt tataatcata acatactgtt ttttcttact ccacacaggc
2701 atagagtgtc tgctattaat aactatgctc aaaaattgtg tacctttagc tttttaattt
2761 gtaaaggggt taataaggaa tatttgatgt atagtgcctt gactagagat cataatcagc
2821 cataccacat ttgtagaggt tttacttgct ttaaaaaacc tcccacacct ccccctgaac
2881 ctgaaacata aaatgaatgc aattgttgtt gttaacttgt ttattgcagc ttataatggt
2941 tacaaataaa gcaatagcat cacaaatttc acaaataaag catttttttc actgcattct
3001 agttgtggtt tgtccaaact catcaatgta tcttatcatg tctggatcca ctagttctag
3061 agcggccgcc accgcggtgg agctccagct tttgttccct ttagtgaggg ttaatttcga
3121 gcttggcgta atcatggtca tagctgtttc ctgtgtgaaa ttgttatccg ctcacaattc
3181 cacacaacat acgagccgga agcataaagt gtaaagcctg gggtgcctaa tgagtgagct
3241 aactcacatt aattgcgttg cgctcactgc ccgctttcca gtcgggaaac ctgtcgtgcc
3301 agctgcatta atgaatcggc caacgcgcgg ggagaggcgg tttgcgtatt gggcgctctt
3361 ccgcttcctc gctcactgac tcgctgcgct cggtcgttcg gctgcggcga gcggtatcag
3421 ctcactcaaa ggcggtaata cggttatcca cagaatcagg ggataacgca ggaaagaaca
3481 tgtgagcaaa aggccagcaa aaggccagga accgtaaaaa ggccgcgttg ctggcgtttt
3541 tccataggct ccgcccccct gacgagcatc acaaaaatcg acgctcaagt cagaggtggc
3601 gaaacccgac aggactataa agataccagg cgtttccccc tggaagctcc ctcgtgcgct
3661 ctcctgttcc gaccctgccg cttaccggat acctgtccgc ctttctccct tcgggaagcg
3721 tggcgctttc tcatagctca cgctgtaggt atctcagttc ggtgtaggtc gttcgctcca
3781 agctgggctg tgtgcacgaa ccccccgttc agcccgaccg ctgcgcctta tccggtaact
3841 atcgtcttga gtccaacccg gtaagacacg acttatcgcc actggcagca gccactggta
3901 acaggattag cagagcgagg tatgtaggcg gtgctacaga gttcttgaag tggtggccta
3961 actacggcta cactagaaga acagtatttg gtatctgcgc tctgctgaag ccagttacct
4021 tcggaaaaag agttggtagc tcttgatccg gcaaacaaac caccgctggt agcggtggtt
4081 tttttgtttg caagcagcag attacgcgca gaaaaaaagg atctcaagaa gatcctttga
4141 tcttttctac ggggtctgac gctcagtgga acgaaaactc acgttaaggg attttggtca
4201 tgagattatc aaaaaggatc ttcacctaga tccttttaaa ttaaaaatga agttttaaat
4261 caatctaaag tatatatgag taaacttggt ctgacagtta ccaatgctta atcagtgagg
4321 cacctatctc agcgatctgt ctatttcgtt catccatagt tgcctgactc cccgtcgtgt
4381 agataactac gatacgggag ggcttaccat ctggccccag tgctgcaatg ataccgcgag
4441 acccacgctc accggctcca gatttatcag caataaacca gccagccgga agggccgagc
4501 gcagaagtgg tcctgcaact ttatccgcct ccatccagtc tattaattgt tgccgggaag
4561 ctagagtaag tagttcgcca gttaatagtt tgcgcaacgt tgttgccatt gctacaggca
4621 tcgtggtgtc acgctcgtcg tttggtatgg cttcattcag ctccggttcc caacgatcaa
4681 ggcgagttac atgatccccc atgttgtgca aaaaagcggt tagctccttc ggtcctccga
4741 tcgttgtcag aagtaagttg gccgcagtgt tatcactcat ggttatggca gcactgcata
4801 attctcttac tgtcatgcca tccgtaagat gcttttctgt gactggtgag tactcaacca
4861 agtcattctg agaatagtgt atgcggcgac cgagttgctc ttgcccggcg tcaatacggg
4921 ataataccgc gccacatagc agaactttaa aagtgctcat cattggaaaa cgttcttcgg
4981 ggcgaaaact ctcaaggatc ttaccgctgt tgagatccag ttcgatgtaa cccactcgtg
5041 cacccaactg atcttcagca tcttttactt tcaccagcgt ttctgggtga gcaaaaacag
5101 gaaggcaaaa tgccgcaaaa aagggaataa gggcgacacg gaaatgttga atactcatac
5161 tcttcctttt tcaatattat tgaagcattt atcagggtta ttgtctcatg agcggataca
5221 tatttgaatg tatttagaaa aataaacaaa taggggttcc gcgcacattt ccccgaaaag
5281 tgccacctaa attgtaagcg ttaatatttt gttaaaattc gcgttaaatt tttgttaaat
5341 cagctcattt tttaaccaat aggccgaaat cggcaaaatc ccttataaat caaaagaata
5401 gaccgagata gggttgagtg ttgttccagt ttggaacaag agtccactat taaagaacgt
5461 ggactccaac gtcaaagggc gaaaaaccgt ctatcagggc gatggcccac tacgtgaacc
5521 atcaccctaa tcaagttttt tggggtcgag gtgccgtaaa gcactaaatc ggaaccctaa
5581 agggagcccc cgatttagag cttgacgggg aaagccggcg aacgtggcga gaaaggaagg
5641 gaagaaagcg aaaggagcgg gcgctagggc gctggcaagt gtagcggtca cgctgcgcgt
5701 aaccaccaca cccgccgcgc ttaatgcgcc gctacagggc gcgtcccatt cgccattcag
5761 gctgcgcaac tgttgggaag ggcgatcggt gcgggcctct tcgctattac gccagctggc
5821 gaaaggggga tgtgctgcaa ggcgattaag ttgggtaacg ccagggtttt cccagtcacg
5881 acgttgtaaa acgacggcca gtgaattgta atacgactca ctatagggcg aattgggtac
5941 cgggcccccc ctcgaggtcg acggtatcga taagcttgat gccaggcaag tccaggcagg
6001 ccaggcaagt ccaggcaggc caggcaagtc caggcagg
//
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后,请先根据产品管壁标签来判断产品形式,并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉(常温运输,存于-20度,90天保质期,请务必转化挑单克隆培养,不要直接使用和测序)
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒;
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min,加入2μl质粒,再冰浴30min后,42℃热激60s,不要搅动,再冰浴2min;(从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作)
③加入900μl无抗的LB液体培养基,180rpm震荡37℃培养45min;
④6000rpm离心5min,仅留100μl上清液重悬细菌沉淀,并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;(可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布,可以比传统涂布方法获得更多转化子)
⑤将平板正向培养1h,再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h;
(菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态,要先转克隆感受态,重提质粒后再导入表达感受态)
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中,加入对应抗生素,220rpm震荡培养14h,根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种(冰袋运输,存于-80℃,保质期90天,请务必划线挑单克隆培养)
四区划线后挑单菌落培养,酵母菌需要先液体复苏再四区划线,再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种(冰袋运输,存于4℃,保质期7天)
穿刺接种,液体培养后四区划线,再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板(冰袋运输,存于4℃,保质期7天)
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒(冰袋运输,存于-20℃,保质期90天)
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒(常温运输,存于-20度,90天保质期,请务必转化挑单克隆培养,不要直接使用和测序)
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中,加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min,吸取5ul质粒转化,离心全涂。
二、转化图片
| P3587/pCMV-SPORT6-YRDC(5-840bp)人源基因质粒 |
| P3588/pCMV-SPORT6-GPM6B人源基因质粒 |
| P3589/pCMV-SPORT6-ATP6V1E2人源基因质粒 |
| P3590/pCMV-SPORT6-REEP6人源基因质粒 |
| P3591/pCMV-SPORT6-GNGT2人源基因质粒 |
| P3592/pCMV-SPORT6-ICA1(3同义突变1点突变)人源基因质粒 |
| P3593/pCMV-SPORT6-FICD人源基因质粒 |
| P3594/pCMV-SPORT6-PS-TPIP1人源基因质粒 |
| P3595/pCMV-SPORT6-KYNU(1同义突变)人源基因质粒 |
| P3596/pCMV-SPORT6-HIST1H2BK人源基因质粒 |
风险提示:丁香通仅作为第三方平台,为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全,合理判断,谨慎选购商品,商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品,请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验panzerking 我在设计实验 想用NF-kB-luc做报告基因 是不是一定要用β-galactosidase 报告质粒或者Renilla荧光素酶报告质粒作为内参? 我看了有些文献 好像有的用 有的一个都没用 是有这样的情况吗 或者是不是只要保证control组NF-kB-luc转染条件一样就可以做为可用的数据了? lwjssry 不可以,一定要用内参,需要校正对照和处理组细胞数目的差异
相关专题 在这里,我们对哺乳动物转录调控的激活方式进行讨论。以下为示意图 哺乳动物转录调控激活方式 • A factor is tissue-specific because it is synthesized only in a particular type of Cell . This is typical of factors that regulate development
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are less effectively targeted by siRNAs, as these may be richer in regulatory protein-binding sites. UTR-binding proteins and/or translation initiation complexes could interfere with binding of RISC to the target RNA. If the intent










