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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20
- 保质期:
2年
- 英文名:
Plasmid#14886
- 库存:
100
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格:
干粉/液体
名称:IgK-IFN-luc人源启动子质粒
别名:Plasmid#14886
复制子: pUC
原核抗性: Amp
筛选标记:荧光素酶Luc
克隆菌株: DH5a
培养条件: 37度
质粒属性
载体宿主:哺乳细胞
载体用途:启动子检测
基因种属:人
基因类型:Promoter
原核抗性:Amp
真核抗性:
荧光蛋白:fLuc
质粒简介
IgK-IFN-luc是一个人源启动子哺乳细胞荧光素酶报告质粒。
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported 5863 bp ds-DNA circular SYN 21-DEC-2017
DEFINITION synthetic circular DNA
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..5863
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
rep_origin complement(474..1062)
/direction=LEFT
/label=ori
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
CDS complement(1233..2093)
/codon_start=1
/gene="bla"
/product="beta-lactamase"
/label=AmpR
/note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and
related antibiotics"
/translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI
ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS
PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW
EPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA
LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS
LIKHW"
promoter complement(2094..2198)
/gene="bla"
/label=AmpR promoter
rep_origin complement(2224..2679)
/direction=LEFT
/label=f1 ori
/note="f1 bacteriophage origin of replication; arrow
indicates direction of (+) strand synthesis"
polyA_signal 2872..3006
/label=SV40 poly(A) signal
/note="SV40 polyadenylation signal"
misc_feature 3023..3180
/label=IgK-IFN
CDS 3210..4862
/codon_start=1
/gene="luc"
/product="firefly luciferase"
/label=luciferase
/translation="MEDAKNIKKGPAPFYPLEDGTAGEQLHKAMKRYALVPGTIAFTDA
HIEVNITYAEYFEMSVRLAEAMKRYGLNTNHRIVVCSENSLQFFMPVLGALFIGVAVAP
ANDIYNERELLNSMNISQPTVVFVSKKGLQKILNVQKKLPIIQKIIIMDSKTDYQGFQS
MYTFVTSHLPPGFNEYDFVPESFDRDKTIALIMNSSGSTGLPKGVALPHRTACVRFSHA
RDPIFGNQIIPDTAILSVVPFHHGFGMFTTLGYLICGFRVVLMYRFEEELFLRSLQDYK
IQSALLVPTLFSFFAKSTLIDKYDLSNLHEIASGGAPLSKEVGEAVAKRFHLPGIRQGY
GLTETTSAILITPEGDDKPGAVGKVVPFFEAKVVDLDTGKTLGVNQRGELCVRGPMIMS
GYVNNPEATNALIDKDGWLHSGDIAYWDEDEHFFIVDRLKSLIKYKGYQVAPAELESIL
LQHPNIFDAGVAGLPDDDAGELPAAVVVLEHGKTMTEKEIVDYVASQVTTAKKLRGGVV
FVDEVPKGLTGKLDARKIREILIKAKKGGKSKL"
intron 5086..5151
/label=small t intron
/note="simian virus 40 (SV40) small t antigen intron"
CDS 5281..5301
/codon_start=1
/product="nuclear localization signal of SV40 large T
antigen"
/label=SV40 NLS
/translation="PKKKRKV"
polyA_signal 5726..5860
/label=SV40 poly(A) signal
/note="SV40 polyadenylation signal"
ORIGIN
1 ctcgaggggg ggcccggtac cagcttttgt tccctttagt gagggttaat ttcgagcttg
61 gcgtaatcat ggtcatagct gtttcctgtg tgaaattgtt atccgctcac aattccacac
121 aacatacgag ccggaagcat aaagtgtaaa gcctggggtg cctaatgagt gagctaactc
181 acattaattg cgttgcgctc actgcccgct ttccagtcgg gaaacctgtc gtgccagctg
241 cattaatgaa tcggccaacg cgcggggaga ggcggtttgc gtattgggcg ctcttccgct
301 tcctcgctca ctgactcgct gcgctcggtc gttcggctgc ggcgagcggt atcagctcac
361 tcaaaggcgg taatacggtt atccacagaa tcaggggata acgcaggaaa gaacatgtga
421 gcaaaaggcc agcaaaaggc caggaaccgt aaaaaggccg cgttgctggc gtttttccat
481 aggctccgcc cccctgacga gcatcacaaa aatcgacgct caagtcagag gtggcgaaac
541 ccgacaggac tataaagata ccaggcgttt ccccctggaa gctccctcgt gcgctctcct
601 gttccgaccc tgccgcttac cggatacctg tccgcctttc tcccttcggg aagcgtggcg
661 ctttctcata gctcacgctg taggtatctc agttcggtgt aggtcgttcg ctccaagctg
721 ggctgtgtgc acgaaccccc cgttcagccc gaccgctgcg ccttatccgg taactatcgt
781 cttgagtcca acccggtaag acacgactta tcgccactgg cagcagccac tggtaacagg
841 attagcagag cgaggtatgt aggcggtgct acagagttct tgaagtggtg gcctaactac
901 ggctacacta gaagaacagt atttggtatc tgcgctctgc tgaagccagt taccttcgga
961 aaaagagttg gtagctcttg atccggcaaa caaaccaccg ctggtagcgg tggttttttt
1021 gtttgcaagc agcagattac gcgcagaaaa aaaggatctc aagaagatcc tttgatcttt
1081 tctacggggt ctgacgctca gtggaacgaa aactcacgtt aagggatttt ggtcatgaga
1141 ttatcaaaaa ggatcttcac ctagatcctt ttaaattaaa aatgaagttt taaatcaatc
1201 taaagtatat atgagtaaac ttggtctgac agttaccaat gcttaatcag tgaggcacct
1261 atctcagcga tctgtctatt tcgttcatcc atagttgcct gactccccgt cgtgtagata
1321 actacgatac gggagggctt accatctggc cccagtgctg caatgatacc gcgagaccca
1381 cgctcaccgg ctccagattt atcagcaata aaccagccag ccggaagggc cgagcgcaga
1441 agtggtcctg caactttatc cgcctccatc cagtctatta attgttgccg ggaagctaga
1501 gtaagtagtt cgccagttaa tagtttgcgc aacgttgttg ccattgctac aggcatcgtg
1561 gtgtcacgct cgtcgtttgg tatggcttca ttcagctccg gttcccaacg atcaaggcga
1621 gttacatgat cccccatgtt gtgcaaaaaa gcggttagct ccttcggtcc tccgatcgtt
1681 gtcagaagta agttggccgc agtgttatca ctcatggtta tggcagcact gcataattct
1741 cttactgtca tgccatccgt aagatgcttt tctgtgactg gtgagtactc aaccaagtca
1801 ttctgagaat agtgtatgcg gcgaccgagt tgctcttgcc cggcgtcaat acgggataat
1861 accgcgccac atagcagaac tttaaaagtg ctcatcattg gaaaacgttc ttcggggcga
1921 aaactctcaa ggatcttacc gctgttgaga tccagttcga tgtaacccac tcgtgcaccc
1981 aactgatctt cagcatcttt tactttcacc agcgtttctg ggtgagcaaa aacaggaagg
2041 caaaatgccg caaaaaaggg aataagggcg acacggaaat gttgaatact catactcttc
2101 ctttttcaat attattgaag catttatcag ggttattgtc tcatgagcgg atacatattt
2161 gaatgtattt agaaaaataa acaaataggg gttccgcgca catttccccg aaaagtgcca
2221 cctaaattgt aagcgttaat attttgttaa aattcgcgtt aaatttttgt taaatcagct
2281 cattttttaa ccaataggcc gaaatcggca aaatccctta taaatcaaaa gaatagaccg
2341 agatagggtt gagtgttgtt ccagtttgga acaagagtcc actattaaag aacgtggact
2401 ccaacgtcaa agggcgaaaa accgtctatc agggcgatgg cccactacgt gaaccatcac
2461 cctaatcaag ttttttgggg tcgaggtgcc gtaaagcact aaatcggaac cctaaaggga
2521 gcccccgatt tagagcttga cggggaaagc cggcgaacgt ggcgagaaag gaagggaaga
2581 aagcgaaagg agcgggcgct agggcgctgg caagtgtagc ggtcacgctg cgcgtaacca
2641 ccacacccgc cgcgcttaat gcgccgctac agggcgcgtc ccattcgcca ttcaggctgc
2701 gcaactgttg ggaagggcga tcggtgcggg cctcttcgct attacgccag ctggcgaaag
2761 ggggatgtgc tgcaaggcga ttaagttggg taacgccagg gttttcccag tcacgacgtt
2821 gtaaaacgac ggccagtgaa ttgtaatacg actcactata gggcgaattg gaacttgttt
2881 attgcagctt ataatggtta caaataaagc aatagcatca caaatttcac aaataaagca
2941 tttttttcac tgcattctag ttgtggtttg tccaaactca tcaatgtatc ttatcatgtc
3001 tggatcgatc cccccaccgc ggtggcggcc cacagagggg actttccgag agatctacag
3061 aggggacttt ccgagagcga gcttgggctg caggtcgaga tccgctgaat agagagagga
3121 ccatctcata taaataggcc atacccatgg agaaaggaca ttctaactgc aacctttcgc
3181 aagcttggca ttccggtact gttggtaaaa tggaagacgc caaaaacata aagaaaggcc
3241 cggcgccatt ctatcctcta gaggatggaa ccgctggaga gcaactgcat aaggctatga
3301 agagatacgc cctggttcct ggaacaattg cttttacaga tgcacatatc gaggtgaaca
3361 tcacgtacgc ggaatacttc gaaatgtccg ttcggttggc agaagctatg aaacgatatg
3421 ggctgaatac aaatcacaga atcgtcgtat gcagtgaaaa ctctcttcaa ttctttatgc
3481 cggtgttggg cgcgttattt atcggagttg cagttgcgcc cgcgaacgac atttataatg
3541 aacgtgaatt gctcaacagt atgaacattt cgcagcctac cgtagtgttt gtttccaaaa
3601 aggggttgca aaaaattttg aacgtgcaaa aaaaattacc aataatccag aaaattatta
3661 tcatggattc taaaacggat taccagggat ttcagtcgat gtacacgttc gtcacatctc
3721 atctacctcc cggttttaat gaatacgatt ttgtaccaga gtcctttgat cgtgacaaaa
3781 caattgcact gataatgaat tcctctggat ctactgggtt acctaagggt gtggcccttc
3841 cgcatagaac tgcctgcgtc agattctcgc atgccagaga tcctattttt ggcaatcaaa
3901 tcattccgga tactgcgatt ttaagtgttg ttccattcca tcacggtttt ggaatgttta
3961 ctacactcgg atatttgata tgtggatttc gagtcgtctt aatgtataga tttgaagaag
4021 agctgttttt acgatccctt caggattaca aaattcaaag tgcgttgcta gtaccaaccc
4081 tattttcatt cttcgccaaa agcactctga ttgacaaata cgatttatct aatttacacg
4141 aaattgcttc tgggggcgca cctctttcga aagaagtcgg ggaagcggtt gcaaaacgct
4201 tccatcttcc agggatacga caaggatatg ggctcactga gactacatca gctattctga
4261 ttacacccga gggggatgat aaaccgggcg cggtcggtaa agttgttcca ttttttgaag
4321 cgaaggttgt ggatctggat accgggaaaa cgctgggcgt taatcagaga ggcgaattat
4381 gtgtcagagg acctatgatt atgtccggtt atgtaaacaa tccggaagcg accaacgcct
4441 tgattgacaa ggatggatgg ctacattctg gagacatagc ttactgggac gaagacgaac
4501 acttcttcat agttgaccgc ttgaagtctt taattaaata caaaggatat caggtggccc
4561 ccgctgaatt ggaatcgata ttgttacaac accccaacat cttcgacgcg ggcgtggcag
4621 gtcttcccga cgatgacgcc ggtgaacttc ccgccgccgt tgttgttttg gagcacggaa
4681 agacgatgac ggaaaaagag atcgtggatt acgtcgccag tcaagtaaca accgcgaaaa
4741 agttgcgcgg aggagttgtg tttgtggacg aagtaccgaa aggtcttacc ggaaaactcg
4801 acgcaagaaa aatcagagag atcctcataa aggccaagaa gggcggaaag tccaaattgt
4861 aaaatgtaac tgtattcagc gatgacgaaa ttcttagcta ttgtaatatt atatgcaaat
4921 tgatgaatgg taattttgta attgtgggtc actgtactat tttaacgaat aataaaatca
4981 ggtataggta actaaaaagg aattcggggg atctttgtga aggaacctta cttctgtggt
5041 gtgacataat tggacaaact acctacagag atttaaagct ctaaggtaaa tataaaattt
5101 ttaagtgtat aatgtgttaa actactgatt ctaattgttt gtgtatttta gattccaacc
5161 tatggaactg atgaatggga gcagtggtgg aatgccttta atgaggaaaa cctgttttgc
5221 tcagaagaaa tgccatctag tgatgatgag gctactgctg actctcaaca ttctactcct
5281 ccaaaaaaga agagaaaggt agaagacccc aaggactttc cttcagaatt gctaagtttt
5341 ttgagtcatg ctgtgtttag taatagaact cttgcttgct ttgctattta caccacaaag
5401 gaaaaagctg cactgctata caagaaaatt atggaaaaat attctgtaac ctttataagt
5461 aggcataaca gttataatca taacatactg ttttttctta ctccacacag gcatagagtg
5521 tctgctatta ataactatgc tcaaaaattg tgtaccttta gctttttaat ttgtaaaggg
5581 gttaataagg aatatttgat gtatagtgcc ttgactagag atcataatca gccataccac
5641 atttgtagag gttttacttg ctttaaaaaa cctcccacac ctccccctga acctgaaaca
5701 taaaatgaat gcaattgttg ttgttaactt gtttattgca gcttataatg gttacaaata
5761 aagcaatagc atcacaaatt tcacaaataa agcatttttt tcactgcatt ctagttgtgg
5821 tttgtccaaa ctcatcaatg tatcttatca tgtctggatc gac
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质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后,请先根据产品管壁标签来判断产品形式,并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉(常温运输,存于-20度,90天保质期,请务必转化挑单克隆培养,不要直接使用和测序)
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒;
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min,加入2μl质粒,再冰浴30min后,42℃热激60s,不要搅动,再冰浴2min;(从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作)
③加入900μl无抗的LB液体培养基,180rpm震荡37℃培养45min;
④6000rpm离心5min,仅留100μl上清液重悬细菌沉淀,并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;(可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布,可以比传统涂布方法获得更多转化子)
⑤将平板正向培养1h,再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h;
(菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态,要先转克隆感受态,重提质粒后再导入表达感受态)
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中,加入对应抗生素,220rpm震荡培养14h,根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种(冰袋运输,存于-80℃,保质期90天,请务必划线挑单克隆培养)
四区划线后挑单菌落培养,酵母菌需要先液体复苏再四区划线,再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种(冰袋运输,存于4℃,保质期7天)
穿刺接种,液体培养后四区划线,再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板(冰袋运输,存于4℃,保质期7天)
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒(冰袋运输,存于-20℃,保质期90天)
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒(常温运输,存于-20度,90天保质期,请务必转化挑单克隆培养,不要直接使用和测序)
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中,加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min,吸取5ul质粒转化,离心全涂。
二、转化图片
| P4258/pCMV-SPORT6-CLU人源基因质粒 |
| P4259/pCMV-SPORT6-MED8(14-906bp)人源基因质粒 |
| P4261/pCMV-SPORT6-ZKSCAN7人源基因质粒 |
| P4262/pCMV-SPORT6-CST3人源基因质粒 |
| P4264/pCMV-SPORT6-C1QTNF6人源基因质粒 |
| P4265/pCMV-SPORT6-PYCR2人源基因质粒 |
| P4269/pCMV-SPORT6-TOR3A人源基因质粒 |
| P4272/pCMV-SPORT6-ACKR2人源基因质粒 |
| P4273/pCMV-SPORT6-NKAP(1点突变)人源基因质粒 |
| P4275/pCMV-SPORT6-RTKN人源基因质粒 |
风险提示:丁香通仅作为第三方平台,为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全,合理判断,谨慎选购商品,商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品,请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
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Nature 子刊:超声波调控肿瘤内细菌的基因表达,助力肿瘤免疫治疗
的生存提供保护,使得肿瘤内的细菌能在其中不断繁殖。 不仅如此,通过基因工程手段还可以对细菌进行改造,以增强其对肿瘤的靶向迁移能力,减少对机体的毒性,大大提高了肿瘤细菌治疗的安全性;更为重要的是,细菌还是优良的基因表达宿主,可将外源基因插入原核表达质粒后导入细菌或整合进入细菌基因组,从而表达抗肿瘤因子以增强其抗肿瘤效果。 为此,近年来基于细菌的靶向给药系统在肿瘤治疗方面的应用受到了科研工作者的广泛关注。随着合成生物学技术的发展与引入,如启动子工程、智能基因线路等,有望大大提高细菌治疗肿瘤的智能
tianjiaoya 我想构建一个真核表达质粒,用这个真核表达质粒来表达绿色荧光蛋白,但是我想让绿色荧光蛋白的表达受酵母菌GLA4转录因子的调控,也就是说有GLA4存在,这个质粒就表达绿色荧光蛋白,没有GLA4存在,就不表达绿色荧光蛋白。当然需要对真核表达质粒上的启动子做相应的调整,但是我现在的问题是,转录因子GLA4能不能对质粒上有相应调控元件的表达盒,进行调控?据说GLA4上有核定位元件,要是将这个核定位序列删除,可行吗?据说核内有很多的辅助因子,参与了蛋白










