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- 2025年07月14日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20
- 保质期：
2年
- 英文名：
Plasmid #49082
- 库存：
100
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格：
干粉/液体
基本信息
名称：GW1-PercevalHR其它基因质粒
别称: Plasmid #49082
启动子：CMV
复制子: pUC
终止子: SV40 poly(A) signal
质粒分类: 基因文库质粒；其它基因质粒；其它种源质粒
质粒大小：7010bp
质粒标签：N-HA
原核抗性: Amp
筛选标记：新霉素Neo/G418
克隆菌株: DH5a
培养条件: 37度
质粒属性
载体宿主：哺乳细胞
载体用途：蛋白表达
基因种属：
基因类型：ORF
原核抗性：Amp
真核抗性：
荧光蛋白：
质粒简介
GW1-PercevalHR质粒通过hCMV IE4 启动子驱动PercevalHR基因的表达，Mammalian expression vector (CMV promoter) of PercevalHR, a fluorescent sensor of ATP-to-ADP ratio.
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported 7010 bp ds-DNA circular SYN 14-八月-2017
KEYWORDS GW1-PercevalHR
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE 1 (bases 1 to 7010)
TITLE Direct Submission
JOURNAL Exported 2017年8月14日 from MiaoLingPlasmid
http://www.snapgene.com
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..7010
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
CDS 189..1928
/codon_start=1
/note="PercevalHR"
/translation="MKKVESIIRPEKLEIVKKAL-SDAGYVGMTVSEVKGSGVQGGIFER
YRGRVYSAGYNSDNVYITADKQKNGIKANFKIRHNIEDGGVQLADHYQQNTPIGDGPVL
LPDNHYLSFQSKLSKDPNEKRDHMVLLEFVTAAGITLGMDELYKGGSGGMVSKGEELFT
GVVPILVELDGDVNGHKFSVSGEGEGDATYGKLTLKLICTTGKLPVPWPTLVTTLGYGL
QCFARYPDHMKQHDFFKSAMPEGYVQERTIFFKDDGNYKTRAEVKFEGDTLVNRIELKG
IDFKEDGNILGHKLEYNGTIVDLIPKVKIELVVKEEDVDNVIDIICENARTGNPGDGKI
FVIPVERVVRVRTKEEGASGGGSGGGGASGMKKVEAIIRPEKLEIVKKALS-DAGYVGMT
VSEVKGRGAGGGDLIPKVKIELVVKEEDVDNVIDIICENARTGNPGDGKIFVIPVERIV
RVRTKEEGASGGGGGSGGASGMKKVEAIIRPEKLEIVKKALNDDGYVGMTVSEVKGRGA
GGGDLIPKVKIELVVKEEDVDNIIDIICENARTGNPGDGKIFVIPVERVVRPRTKEEGK
EAL"
polyA_signal 2050..2184
/note="SV40 poly(A) signal"
/note="SV40 polyadenylation signal"
rep_origin complement(2610..3198)
/direction=LEFT
/note="ori"
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
CDS complement(3369..4229)
/codon_start=1
/gene="bla"
/product="beta-lactamase"
/note="AmpR"
/note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and
related antibiotics"
/translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI
ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS
PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW
EPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA
LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS
LIKHW"
misc_feature 5448..7010
/note="hCMV IE4 promoter"
enhancer 5448..5827
/note="CMV enhancer"
/note="human cytomegalovirus immediate early enhancer"
promoter 5828..6031
/note="CMV promoter"
/note="human cytomegalovirus (CMV) immediate early
promoter"
misc_feature 6032..7010
/note="CMV intron"
ORIGIN
1 aagcttcccg gccacagcaa tcgatccatg acacaaccag tgacaagcag tcccccagtg
61 aaaccgcatc cgcatccgag tccgataccg ataaagattc tgaatcggag tgagtgccgc
121 gtccgagagc gttccctgtc cacgtccacc atcggcggag caggtgtgcc tgaggcctct
181 agaccaccat gaaaaaggtt gaatccatca tcaggcccga aaagctggag atcgttaaga
241 aggctctctc ggacgctgga tatgtgggta tgaccgtctc tgaagtcaaa ggctctggcg
301 tccagggcgg catcttcgag aggtaccgag gaagggtgta ctctgcaggc tacaacagcg
361 acaacgtcta catcaccgcc gacaagcaga agaacggcat caaggccaac ttcaagatcc
421 gccacaacat cgaggacggc ggcgtgcagc tcgccgacca ctaccagcag aacaccccca
481 tcggcgacgg ccccgtgctg ctgcccgaca accactacct gagcttccag tccaagctga
541 gcaaagaccc caacgagaag cgcgatcaca tggtcctgct ggagttcgtg accgccgccg
601 ggatcactct cggcatggac gagctgtaca agggcggttc cggaggcatg gtgagcaagg
661 gcgaggagct gttcaccggg gtggtgccca tcctggtcga gctggacggc gacgtaaacg
721 gccacaagtt cagcgtgtcc ggcgagggcg agggcgatgc cacctacggc aagctgaccc
781 tgaagctgat ctgcaccacc ggcaagctgc ccgtgccctg gcccaccctc gtgaccaccc
841 tgggctacgg tctccaatgc ttcgcccgct accccgacca catgaagcag cacgacttct
901 tcaagtccgc catgcccgaa ggctacgtcc aggagcgcac catcttcttc aaggacgacg
961 gcaactacaa gacccgcgcc gaggtgaagt tcgagggcga caccctggtg aaccgcatcg
1021 agctgaaggg catcgacttc aaggaggacg gcaacatcct ggggcacaag cttgagtaca
1081 acggcaccat agtagatctg atccctaagg taaaaattga actagtggtg aaggaggagg
1141 acgtcgataa cgtgatagac attatttgcg aaaatgcccg cacaggtaac cccggcgacg
1201 gtaagatatt tgtgatccca gtggagcgag tggtcagggt gcgaaccaaa gaggagggag
1261 catctggtgg tggatccggt ggtggcggtg catctggtat gaaaaaggtt gaagctatta
1321 ttcgcccaga gaaactggag attgttaaga aggccctgtc cgacgccggc tatgttggca
1381 tgaccgtttc cgaggttaaa ggccgcggtg ccggcggtgg cgacctgatt cctaaggtga
1441 agatcgagct ggttgttaag gaggaagacg ttgataatgt tatcgacatt atctgcgaga
1501 acgcccgcac tggcaatcct ggtgacggca aaatcttcgt tataccggtc gagcgaattg
1561 tgcgagtacg aaccaaagaa gagggtgcct ccggcggtgg cggtggctcc ggtggcgcca
1621 gcggcatgaa gaaggttgag gccatcatcc gcccagagaa gctggaaatc gttaagaagg
1681 ccttaaacga cgacggctac gtcggcatga cagttagcga ggttaaaggt cgcggtgccg
1741 gtgggggtga tctgattcct aaggttaaaa tcgagctcgt tgttaaggag gaggacgttg
1801 acaacattat cgatatcatc tgcgaaaacg ctcgcaccgg caacccaggc gacggcaaga
1861 ttttcgtcat tcctgttgag agagtggtgc gtccccgtac gaaggaggag ggcaaggaag
1921 cactgtgact cgacgaattc attgatcata atcagccata ccacatttgt agaggtttta
1981 cttgctttaa aaaacctccc acacctcccc ctgaacctga aacataaaat gaatgcaatt
2041 gttgttgtta acttgtttat tgcagcttat aatggttaca aataaagcaa tagcatcaca
2101 aatttcacaa ataaagcatt tttttcactg cattctagtt gtggtttgtc caaactcatc
2161 aatgtatctt atcatgtctg gatccgtacc gagctcgcgt aatcatggtc atagctgttt
2221 cctgtgtgaa attgttatcc gctcacaatt ccacacaaca tacgagccgg aagcataaag
2281 tgtaaagcct ggggtgccta atgagtgagc taactcacat taattgcgtt gcgctcactg
2341 cccgctttcc agtcgggaaa cctgtcgtgc cagctgcatt aatgaatcgg ccaacgcgcg
2401 gggagaggcg gtttgcgtat tgggcgctct tccgcttcct cgctcactga ctcgctgcgc
2461 tcggtcgttc ggctgcggcg agcggtatca gctcactcaa aggcggtaat acggttatcc
2521 acagaatcag gggataacgc aggaaagaac atgtgagcaa aaggccagca aaaggccagg
2581 aaccgtaaaa aggccgcgtt gctggcgttt ttccataggc tccgcccccc tgacgagcat
2641 cacaaaaatc gacgctcaag tcagaggtgg cgaaacccga caggactata aagataccag
2701 gcgtttcccc ctggaagctc cctcgtgcgc tctcctgttc cgaccctgcc gcttaccgga
2761 tacctgtccg cctttctccc ttcgggaagc gtggcgcttt ctcaatgctc acgctgtagg
2821 tatctcagtt cggtgtaggt cgttcgctcc aagctgggct gtgtgcacga accccccgtt
2881 cagcccgacc gctgcgcctt atccggtaac tatcgtcttg agtccaaccc ggtaagacac
2941 gacttatcgc cactggcagc agccactggt aacaggatta gcagagcgag gtatgtaggc
3001 ggtgctacag agttcttgaa gtggtggcct aactacggct acactagaag gacagtattt
3061 ggtatctgcg ctctgctgaa gccagttacc ttcggaaaaa gagttggtag ctcttgatcc
3121 ggcaaacaaa ccaccgctgg tagcggtggt ttttttgttt gcaagcagca gattacgcgc
3181 agaaaaaaag gatctcaaga agatcctttg atcttttcta cggggtctga cgctcagtgg
3241 aacgaaaact cacgttaagg gattttggtc atgagattat caaaaaggat cttcacctag
3301 atccttttaa attaaaaatg aagttttaaa tcaatctaaa gtatatatga gtaaacttgg
3361 tctgacagtt accaatgctt aatcagtgag gcacctatct cagcgatctg tctatttcgt
3421 tcatccatag ttgcctgact ccccgtcgtg tagataacta cgatacggga gggcttacca
3481 tctggcccca gtgctgcaat gataccgcga gacccacgct caccggctcc agatttatca
3541 gcaataaacc agccagccgg aagggccgag cgcagaagtg gtcctgcaac tttatccgcc
3601 tccatccagt ctattaattg ttgccgggaa gctagagtaa gtagttcgcc agttaatagt
3661 ttgcgcaacg ttgttgccat tgctacaggc atcgtggtgt cacgctcgtc gtttggtatg
3721 gcttcattca gctccggttc ccaacgatca aggcgagtta catgatcccc catgttgtgc
3781 aaaaaagcgg ttagctcctt cggtcctccg atcgttgtca gaagtaagtt ggccgcagtg
3841 ttatcactca tggttatggc agcactgcat aattctctta ctgtcatgcc atccgtaaga
3901 tgcttttctg tgactggtga gtactcaacc aagtcattct gagaatagtg tatgcggcga
3961 ccgagttgct cttgcccggc gtcaatacgg gataataccg cgccacatag cagaacttta
4021 aaagtgctca tcattggaaa acgttcttcg gggcgaaaac tctcaaggat cttaccgctg
4081 ttgagatcca gttcgatgta acccactcgt gcacccaact gatcttcagc atcttttact
4141 ttcaccagcg tttctgggtg agcaaaaaca ggaaggcaaa atgccgcaaa aaagggaata
4201 agggcgacac ggaaatgttg aatactcata ctcttccttt ttcaataagc ggccgcggcc
4261 atgccggcca ctagtctcga gttattattg aagcatttat cagggttatt gtctcatgag
4321 cggatacata tttgaatgta tttagaaaaa taaacaaata ggggttccgc gcacatttcc
4381 ccgaaaagtg ccacctgacg tctaagaaac cattattatc atgacattaa cctataaaaa
4441 taggcgtatc acgaggccct ttcgtctcgc gcgtttcggt gatgacggtg aaaacctctg
4501 acacatgcag ctcccggaga cggtcacagc ttgtctgtaa gcggatgccg ggagcagaca
4561 agcccgtcag ggcgcgtcag cgggtgttgg cgggtgtcgg ggctggctta actatgcggc
4621 atcagagcag attgtactga gagtgcacca tatgaagacg tcgcctcctc actacttctg
4681 gaatagctca gaggccgagg cggcctcggc ctctgcataa ataaaaaaaa ttagtcagcg
4741 cgccattcgc cattcaggct gcgcaactgt tgggaagggc gatcggtgcg ggcctcttcg
4801 ctattacgcc agctggcgaa agggggatgt gctgcaaggc gattaagttg ggtaacgcca
4861 gggttttccc agtcacgacg ttgtaaaacg acggccagtg ccatctgcag tgaataataa
4921 aatgtgtgtt tgtccgaaat acgcgtttga gatttctgtc ccgactaaat tcatgtcgcg
4981 cgatagtggt gtttatcgcc gatagagatg gcgatattgg aaaaatcgat atttgaaaat
5041 atggcatatt gaaaatgtcg ccgatgtgag tttctgtgta actgatatcg ccatttttcc
5101 aaaagttgat ttttgggcat acgcgatatc tggcgatacg cttatatcgt ttacggggga
5161 tggcgataga cgcctttggt gacttgggcg attctgtgtg tcgcaaatat cgcagtttcg
5221 atataggtga cagacgatat gaggctatat cgccgataga ggcgacatca agctggcaca
5281 tggccaatgc atatcgatct atacattgaa tcaatattgg ccattagcca tattattcat
5341 tggttatata gcataaatca atattggcta ttggccattg catacgttgt atccatatca
5401 taatatgtac atttatattg gctcatgtcc aacattaccg ccatgttgac attgattatt
5461 gactagttat taatagtaat caattacggg gtcattagtt catagcccat atatggagtt
5521 ccgcgttaca taacttacgg taaatggccc gcctggctga ccgcccaacg acccccgccc
5581 attgacgtca ataatgacgt atgttcccat agtaacgcca atagggactt tccattgacg
5641 tcaatgggtg gagtatttac ggtaaactgc ccacttggca gtacatcaag tgtatcatat
5701 gccaagtacg ccccctattg acgtcaatga cggtaaatgg cccgcctggc attatgccca
5761 gtacatgacc ttatgggact ttcctacttg gcagtacatc tacgtattag tcatcgctat
5821 taccatggtg atgcggtttt ggcagtacat caatgggcgt ggatagcggt ttgactcacg
5881 gggatttcca agtctccacc ccattgacgt caatgggagt ttgttttggc accaaaatca
5941 acgggacttt ccaaaatgtc gtaacaactc cgccccattg acgcaaatgg gcggtaggcg
6001 tgtacggtgg gaggtctata taagcagagc tcgtttagtg aaccgtcaga tcgcctggag
6061 acgccatcca cgctgttttg acctccatag aagacaccgg gaccgatcca gcctccgcgg
6121 ccgggaacgg tgcattggaa cgcggattcc ccgtgccaag agtgacgtaa gtaccgccta
6181 tagagtctat aggcccaccc ccttggcttc ttatgcatgc tatactgttt ttggcttggg
6241 gtctatacac ccccgcttcc tcatgttata ggtgatggta tagcttagcc tataggtgtg
6301 ggttattgac cattattgac cactccccta ttggtgacga tactttccat tactaatcca
6361 taacatggct ctttgccaca actctcttta ttggctatat gccaatacac tgtccttcag
6421 agactgacac ggactctgta tttttacagg atggggtctc atttattatt tacaaattca
6481 catatacaac accaccgtcc ccagtgcccg cagtttttat taaacataac gtgggatctc
6541 cacgcgaatc tcgggtacgt gttccggaca tgggctcttc tccggtagcg gcggagcttc
6601 tacatccgag ccctgctccc atgcctccag cgactcatgg tcgctcggca gctccttgct
6661 cctaacagtg gaggccagac ttaggcacag cacgatgccc accaccacca gtgtgccgca
6721 caaggccgtg gcggtagggt atgtgtctga aaatgagctc ggggagcggg cttgcaccgc
6781 tgacgcattt ggaagactta aggcagcggc agaagaagat gcaggcagct gagttgttgt
6841 gttctgataa gagtcagagg taactcccgt tgcggtgctg ttaacggtgg agggcagtgt
6901 agtctgagca gtactcgttg ctgccgcgcg cgccaccaga cataatagct gacagactaa
6961 cagactgttc ctttccatgg gtcttttctg cagtcaccgt ccttgacacg
//
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
名称：GW1-PercevalHR其它基因质粒
别称: Plasmid #49082
启动子：CMV
复制子: pUC
终止子: SV40 poly(A) signal
质粒分类: 基因文库质粒；其它基因质粒；其它种源质粒
质粒大小：7010bp
质粒标签：N-HA
原核抗性: Amp
筛选标记：新霉素Neo/G418
克隆菌株: DH5a
培养条件: 37度
| 表达宿主: | 293T等哺乳细胞 |
|---|---|
| 培养条件: | 37℃，5%CO2 |
| 诱导方式: | 无需诱导 |
质粒属性
载体宿主：哺乳细胞
载体用途：蛋白表达
基因种属：
基因类型：ORF
原核抗性：Amp
真核抗性：
荧光蛋白：
质粒简介
GW1-PercevalHR质粒通过hCMV IE4 启动子驱动PercevalHR基因的表达，Mammalian expression vector (CMV promoter) of PercevalHR, a fluorescent sensor of ATP-to-ADP ratio.
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported 7010 bp ds-DNA circular SYN 14-八月-2017
KEYWORDS GW1-PercevalHR
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE 1 (bases 1 to 7010)
TITLE Direct Submission
JOURNAL Exported 2017年8月14日 from MiaoLingPlasmid
http://www.snapgene.com
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..7010
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
CDS 189..1928
/codon_start=1
/note="PercevalHR"
/translation="MKKVESIIRPEKLEIVKKAL-SDAGYVGMTVSEVKGSGVQGGIFER
YRGRVYSAGYNSDNVYITADKQKNGIKANFKIRHNIEDGGVQLADHYQQNTPIGDGPVL
LPDNHYLSFQSKLSKDPNEKRDHMVLLEFVTAAGITLGMDELYKGGSGGMVSKGEELFT
GVVPILVELDGDVNGHKFSVSGEGEGDATYGKLTLKLICTTGKLPVPWPTLVTTLGYGL
QCFARYPDHMKQHDFFKSAMPEGYVQERTIFFKDDGNYKTRAEVKFEGDTLVNRIELKG
IDFKEDGNILGHKLEYNGTIVDLIPKVKIELVVKEEDVDNVIDIICENARTGNPGDGKI
FVIPVERVVRVRTKEEGASGGGSGGGGASGMKKVEAIIRPEKLEIVKKALS-DAGYVGMT
VSEVKGRGAGGGDLIPKVKIELVVKEEDVDNVIDIICENARTGNPGDGKIFVIPVERIV
RVRTKEEGASGGGGGSGGASGMKKVEAIIRPEKLEIVKKALNDDGYVGMTVSEVKGRGA
GGGDLIPKVKIELVVKEEDVDNIIDIICENARTGNPGDGKIFVIPVERVVRPRTKEEGK
EAL"
polyA_signal 2050..2184
/note="SV40 poly(A) signal"
/note="SV40 polyadenylation signal"
rep_origin complement(2610..3198)
/direction=LEFT
/note="ori"
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
CDS complement(3369..4229)
/codon_start=1
/gene="bla"
/product="beta-lactamase"
/note="AmpR"
/note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and
related antibiotics"
/translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI
ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS
PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW
EPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA
LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS
LIKHW"
misc_feature 5448..7010
/note="hCMV IE4 promoter"
enhancer 5448..5827
/note="CMV enhancer"
/note="human cytomegalovirus immediate early enhancer"
promoter 5828..6031
/note="CMV promoter"
/note="human cytomegalovirus (CMV) immediate early
promoter"
misc_feature 6032..7010
/note="CMV intron"
ORIGIN
1 aagcttcccg gccacagcaa tcgatccatg acacaaccag tgacaagcag tcccccagtg
61 aaaccgcatc cgcatccgag tccgataccg ataaagattc tgaatcggag tgagtgccgc
121 gtccgagagc gttccctgtc cacgtccacc atcggcggag caggtgtgcc tgaggcctct
181 agaccaccat gaaaaaggtt gaatccatca tcaggcccga aaagctggag atcgttaaga
241 aggctctctc ggacgctgga tatgtgggta tgaccgtctc tgaagtcaaa ggctctggcg
301 tccagggcgg catcttcgag aggtaccgag gaagggtgta ctctgcaggc tacaacagcg
361 acaacgtcta catcaccgcc gacaagcaga agaacggcat caaggccaac ttcaagatcc
421 gccacaacat cgaggacggc ggcgtgcagc tcgccgacca ctaccagcag aacaccccca
481 tcggcgacgg ccccgtgctg ctgcccgaca accactacct gagcttccag tccaagctga
541 gcaaagaccc caacgagaag cgcgatcaca tggtcctgct ggagttcgtg accgccgccg
601 ggatcactct cggcatggac gagctgtaca agggcggttc cggaggcatg gtgagcaagg
661 gcgaggagct gttcaccggg gtggtgccca tcctggtcga gctggacggc gacgtaaacg
721 gccacaagtt cagcgtgtcc ggcgagggcg agggcgatgc cacctacggc aagctgaccc
781 tgaagctgat ctgcaccacc ggcaagctgc ccgtgccctg gcccaccctc gtgaccaccc
841 tgggctacgg tctccaatgc ttcgcccgct accccgacca catgaagcag cacgacttct
901 tcaagtccgc catgcccgaa ggctacgtcc aggagcgcac catcttcttc aaggacgacg
961 gcaactacaa gacccgcgcc gaggtgaagt tcgagggcga caccctggtg aaccgcatcg
1021 agctgaaggg catcgacttc aaggaggacg gcaacatcct ggggcacaag cttgagtaca
1081 acggcaccat agtagatctg atccctaagg taaaaattga actagtggtg aaggaggagg
1141 acgtcgataa cgtgatagac attatttgcg aaaatgcccg cacaggtaac cccggcgacg
1201 gtaagatatt tgtgatccca gtggagcgag tggtcagggt gcgaaccaaa gaggagggag
1261 catctggtgg tggatccggt ggtggcggtg catctggtat gaaaaaggtt gaagctatta
1321 ttcgcccaga gaaactggag attgttaaga aggccctgtc cgacgccggc tatgttggca
1381 tgaccgtttc cgaggttaaa ggccgcggtg ccggcggtgg cgacctgatt cctaaggtga
1441 agatcgagct ggttgttaag gaggaagacg ttgataatgt tatcgacatt atctgcgaga
1501 acgcccgcac tggcaatcct ggtgacggca aaatcttcgt tataccggtc gagcgaattg
1561 tgcgagtacg aaccaaagaa gagggtgcct ccggcggtgg cggtggctcc ggtggcgcca
1621 gcggcatgaa gaaggttgag gccatcatcc gcccagagaa gctggaaatc gttaagaagg
1681 ccttaaacga cgacggctac gtcggcatga cagttagcga ggttaaaggt cgcggtgccg
1741 gtgggggtga tctgattcct aaggttaaaa tcgagctcgt tgttaaggag gaggacgttg
1801 acaacattat cgatatcatc tgcgaaaacg ctcgcaccgg caacccaggc gacggcaaga
1861 ttttcgtcat tcctgttgag agagtggtgc gtccccgtac gaaggaggag ggcaaggaag
1921 cactgtgact cgacgaattc attgatcata atcagccata ccacatttgt agaggtttta
1981 cttgctttaa aaaacctccc acacctcccc ctgaacctga aacataaaat gaatgcaatt
2041 gttgttgtta acttgtttat tgcagcttat aatggttaca aataaagcaa tagcatcaca
2101 aatttcacaa ataaagcatt tttttcactg cattctagtt gtggtttgtc caaactcatc
2161 aatgtatctt atcatgtctg gatccgtacc gagctcgcgt aatcatggtc atagctgttt
2221 cctgtgtgaa attgttatcc gctcacaatt ccacacaaca tacgagccgg aagcataaag
2281 tgtaaagcct ggggtgccta atgagtgagc taactcacat taattgcgtt gcgctcactg
2341 cccgctttcc agtcgggaaa cctgtcgtgc cagctgcatt aatgaatcgg ccaacgcgcg
2401 gggagaggcg gtttgcgtat tgggcgctct tccgcttcct cgctcactga ctcgctgcgc
2461 tcggtcgttc ggctgcggcg agcggtatca gctcactcaa aggcggtaat acggttatcc
2521 acagaatcag gggataacgc aggaaagaac atgtgagcaa aaggccagca aaaggccagg
2581 aaccgtaaaa aggccgcgtt gctggcgttt ttccataggc tccgcccccc tgacgagcat
2641 cacaaaaatc gacgctcaag tcagaggtgg cgaaacccga caggactata aagataccag
2701 gcgtttcccc ctggaagctc cctcgtgcgc tctcctgttc cgaccctgcc gcttaccgga
2761 tacctgtccg cctttctccc ttcgggaagc gtggcgcttt ctcaatgctc acgctgtagg
2821 tatctcagtt cggtgtaggt cgttcgctcc aagctgggct gtgtgcacga accccccgtt
2881 cagcccgacc gctgcgcctt atccggtaac tatcgtcttg agtccaaccc ggtaagacac
2941 gacttatcgc cactggcagc agccactggt aacaggatta gcagagcgag gtatgtaggc
3001 ggtgctacag agttcttgaa gtggtggcct aactacggct acactagaag gacagtattt
3061 ggtatctgcg ctctgctgaa gccagttacc ttcggaaaaa gagttggtag ctcttgatcc
3121 ggcaaacaaa ccaccgctgg tagcggtggt ttttttgttt gcaagcagca gattacgcgc
3181 agaaaaaaag gatctcaaga agatcctttg atcttttcta cggggtctga cgctcagtgg
3241 aacgaaaact cacgttaagg gattttggtc atgagattat caaaaaggat cttcacctag
3301 atccttttaa attaaaaatg aagttttaaa tcaatctaaa gtatatatga gtaaacttgg
3361 tctgacagtt accaatgctt aatcagtgag gcacctatct cagcgatctg tctatttcgt
3421 tcatccatag ttgcctgact ccccgtcgtg tagataacta cgatacggga gggcttacca
3481 tctggcccca gtgctgcaat gataccgcga gacccacgct caccggctcc agatttatca
3541 gcaataaacc agccagccgg aagggccgag cgcagaagtg gtcctgcaac tttatccgcc
3601 tccatccagt ctattaattg ttgccgggaa gctagagtaa gtagttcgcc agttaatagt
3661 ttgcgcaacg ttgttgccat tgctacaggc atcgtggtgt cacgctcgtc gtttggtatg
3721 gcttcattca gctccggttc ccaacgatca aggcgagtta catgatcccc catgttgtgc
3781 aaaaaagcgg ttagctcctt cggtcctccg atcgttgtca gaagtaagtt ggccgcagtg
3841 ttatcactca tggttatggc agcactgcat aattctctta ctgtcatgcc atccgtaaga
3901 tgcttttctg tgactggtga gtactcaacc aagtcattct gagaatagtg tatgcggcga
3961 ccgagttgct cttgcccggc gtcaatacgg gataataccg cgccacatag cagaacttta
4021 aaagtgctca tcattggaaa acgttcttcg gggcgaaaac tctcaaggat cttaccgctg
4081 ttgagatcca gttcgatgta acccactcgt gcacccaact gatcttcagc atcttttact
4141 ttcaccagcg tttctgggtg agcaaaaaca ggaaggcaaa atgccgcaaa aaagggaata
4201 agggcgacac ggaaatgttg aatactcata ctcttccttt ttcaataagc ggccgcggcc
4261 atgccggcca ctagtctcga gttattattg aagcatttat cagggttatt gtctcatgag
4321 cggatacata tttgaatgta tttagaaaaa taaacaaata ggggttccgc gcacatttcc
4381 ccgaaaagtg ccacctgacg tctaagaaac cattattatc atgacattaa cctataaaaa
4441 taggcgtatc acgaggccct ttcgtctcgc gcgtttcggt gatgacggtg aaaacctctg
4501 acacatgcag ctcccggaga cggtcacagc ttgtctgtaa gcggatgccg ggagcagaca
4561 agcccgtcag ggcgcgtcag cgggtgttgg cgggtgtcgg ggctggctta actatgcggc
4621 atcagagcag attgtactga gagtgcacca tatgaagacg tcgcctcctc actacttctg
4681 gaatagctca gaggccgagg cggcctcggc ctctgcataa ataaaaaaaa ttagtcagcg
4741 cgccattcgc cattcaggct gcgcaactgt tgggaagggc gatcggtgcg ggcctcttcg
4801 ctattacgcc agctggcgaa agggggatgt gctgcaaggc gattaagttg ggtaacgcca
4861 gggttttccc agtcacgacg ttgtaaaacg acggccagtg ccatctgcag tgaataataa
4921 aatgtgtgtt tgtccgaaat acgcgtttga gatttctgtc ccgactaaat tcatgtcgcg
4981 cgatagtggt gtttatcgcc gatagagatg gcgatattgg aaaaatcgat atttgaaaat
5041 atggcatatt gaaaatgtcg ccgatgtgag tttctgtgta actgatatcg ccatttttcc
5101 aaaagttgat ttttgggcat acgcgatatc tggcgatacg cttatatcgt ttacggggga
5161 tggcgataga cgcctttggt gacttgggcg attctgtgtg tcgcaaatat cgcagtttcg
5221 atataggtga cagacgatat gaggctatat cgccgataga ggcgacatca agctggcaca
5281 tggccaatgc atatcgatct atacattgaa tcaatattgg ccattagcca tattattcat
5341 tggttatata gcataaatca atattggcta ttggccattg catacgttgt atccatatca
5401 taatatgtac atttatattg gctcatgtcc aacattaccg ccatgttgac attgattatt
5461 gactagttat taatagtaat caattacggg gtcattagtt catagcccat atatggagtt
5521 ccgcgttaca taacttacgg taaatggccc gcctggctga ccgcccaacg acccccgccc
5581 attgacgtca ataatgacgt atgttcccat agtaacgcca atagggactt tccattgacg
5641 tcaatgggtg gagtatttac ggtaaactgc ccacttggca gtacatcaag tgtatcatat
5701 gccaagtacg ccccctattg acgtcaatga cggtaaatgg cccgcctggc attatgccca
5761 gtacatgacc ttatgggact ttcctacttg gcagtacatc tacgtattag tcatcgctat
5821 taccatggtg atgcggtttt ggcagtacat caatgggcgt ggatagcggt ttgactcacg
5881 gggatttcca agtctccacc ccattgacgt caatgggagt ttgttttggc accaaaatca
5941 acgggacttt ccaaaatgtc gtaacaactc cgccccattg acgcaaatgg gcggtaggcg
6001 tgtacggtgg gaggtctata taagcagagc tcgtttagtg aaccgtcaga tcgcctggag
6061 acgccatcca cgctgttttg acctccatag aagacaccgg gaccgatcca gcctccgcgg
6121 ccgggaacgg tgcattggaa cgcggattcc ccgtgccaag agtgacgtaa gtaccgccta
6181 tagagtctat aggcccaccc ccttggcttc ttatgcatgc tatactgttt ttggcttggg
6241 gtctatacac ccccgcttcc tcatgttata ggtgatggta tagcttagcc tataggtgtg
6301 ggttattgac cattattgac cactccccta ttggtgacga tactttccat tactaatcca
6361 taacatggct ctttgccaca actctcttta ttggctatat gccaatacac tgtccttcag
6421 agactgacac ggactctgta tttttacagg atggggtctc atttattatt tacaaattca
6481 catatacaac accaccgtcc ccagtgcccg cagtttttat taaacataac gtgggatctc
6541 cacgcgaatc tcgggtacgt gttccggaca tgggctcttc tccggtagcg gcggagcttc
6601 tacatccgag ccctgctccc atgcctccag cgactcatgg tcgctcggca gctccttgct
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6781 tgacgcattt ggaagactta aggcagcggc agaagaagat gcaggcagct gagttgttgt
6841 gttctgataa gagtcagagg taactcccgt tgcggtgctg ttaacggtgg agggcagtgt
6901 agtctgagca gtactcgttg ctgccgcgcg cgccaccaga cataatagct gacagactaa
6961 cagactgttc ctttccatgg gtcttttctg cagtcaccgt ccttgacacg
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质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
| P2238/pQE30-Sirt4(25-314)人源基因质粒 |
| P2670/HLTV-hTRIM21人源基因质粒 |
| P2759/pET28a-FKBP8(268-611bp）人源基因质粒 |
| P4095/pET28a-IL18（1同义突变）人源基因质粒 |
| P4096/pET41a-CTNI人源基因质粒 |
| P2826/pGEX-4T-ACLY人源基因质粒 |
| P2827/pGEX-4T-SRSF9（1同义突变）人源基因质粒 |
| P2999/pGEX-6P-PTEN(AA350-403)人源基因质粒 |
| P3526/pGEX-4T-STK19人源基因质粒人源基因质粒 |
| P3607/pET28a-NDH2-YH(密码子优化)人源基因质粒 |
| P3735/pET15b-PABPC1人源基因质粒 |
| P4097/pET28a-TNC人源基因质粒 |
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文献和实验相关实验
xiongran 急求ISRE报告基因质粒，干扰素信号通路的报告基因，愿拿其它质粒作为交换！ shuyangsy1986 大哥，现在你弄到ISRE的报告基因的质粒没有啊，还有β-干扰素的啊，我也需要啊，先谢了啊 xiongran 几百年前的事情了，没有求到，我都不做这个了 本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴
【求助】将报告基因质粒转染到癌细胞中，是否都要共转染一个带有抗性基因的质粒来筛选阳性克隆？
lsdcfhyj 将报告基因质粒转染到癌细胞中，是否都要共转染一个带有抗性基因的质粒来筛选阳性克隆？ 很多文献是这样做的，可是我认为报告基因质粒本身就带有抗生素标记基因，为什么还要共转染另一个抗性质粒？一直对着个问题很困惑，请懂这方面知识的前辈指点指点？还有就是质粒使用量的问题，我不清楚到底质粒用量与转染细胞之间到底是个什么样的比例合适，看了很多操作步骤，有的一个六孔板一孔就要用1到2微克，可是商家产品就有1微克包装的，这样的话，那用量未免
云忆香香 最近分配到一个课题，但是刚开始学习，不知怎么做，请各位给点提示，谢谢！ 课题大致意思：已知一个质粒的目的基因序列，却不知道质粒序列，导师要求测出质粒的序列，有提示用染色体步移的方法。 Ps：1，这个质粒很大，估计又20-30kb；2，目前市场上有测未知序列的试剂盒，但是最多测到3kb，我不知道用什么办法使其连续测下去；3，我的酶切位点都不知道； 谢谢各位支持~ zjubell
GW1-PercevalHR其它基因质粒
￥100 - 1000
