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- Xybio
- 上海
- P0187
- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20
- 保质期：
2年
- 英文名：
SuperCos I
- 库存：
100
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格：
干粉/液体
名称：SuperCos I噬菌体展示质粒
别称: SuperCos I
| 启动子: | SV40，T7，T3 |
|---|---|
| 复制子: | pBR322 |
| 质粒分类: | 哺乳细胞，蛋白过表达载体 |
| 质粒大小: | 7,9kb |
| 原核抗性: | Amp |
| 筛选标记: | G418 |
| 克隆菌株: | DH5a |
| 培养条件: | 37度 |
| 表达宿主: | 哺乳细胞 |
| 诱导方式: | 无须诱导，瞬时表达 |
| 5'测序引物: | T7:TAATACGACTCACTATAGGG |
| 3'测序引物: | BGH:TAGAAGGCACAGTCGAGG |
质粒属性
| 载体宿主： | 哺乳细胞 |
|---|---|
| 载体用途： | 蛋白表达 |
| 基因种属： | 空载体 |
| 基因类型： | ORF |
| 原核抗性： | Amp |
| 真核抗性： | Neo/G418 |
| 荧光蛋白： |
质粒简介
SuperCos 1 is a novel, 7.9-kb cosmid vector that contains bacteriophage promoter sequences flanking a unique cloning site (see Figure 1). This structure allows rapid synthesis of "walking" probes specific for the extreme ends of insert DNA. The SuperCos 1 vector is also engineered to contain genes for the amplification and expression of cosmid clones in eukaryotic cells. In addition, most genomic inserts can be excised as a single large restriction fragment using the Not I restriction site that flanks the SuperCos 1 polylinker.
质粒图谱
质粒序列：详询
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
| P1791/pENTR223-NBR2人源基因质粒 |
| P1792/pENTR223-ZNF706人源基因质粒 |
| P1793/pENTR223-NICE-5人源基因质粒 |
| P1794/pENTR223-ARL17B人源基因质粒 |
| P1795/pENTR223-COX6A2人源基因质粒 |
| P1859/pENTR223-MLLT11人源基因质粒 |
| P1796/pENTR223-MLLT11-G262C人源基因质粒 |
| P0609/pENTR223-FNDC5人源基因质粒 |
| P0611/pENTR223-RLN2人源基因质粒 |
| P0531/pENTR223-LGALS13人源基因质粒 |
| P0540/pENTR223-FMR1人源基因质粒 |
| P0620/pENTR223-MS4A1人源基因质粒 |
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文献和实验噬菌体展示技术是一种高效基因表达筛选技术，将外源蛋白或多肽与特定的噬菌体衣壳蛋白融合，展示在噬菌体表面并保持相对独立的空间构象和生物活性，有利于靶分子的特异性识别及结合，从而实现基因型和表达型的统一。 噬菌体展示技术因其独特的优势，现已广泛应用于抗原表位分析、单克隆抗体的制备、抗体人源化、药物筛选、疫苗研制以及免疫学疾病诊断、治疗等科学研究领域。 噬菌体技术为啥这么好用？为了一探究竟，我们先来弄清噬菌体是个啥？ 噬菌体是感染细菌、真菌、放线菌或螺旋体等微生物病毒的总称，因部分能引起
噬菌体展示库(phage display library) 的基本原理是将外源基因同丝状噬菌体 fd 或 MB 的外壳蛋白 P8 基因或 P3 基因融合后导入噬菌体基因组，表达产生的外源肽与外壳蛋白 P8 或 P3 形成融合蛋白，展示在噬菌体的表面。导入了各种各样外源基因的一群噬菌体，就构成一个展示各种各样外源肽的噬菌体展示库。当用一个蛋白质去筛查一个噬菌体展示库时，就会选择性地同与其有相互作用的某个外源肽相结合，从而分离出展示库里的某个特定的噬菌体，研究该噬菌体所含外源基因的生物学功能
]。当突变型噬菌体基因组小于野生型基因组的82%时，可以在缺少D蛋白的情况下完成组装，故D蛋白可作为外源序列融合的载体，而且展示的外源多肽在空间上是可以接近的。病毒颗粒的组装可以在体内也可以在体外，体外组装即是将D融合蛋白结合到λD-噬菌体表面，而体内组装是将含D融合基因的质粒转化入λD-溶源的大肠埃希菌菌种中，从而补偿溶源菌所缺的D蛋白，通过热诱导而组装。该系统有一个很好的特点，噬菌体上融合蛋白和D蛋白的比例可以由宿主的抑制tRNA活性加以控制，这对于展示那些可以对噬菌体装配造成损害的蛋白质时特别有用
