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PG13-luc (wt p53 binding sites

)哺乳报告质粒
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  • ¥100 - 1000
  • Xybio
  • 上海
  • P1566
  • 2025年07月12日
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    • 详细信息
    • 文献和实验
    • 技术资料
    • 保存条件

      -20

    • 保质期

      2年

    • 英文名

      Plasmid#16442

    • 库存

      100

    • 供应商

      上海烜雅生物科技有限公司

    • 规格

      干粉/液体

    基本信息
    名称:PG13-luc (wt p53 binding sites)哺乳报告质粒
    别称: Plasmid#16442
    原核抗性: Amp
    克隆菌株: DH5a
    培养条件: 37度


    质粒属性
    载体宿主: 哺乳细胞
    载体用途: 信号报告
    基因种属:  
    基因类型:  
    原核抗性: Amp
    真核抗性:  
    荧光蛋白: fLuc


    质粒简介
     pCDNA3.0-HA-p53质粒由上海烜雅生物科技有限公司提供

    质粒图谱
    产品细节图片1

    质粒序列
    LOCUS       Exported                6038 bp ds-DNA     circular SYN 27-SEP-2017
    DEFINITION  synthetic circular DNA
    ACCESSION   .
    VERSION     .
    KEYWORDS    .
    SOURCE      synthetic DNA construct
      ORGANISM  synthetic DNA construct
    REFERENCE   1  (bases 1 to 6038)
      AUTHORS   .
      TITLE     Direct Submission
      JOURNAL   Exported Sep 27, 2017 from MiaoLingPlasmid
                http://www.miaolingbio.com
    FEATURES             Location/Qualifiers
         source          1..6038
                         /organism="synthetic DNA construct"
                         /mol_type="other DNA"
         misc_feature    1..191
                         /label=wt p53 binding sites
         CDS             491..2143
                         /codon_start=1
                         /gene="luc"
                         /product="firefly luciferase"
                         /label=luciferase
                         /translation="MEDAKNIKKGPAPFYPLEDGTAGEQLHKAMKRYALVPGTIAFTDA
                         HIEVNITYAEYFEMSVRLAEAMKRYGLNTNHRIVVCSENSLQFFMPVLGALFIGVAVAP
                         ANDIYNERELLNSMNISQPTVVFVSKKGLQKILNVQKKLPIIQKIIIMDSKTDYQGFQS
                         MYTFVTSHLPPGFNEYDFVPESFDRDKTIALIMNSSGSTGLPKGVALPHRTACVRFSHA
                         RDPIFGNQIIPDTAILSVVPFHHGFGMFTTLGYLICGFRVVLMYRFEEELFLRSLQDYK
                         IQSALLVPTLFSFFAKSTLIDKYDLSNLHEIASGGAPLSKEVGEAVAKRFHLPGIRQGY
                         GLTETTSAILITPEGDDKPGAVGKVVPFFEAKVVDLDTGKTLGVNQRGELCVRGPMIMS
                         GYVNNPEATNALIDKDGWLHSGDIAYWDEDEHFFIVDRLKSLIKYKGYQVAPAELESIL
                         LQHPNIFDAGVAGLPDDDAGELPAAVVVLEHGKTMTEKEIVDYVASQVTTAKKLRGGVV
                         FVDEVPKGLTGKLDARKIREILIKAKKGGKSKL"
         CDS             2469..2489
                         /codon_start=1
                         /product="nuclear localization signal of SV40 (simian virus
                         40) large T antigen"
                         /label=SV40 NLS
                         /translation="PKKKRKV"
         polyA_signal    2914..3048
                         /label=SV40 poly(A) signal
                         /note="SV40 polyadenylation signal"
         rep_origin      complement(3539..4127)
                         /direction=LEFT
                         /label=ori
                         /note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of 
                         replication"
         CDS             complement(4298..5158)
                         /codon_start=1
                         /gene="bla"
                         /product="beta-lactamase"
                         /label=AmpR
                         /note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and
                         related antibiotics"
                         /translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI
                         ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS
                         PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW
                         EPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA
                         LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS
                         LIKHW"
         promoter        complement(5159..5263)
                         /gene="bla"
                         /label=AmpR promoter
         rep_origin      complement(5289..5744)
                         /direction=LEFT
                         /label=f1 ori
                         /note="f1 bacteriophage origin of replication; arrow 
                         indicates direction of (+) strand synthesis"
         promoter        5909..5927
                         /label=T7 promoter
                         /note="promoter for bacteriophage T7 RNA polymerase"
    ORIGIN
            1 ccaggcaagt ccaggcaggc caggcaagtc caggcaggcc aggcaagtcc aggcaggcca
           61 ggcaagtcca ggcaggccag gcaagtccag gcaggccagg caagtccagg caggccaggc
          121 aagtccaggc agggccaggc aagtccaggc aggccaggca agtccaggca ggccaggcaa
          181 gtccaggcag gatcgaattc gatctgtttt ttttagtatt aagcagaggc cgggggcccc
          241 tggcctccgc ttactctgga gaaaaagaag agaggcattc cagaggcaac ttgtcaaaac
          301 aggactggcg ccttggaggc gctgtggggc cacccaaatt gatataatta agccccaacc
          361 gcctcttccc gcctcatttc agcctcacca ccctcgacaa gcttatcgat accgtcgggg
          421 gatccactag ttctagagcg gccgccaccg cggtggagct cgagcttggc attccggtac
          481 tgttggtaaa atggaagacg ccaaaaacat aaagaaaggc ccggcgccat tctatcctct
          541 agaggatgga accgctggag agcaactgca taaggctatg aagagatacg ccctggttcc
          601 tggaacaatt gcttttacag atgcacatat cgaggtgaac atcacgtacg cggaatactt
          661 cgaaatgtcc gttcggttgg cagaagctat gaaacgatat gggctgaata caaatcacag
          721 aatcgtcgta tgcagtgaaa actctcttca attctttatg ccggtgttgg gcgcgttatt
          781 tatcggagtt gcagttgcgc ccgcgaacga catttataat gaacgtgaat tgctcaacag
          841 tatgaacatt tcgcagccta ccgtagtgtt tgtttccaaa aaggggttgc aaaaaatttt
          901 gaacgtgcaa aaaaaattac caataatcca gaaaattatt atcatggatt ctaaaacgga
          961 ttaccaggga tttcagtcga tgtacacgtt cgtcacatct catctacctc ccggttttaa
         1021 tgaatacgat tttgtaccag agtcctttga tcgtgacaaa acaattgcac tgataatgaa
         1081 ttcctctgga tctactgggt tacctaaggg tgtggccctt ccgcatagaa ctgcctgcgt
         1141 cagattctcg catgccagag atcctatttt tggcaatcaa atcattccgg atactgcgat
         1201 tttaagtgtt gttccattcc atcacggttt tggaatgttt actacactcg gatatttgat
         1261 atgtggattt cgagtcgtct taatgtatag atttgaagaa gagctgtttt tacgatccct
         1321 tcaggattac aaaattcaaa gtgcgttgct agtaccaacc ctattttcat tcttcgccaa
         1381 aagcactctg attgacaaat acgatttatc taatttacac gaaattgctt ctgggggcgc
         1441 acctctttcg aaagaagtcg gggaagcggt tgcaaaacgc ttccatcttc cagggatacg
         1501 acaaggatat gggctcactg agactacatc agctattctg attacacccg agggggatga
         1561 taaaccgggc gcggtcggta aagttgttcc attttttgaa gcgaaggttg tggatctgga
         1621 taccgggaaa acgctgggcg ttaatcagag aggcgaatta tgtgtcagag gacctatgat
         1681 tatgtccggt tatgtaaaca atccggaagc gaccaacgcc ttgattgaca aggatggatg
         1741 gctacattct ggagacatag cttactggga cgaagacgaa cacttcttca tagttgaccg
         1801 cttgaagtct ttaattaaat acaaaggata tcaggtggcc cccgctgaat tggaatcgat
         1861 attgttacaa caccccaaca tcttcgacgc gggcgtggca ggtcttcccg acgatgacgc
         1921 cggtgaactt cccgccgccg ttgttgtttt ggagcacgga aagacgatga cggaaaaaga
         1981 gatcgtggat tacgtcgcca gtcaagtaac aaccgcgaaa aagttgcgcg gaggagttgt
         2041 gtttgtggac gaagtaccga aaggtcttac cggaaaactc gacgcaagaa aaatcagaga
         2101 gatcctcata aaggccaaga agggcggaaa gtccaaattg taaaatgtaa ctgtattcag
         2161 cgatgacgaa attcttagct attgtaatac tctagaggat ctttgtgaag gaaccttact
         2221 tctgtggtgt gacataattg gacaaactac ctacagagat ttaaagctct aaggtaaata
         2281 taaaattttt aagtgtataa tgtgttaaac tactgattct aattgtttgt gtattttaga
         2341 ttccaaccta tggaactgat gaatgggagc agtggtggaa tgcctttaat gaggaaaacc
         2401 tgttttgctc agaagaaatg ccatctagtg atgatgaggc tactgctgac tctcaacatt
         2461 ctactcctcc aaaaaagaag agaaaggtag aagaccccaa ggactttcct tcagaattgc
         2521 taagtttttt gagtcatgct gtgtttagta atagaactct tgcttgcttt gctatttaca
         2581 ccacaaagga aaaagctgca ctgctataca agaaaattat ggaaaaatat tctgtaacct
         2641 ttataagtag gcataacagt tataatcata acatactgtt ttttcttact ccacacaggc
         2701 atagagtgtc tgctattaat aactatgctc aaaaattgtg tacctttagc tttttaattt
         2761 gtaaaggggt taataaggaa tatttgatgt atagtgcctt gactagagat cataatcagc
         2821 cataccacat ttgtagaggt tttacttgct ttaaaaaacc tcccacacct ccccctgaac
         2881 ctgaaacata aaatgaatgc aattgttgtt gttaacttgt ttattgcagc ttataatggt
         2941 tacaaataaa gcaatagcat cacaaatttc acaaataaag catttttttc actgcattct
         3001 agttgtggtt tgtccaaact catcaatgta tcttatcatg tctggatcca ctagttctag
         3061 agcggccgcc accgcggtgg agctccagct tttgttccct ttagtgaggg ttaatttcga
         3121 gcttggcgta atcatggtca tagctgtttc ctgtgtgaaa ttgttatccg ctcacaattc
         3181 cacacaacat acgagccgga agcataaagt gtaaagcctg gggtgcctaa tgagtgagct
         3241 aactcacatt aattgcgttg cgctcactgc ccgctttcca gtcgggaaac ctgtcgtgcc
         3301 agctgcatta atgaatcggc caacgcgcgg ggagaggcgg tttgcgtatt gggcgctctt
         3361 ccgcttcctc gctcactgac tcgctgcgct cggtcgttcg gctgcggcga gcggtatcag
         3421 ctcactcaaa ggcggtaata cggttatcca cagaatcagg ggataacgca ggaaagaaca
         3481 tgtgagcaaa aggccagcaa aaggccagga accgtaaaaa ggccgcgttg ctggcgtttt
         3541 tccataggct ccgcccccct gacgagcatc acaaaaatcg acgctcaagt cagaggtggc
         3601 gaaacccgac aggactataa agataccagg cgtttccccc tggaagctcc ctcgtgcgct
         3661 ctcctgttcc gaccctgccg cttaccggat acctgtccgc ctttctccct tcgggaagcg
         3721 tggcgctttc tcatagctca cgctgtaggt atctcagttc ggtgtaggtc gttcgctcca
         3781 agctgggctg tgtgcacgaa ccccccgttc agcccgaccg ctgcgcctta tccggtaact
         3841 atcgtcttga gtccaacccg gtaagacacg acttatcgcc actggcagca gccactggta
         3901 acaggattag cagagcgagg tatgtaggcg gtgctacaga gttcttgaag tggtggccta
         3961 actacggcta cactagaaga acagtatttg gtatctgcgc tctgctgaag ccagttacct
         4021 tcggaaaaag agttggtagc tcttgatccg gcaaacaaac caccgctggt agcggtggtt
         4081 tttttgtttg caagcagcag attacgcgca gaaaaaaagg atctcaagaa gatcctttga
         4141 tcttttctac ggggtctgac gctcagtgga acgaaaactc acgttaaggg attttggtca
         4201 tgagattatc aaaaaggatc ttcacctaga tccttttaaa ttaaaaatga agttttaaat
         4261 caatctaaag tatatatgag taaacttggt ctgacagtta ccaatgctta atcagtgagg
         4321 cacctatctc agcgatctgt ctatttcgtt catccatagt tgcctgactc cccgtcgtgt
         4381 agataactac gatacgggag ggcttaccat ctggccccag tgctgcaatg ataccgcgag
         4441 acccacgctc accggctcca gatttatcag caataaacca gccagccgga agggccgagc
         4501 gcagaagtgg tcctgcaact ttatccgcct ccatccagtc tattaattgt tgccgggaag
         4561 ctagagtaag tagttcgcca gttaatagtt tgcgcaacgt tgttgccatt gctacaggca
         4621 tcgtggtgtc acgctcgtcg tttggtatgg cttcattcag ctccggttcc caacgatcaa
         4681 ggcgagttac atgatccccc atgttgtgca aaaaagcggt tagctccttc ggtcctccga
         4741 tcgttgtcag aagtaagttg gccgcagtgt tatcactcat ggttatggca gcactgcata
         4801 attctcttac tgtcatgcca tccgtaagat gcttttctgt gactggtgag tactcaacca
         4861 agtcattctg agaatagtgt atgcggcgac cgagttgctc ttgcccggcg tcaatacggg
         4921 ataataccgc gccacatagc agaactttaa aagtgctcat cattggaaaa cgttcttcgg
         4981 ggcgaaaact ctcaaggatc ttaccgctgt tgagatccag ttcgatgtaa cccactcgtg
         5041 cacccaactg atcttcagca tcttttactt tcaccagcgt ttctgggtga gcaaaaacag
         5101 gaaggcaaaa tgccgcaaaa aagggaataa gggcgacacg gaaatgttga atactcatac
         5161 tcttcctttt tcaatattat tgaagcattt atcagggtta ttgtctcatg agcggataca
         5221 tatttgaatg tatttagaaa aataaacaaa taggggttcc gcgcacattt ccccgaaaag
         5281 tgccacctaa attgtaagcg ttaatatttt gttaaaattc gcgttaaatt tttgttaaat
         5341 cagctcattt tttaaccaat aggccgaaat cggcaaaatc ccttataaat caaaagaata
         5401 gaccgagata gggttgagtg ttgttccagt ttggaacaag agtccactat taaagaacgt
         5461 ggactccaac gtcaaagggc gaaaaaccgt ctatcagggc gatggcccac tacgtgaacc
         5521 atcaccctaa tcaagttttt tggggtcgag gtgccgtaaa gcactaaatc ggaaccctaa
         5581 agggagcccc cgatttagag cttgacgggg aaagccggcg aacgtggcga gaaaggaagg
         5641 gaagaaagcg aaaggagcgg gcgctagggc gctggcaagt gtagcggtca cgctgcgcgt
         5701 aaccaccaca cccgccgcgc ttaatgcgcc gctacagggc gcgtcccatt cgccattcag
         5761 gctgcgcaac tgttgggaag ggcgatcggt gcgggcctct tcgctattac gccagctggc
         5821 gaaaggggga tgtgctgcaa ggcgattaag ttgggtaacg ccagggtttt cccagtcacg
         5881 acgttgtaaa acgacggcca gtgaattgta atacgactca ctatagggcg aattgggtac
         5941 cgggcccccc ctcgaggtcg acggtatcga taagcttgat gccaggcaag tccaggcagg
         6001 ccaggcaagt ccaggcaggc caggcaagtc caggcagg
    //

    质粒菌株产品操作说明书
    一、扩增流程
             收到产品后,请先根据产品管壁标签来判断产品形式,并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
             1、质粒干粉(常温运输,存于-20度,90天保质期,请务必转化挑单克隆培养,不要直接使用和测序)
                  收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒;
                  1100μl 感受态于冰上解冻10min,加入2μl质粒,再冰浴30min后,42热激60s,不要搅动,再冰浴2min;(从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作)
                  加入900μl无抗的LB液体培养基,180rpm震荡37培养45min
                  6000rpm离心5min,仅留100μl上清液重悬细菌沉淀,并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;(可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布,可以比传统涂布方法获得更多转化子)
                  将平板正向培养1h,再倒置37培养14h。如果要求是30度则培养20h
    (菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态,要先转克隆感受态,重提质粒后再导入表达感受态)
                  挑取单菌落至LB液体培养基中,加入对应抗生素,220rpm震荡培养14h,根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
            2、甘油菌种(冰袋运输,存于-80,保质期90天,请务必划线挑单克隆培养)
                  四区划线后挑单菌落培养,酵母菌需要先液体复苏再四区划线,再挑单菌落液体培养。
            3、穿刺菌种(冰袋运输,存于4,保质期7天)
                  穿刺接种,液体培养后四区划线,再挑单菌落液体培养。
            4、菌落平板(冰袋运输,存于4,保质期7天)
                  直接挑取单菌落至液体培养基中。
            5、液体质粒(冰袋运输,存于-20,保质期90天)
                  单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
            6、滤纸质粒(常温运输,存于-20度,90天保质期,请务必转化挑单克隆培养,不要直接使用和测序)
                  收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中,加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min,吸取5ul质粒转化,离心全涂。

    二、转化图片
    产品细节图片2
    产品细节图片3
    P3587/pCMV-SPORT6-YRDC(5-840bp)人源基因质粒
    P3588/pCMV-SPORT6-GPM6B人源基因质粒
    P3589/pCMV-SPORT6-ATP6V1E2人源基因质粒
    P3590/pCMV-SPORT6-REEP6人源基因质粒
    P3591/pCMV-SPORT6-GNGT2人源基因质粒
    P3592/pCMV-SPORT6-ICA1(3同义突变1点突变)人源基因质粒
    P3593/pCMV-SPORT6-FICD人源基因质粒
    P3594/pCMV-SPORT6-PS-TPIP1人源基因质粒
    P3595/pCMV-SPORT6-KYNU(1同义突变)人源基因质粒
    P3596/pCMV-SPORT6-HIST1H2BK人源基因质粒
     

     

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