IKKalpha (S176ES180E)-pcw107-V5人源基因质粒

IKKalpha (S176ES180E)-pcw107-V

5人源基因质粒
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  • 上海
  • P3061
  • 2025年07月10日
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    • 详细信息
    • 技术资料
    • 保存条件

      -20

    • 保质期

      2年

    • 英文名

      Plasmid#64608;NM_001278.3;IKBKAIKK-a

    • 库存

      100

    • 供应商

      上海烜雅生物科技有限公司

    • 规格

      干粉/液体

    基本信息
    名称:IKKalpha (S176ES180E)-pcw107-V5人源基因质粒
    别称: Plasmid#64608;NM_001278.3;IKBKAIKK-a
    复制子: pUC
    原核抗性: Amp
    筛选标记:Puro
    克隆菌株: Stbl3
    培养条件: 37度

    质粒属性
    载体宿主:哺乳细胞
    载体用途:蛋白表达
    基因种属:
    基因类型:ORF
    原核抗性:Amp
    真核抗性:Puro
    荧光蛋白:

    质粒简介
     KKalpha (S176E,S180E)-pcw107-V5人源基因质粒
    when used to produce lentivirus, express physiological levels of insert

    质粒图谱
    IKKalpha (S176ES180E)-pcw107-V

    质粒序列
    LOCUS       Exported                9880 bp ds-DNA     circular SYN 20-JUL-2018
    DEFINITION  synthetic circular DNA
    KEYWORDS    IKKalpha (S176E,S180E)-pcw107-V5
    SOURCE      synthetic DNA construct
      ORGANISM  synthetic DNA construct
    REFERENCE   1  (bases 1 to 9880)
      TITLE     Direct Submission
    FEATURES             Location/Qualifiers
         source          1..9880
                         /organism="synthetic DNA construct"
                         /mol_type="other DNA"
         LTR             1..181
                         /note="5' LTR (truncated)"
                         /note="truncated 5' long terminal repeat (LTR) from HIV-1"
         misc_feature    228..353
                         /note="HIV-1 Psi"
                         /note="packaging signal of human immunodeficiency virus 
                         type 1"
         misc_feature    846..1079
                         /note="RRE"
                         /note="The Rev response element (RRE) of HIV-1 allows for 
                         Rev-dependent mRNA export from the nucleus to the 
                         cytoplasm."
         promoter        1539..1749
                         /note="SV40 promoter"
                         /note="SV40 early promoter"
         rep_origin      1608..1743
                         /note="SV40 ori"
                         /note="SV40 origin of replication"
         CDS             1789..2391
                         /codon_start=1
                         /gene="pac from Streptomyces alboniger"
                         /product="puromycin N-acetyltransferase"
                         /note="PuroR"
                         /note="confers resistance to puromycin"
                         /translation="MTEYKPTVRLATRDDVPRAVRTLAAAFADYPATRHTVDPDRHIER
                         VTELQELFLTRVGLDIGKVWVADDGAAVAVWTTPESVEAGAVFAEIGPRMAELSGSRLA
                         AQQQMEGLLAPHRPKEPAWFLATVGVSPDHQGKGLGSAVVLPGVEAAERAGVPAFLETS
                         APRNLPFYERLGFTVTADVEVPEGPRTWCMTRKPGAS"
         misc_feature    2434..2551
                         /note="cPPT/CTS"
                         /note="central polypurine tract and central termination 
                         sequence of HIV-1"
         promoter        2609..3109
                         /note="hPGK promoter"
                         /note="human phosphoglycerate kinase 1 promoter"
         protein_bind    3130..3154
                         /gene="mutant version of attB"
                         /bound_moiety="BP Clonase(TM)"
                         /note="attB1"
                         /note="recombination site for the Gateway(R) BP reaction"
         misc_feature    3172..5406
                         /note="IKKalpha (S176E,S180E)"
         protein_bind    complement(5408..5432)
                         /gene="mutant version of attB"
                         /bound_moiety="BP Clonase(TM)"
                         /note="attB2"
                         /note="recombination site for the Gateway(R) BP reaction"
         CDS             5440..5481
                         /codon_start=1
                         /product="epitope tag from simian virus 5"
                         /note="V5 tag"
                         /translation="GKPIPNPLLGLDST"
         misc_feature    5506..6094
                         /note="WPRE"
                         /note="woodchuck hepatitis virus posttranscriptional 
                         regulatory element"
         LTR             6166..6399
                         /note="3' LTR (Delta-U3)"
                         /note="self-inactivating 3' long terminal repeat (LTR) from
                         HIV-1"
         polyA_signal    6477..6598
                         /note="SV40 poly(A) signal"
                         /note="SV40 polyadenylation signal"
         rep_origin      6638..6773
                         /note="SV40 ori"
                         /note="SV40 origin of replication"
         rep_origin      6980..7435
                         /direction=RIGHT
                         /note="f1 ori"
                         /note="f1 bacteriophage origin of replication; arrow 
                         indicates direction of (+) strand synthesis"
         promoter        7461..7565
                         /gene="bla"
                         /note="AmpR promoter"
         CDS             7566..8426
                         /codon_start=1
                         /gene="bla"
                         /product="beta-lactamase"
                         /note="AmpR"
                         /note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and
                         related antibiotics"
                         /translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI
                         ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS
                         PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW
                         EPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA
                         LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS
                         LIKHW"
         rep_origin      8597..9185
                         /direction=RIGHT
                         /note="ori"
                         /note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of 
                         replication"
         promoter        9654..9880
                         /note="RSV promoter"
                         /note="Rous sarcoma virus enhancer/promoter"
    ORIGIN
            1 gggtctctct ggttagacca gatctgagcc tgggagctct ctggctaact agggaaccca
           61 ctgcttaagc ctcaataaag cttgccttga gtgcttcaag tagtgtgtgc ccgtctgttg
          121 tgtgactctg gtaactagag atccctcaga cccttttagt cagtgtggaa aatctctagc
          181 agtggcgccc gaacagggac ttgaaagcga aagggaaacc agaggagctc tctcgacgca
          241 ggactcggct tgctgaagcg cgcacggcaa gaggcgaggg gcggcgactg gtgagtacgc
          301 caaaaatttt gactagcgga ggctagaagg agagagatgg gtgcgagagc gtcagtatta
          361 agcgggggag aattagatcg cgatgggaaa aaattcggtt aaggccaggg ggaaagaaaa
          421 aatataaatt aaaacatata gtatgggcaa gcagggagct agaacgattc gcagttaatc
          481 ctggcctgtt agaaacatca gaaggctgta gacaaatact gggacagcta caaccatccc
          541 ttcagacagg atcagaagaa cttagatcat tatataatac agtagcaacc ctctattgtg
          601 tgcatcaaag gatagagata aaagacacca aggaagcttt agacaagata gaggaagagc
          661 aaaacaaaag taagaccacc gcacagcaag cggccgctga tcttcagacc tggaggagga
          721 gatatgaggg acaattggag aagtgaatta tataaatata aagtagtaaa aattgaacca
          781 ttaggagtag cacccaccaa ggcaaagaga agagtggtgc agagagaaaa aagagcagtg
          841 ggaataggag ctttgttcct tgggttcttg ggagcagcag gaagcactat gggcgcagcg
          901 tcaatgacgc tgacggtaca ggccagacaa ttattgtctg gtatagtgca gcagcagaac
          961 aatttgctga gggctattga ggcgcaacag catctgttgc aactcacagt ctggggcatc
         1021 aagcagctcc aggcaagaat cctggctgtg gaaagatacc taaaggatca acagctcctg
         1081 gggatttggg gttgctctgg aaaactcatt tgcaccactg ctgtgccttg gaatgctagt
         1141 tggagtaata aatctctgga acagatttgg aatcacacga cctggatgga gtgggacaga
         1201 gaaattaaca attacacaag cttaatacac tccttaattg aagaatcgca aaaccagcaa
         1261 gaaaagaatg aacaagaatt attggaatta gataaatggg caagtttgtg gaattggttt
         1321 aacataacaa attggctgtg gtatataaaa ttattcataa tgatagtagg aggcttggta
         1381 ggtttaagaa tagtttttgc tgtactttct atagtgaata gagttaggca gggatattca
         1441 ccattatcgt ttcagaccca cctcccaacc ccgaggggac ccatgcattg catctcaatt
         1501 agtcagcaac caggtgtgga aagtccccag gctccccagc aggcagaagt atgcaaagca
         1561 tgcgtctcaa ttagtcagca accatagtcc cgcccctaac tccgcccatc ccgcccctaa
         1621 ctccgcccag ttccgcccat tctccgcccc atggctgact aatttttttt atttatgcag
         1681 aggccgaggc cgcctcggcc tctgagctat tccagaagta gtgaggaggc ttttttggag
         1741 gcctaggctt ttgcaaaaag ctttctagag gtaccaccgg agcttaccat gaccgagtac
         1801 aagcccacgg tgcgcctcgc cacccgcgac gacgtcccca gggccgtacg caccctcgcc
         1861 gccgcgttcg ccgactaccc cgccacgcgc cacaccgtcg atccggaccg ccacatcgag
         1921 cgggtcaccg agctgcaaga actcttcctc acgcgcgtcg ggctcgacat cggcaaggtg
         1981 tgggtcgcgg acgacggcgc cgccgtggcg gtctggacca cgccggagag cgtcgaagcg
         2041 ggggcggtgt tcgccgagat cggcccgcgc atggccgagt tgagcggttc ccggctggcc
         2101 gcgcagcaac agatggaagg cctcctggcg ccgcaccggc ccaaggagcc cgcgtggttc
         2161 ctggccaccg tcggcgtctc gcccgaccac cagggcaagg gtctgggcag cgccgtcgtg
         2221 ctccccggag tggaggcggc cgagcgcgcc ggggtgcccg ccttcctgga gacctccgcg
         2281 ccccgcaacc tccccttcta cgagcggctc ggcttcaccg tcaccgccga cgtcgaggtg
         2341 cccgaaggac cgcgcacctg gtgcatgacc cgcaagcccg gtgccagtta acgaattcta
         2401 gatcttgaga caaatggcag tattcatcca caattttaaa agaaaagggg ggattggggg
         2461 gtacagtgca ggggaaagaa tagtagacat aatagcaaca gacatacaaa ctaaagaatt
         2521 acaaaaacaa attacaaaaa ttcaaaattt tcgggtttat tacagggaca gcagagatcc
         2581 actttggcgc cggctcgagg cctgcaggtt gcgccttttc caaggcagcc ctgggtttgc
         2641 gcagggacgc ggctgctctg ggcgtggttc cgggaaacgc agcggcgccg accctgggtc
         2701 tcgcacattc ttcacgtccg ttcgcagcgt cacccggatc ttcgccgcta cccttgtggg
         2761 ccccccggcg acgcttcctg ctccgcccct aagtcgggaa ggttccttgc ggttcgcggc
         2821 gtgccggacg tgacaaacgg aagccgcacg tctcactagt accctcgcag acggacagcg
         2881 ccagggagca atggcagcgc gccgaccgcg atgggctgtg gccaatagcg gctgctcagc
         2941 agggcgcgcc gagagcagcg gccgggaagg ggcggtgcgg gaggcggggt gtggggcggt
         3001 agtgtgggcc ctgttcctgc ccgcgcggtg ttccgcattc tgcaagcctc cggagcgcac
         3061 gtcggcagtc ggctccctcg ttgaccgaat caccgacctc tctccccagg ggctagcatc
         3121 gatggatcaa caagtttgta caaaaaagtt ggcccgggcg gcggcggcac catggagcgg
         3181 cccccggggc tgcggccggg cgcgggcggg ccctgggaga tgcgggagcg gctgggcacc
         3241 ggcggcttcg ggaacgtctg tctgtaccag catcgggaac ttgatctcaa aatagcaatt
         3301 aagtcttgtc gcctagagct aagtaccaaa aacagagaac gatggtgcca tgaaatccag
         3361 attatgaaga agttgaacca tgccaatgtt gtaaaggcct gtgatgttcc tgaagaattg
         3421 aatattttga ttcatgatgt gcctcttcta gcaatggaat actgttctgg aggagatctc
         3481 cgaaagctgc tcaacaaacc agaaaattgt tgtggactta aagaaagcca gatactttct
         3541 ttactaagtg atatagggtc tgggattcga tatttgcatg aaaacaaaat tatacatcga
         3601 gatctaaaac ctgaaaacat agttcttcag gatgttggtg gaaagataat acataaaata
         3661 attgatctgg gatatgccaa agatgttgat caaggagaac tgtgtacaga atttgtggga
         3721 acactgcagt atctggcccc agagctcttt gagaataagc cttacacagc cactgttgat
         3781 tattggagct ttgggaccat ggtatttgaa tgtattgctg gatataggcc ttttttgcat
         3841 catctgcagc catttacctg gcatgagaag attaagaaga aggatccaaa gtgtatattt
         3901 gcatgtgaag agatgtcagg agaagttcgg tttagtagcc atttacctca accaaatagc
         3961 ctttgtagtt taatagtaga acccatggaa aactggctac agttgatgtt gaattgggac
         4021 cctcagcaga gaggaggacc tgttgacctt actttgaagc agccaagatg ttttgtatta
         4081 atggatcaca ttttgaattt gaagatagta cacatcctaa atatgacttc tgcaaagata
         4141 atttcttttc tgttaccacc tgatgaaagt cttcattcat tacagtctcg tattgagcgt
         4201 gaaactggaa taaatactgg ttctcaagaa cttctttcag agacaggaat ttctctggat
         4261 cctcggaaac cagcctctca atgtgttcta gatggagtta gaggctgtga tagctatatg
         4321 gtttatttgt ttgataaaag taaaactgta tatgaagggc catttgcttc cagaagttta
         4381 tctgattgtg taaattatat tgtacaggac agcaaaatac agcttccaat tatacagctg
         4441 cgtaaagcgt gggctgaagc agtgcactat gtgtctggac taaaagaaga ctatagcagg
         4501 ctctttcagg gacaaagggc agcaatgtta agtcttctta gatataatgc taacttaaca
         4561 aaaatgaaga acactttgat ctcagcatca caacaactga aagctaaatt ggagtttttt
         4621 cacaaaagca ttcagcttga cttggagaga tacagcgagc agatgacgta tgggatatct
         4681 tcagaaaaaa tgctaaaagc atggaaagaa atggaagaaa aggccatcca ctatgctgag
         4741 gttggtgtca ttggatacct ggaggatcag attatgtctt tgcatgctga aatcatggag
         4801 ctacagaaga gcccctatgg aagacgtcag ggagacttga tggaatctct ggaacagcgt
         4861 gccattgatc tatataagca gttaaaacac agaccttcag atcactccta cagtgacagc
         4921 acagagatgg tgaaaatcat tgtgcacact gtgcagagtc aggaccgtgt gctcaaggag
         4981 ctgtttggtc atttgagcaa gttgttgggc tgtaagcaga agattattga tctactccct
         5041 aaggtggaag tggccctcag taatatcaaa gaagctgaca atactgtcat gttcatgcag
         5101 ggaaaaaggc agaaagaaat atggcatctc cttaaaattg cctgtacaca gagttctgcc
         5161 cggtcccttg taggatccag tctagaaggt gcagtaaccc ctcagacatc agcatggctg
         5221 cccccgactt cagcagaaca tgatcattct ctgtcatgtg tggtaactcc tcaagatggg
         5281 gagacttcag cacaaatgat agaagaaaat ttgaactgcc ttggccattt aagcactatt
         5341 attcatgagg caaatgagga acagggcaat agtatgatga atcttgattg gagttggtta
         5401 acagaattgc caactttctt gtacaaagtg gttaccggtg gtaagcctat ccctaaccct
         5461 ctcctcggtc tcgattctac gtagtaatga ccgcgttaag tcgacaatca acctctggat
         5521 tacaaaattt gtgaaagatt gactggtatt cttaactatg ttgctccttt tacgctatgt
         5581 ggatacgctg ctttaatgcc tttgtatcat gctattgctt cccgtatggc tttcattttc
         5641 tcctccttgt ataaatcctg gttgctgtct ctttatgagg agttgtggcc cgttgtcagg
         5701 caacgtggcg tggtgtgcac tgtgtttgct gacgcaaccc ccactggttg gggcattgcc
         5761 accacctgtc agctcctttc cgggactttc gctttccccc tccctattgc cacggcggaa
         5821 ctcatcgccg cctgccttgc ccgctgctgg acaggggctc ggctgttggg cactgacaat
         5881 tccgtggtgt tgtcggggaa atcatcgtcc tttccttggc tgctcgcctg tgttgccacc
         5941 tggattctgc gcgggacgtc cttctgctac gtcccttcgg ccctcaatcc agcggacctt
         6001 ccttcccgcg gcctgctgcc ggctctgcgg cctcttccgc gtcttcgcct tcgccctcag
         6061 acgagtcgga tctccctttg ggccgcctcc ccgcgtcgac tttaagacca atgacttaca
         6121 aggcagctgt agatcttagc cactttttaa aagaaaaggg gggactggaa gggctaattc
         6181 actcccaacg aagacaagat ctgctttttg cttgtactgg gtctctctgg ttagaccaga
         6241 tctgagcctg ggagctctct ggctaactag ggaacccact gcttaagcct caataaagct
         6301 tgccttgagt gcttcaagta gtgtgtgccc gtctgttgtg tgactctggt aactagagat
         6361 ccctcagacc cttttagtca gtgtggaaaa tctctagcag tacgtatagt agttcatgtc
         6421 atcttattat tcagtattta taacttgcaa agaaatgaat atcagagagt gagaggaact
         6481 tgtttattgc agcttataat ggttacaaat aaagcaatag catcacaaat ttcacaaata
         6541 aagcattttt ttcactgcat tctagttgtg gtttgtccaa actcatcaat gtatcttatc
         6601 atgtctggct ctagctatcc cgcccctaac tccgcccatc ccgcccctaa ctccgcccag
         6661 ttccgcccat tctccgcccc atggctgact aatttttttt atttatgcag aggccgaggc
         6721 cgcctcggcc tctgagctat tccagaagta gtgaggaggc ttttttggag gcctagggac
         6781 gtacccaatt cgccctatag tgagtcgtat tacgcgcgct cactggccgt cgttttacaa
         6841 cgtcgtgact gggaaaaccc tggcgttacc caacttaatc gccttgcagc acatccccct
         6901 ttcgccagct ggcgtaatag cgaagaggcc cgcaccgatc gcccttccca acagttgcgc
         6961 agcctgaatg gcgaatggga cgcgccctgt agcggcgcat taagcgcggc gggtgtggtg
         7021 gttacgcgca gcgtgaccgc tacacttgcc agcgccctag cgcccgctcc tttcgctttc
         7081 ttcccttcct ttctcgccac gttcgccggc tttccccgtc aagctctaaa tcgggggctc
         7141 cctttagggt tccgatttag tgctttacgg cacctcgacc ccaaaaaact tgattagggt
         7201 gatggttcac gtagtgggcc atcgccctga tagacggttt ttcgcccttt gacgttggag
         7261 tccacgttct ttaatagtgg actcttgttc caaactggaa caacactcaa ccctatctcg
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         7441 gcacttttcg gggaaatgtg cgcggaaccc ctatttgttt atttttctaa atacattcaa
         7501 atatgtatcc gctcatgaga caataaccct gataaatgct tcaataatat tgaaaaagga
         7561 agagtatgag tattcaacat ttccgtgtcg cccttattcc cttttttgcg gcattttgcc
         7621 ttcctgtttt tgctcaccca gaaacgctgg tgaaagtaaa agatgctgaa gatcagttgg
         7681 gtgcacgagt gggttacatc gaactggatc tcaacagcgg taagatcctt gagagttttc
         7741 gccccgaaga acgttttcca atgatgagca cttttaaagt tctgctatgt ggcgcggtat
         7801 tatcccgtat tgacgccggg caagagcaac tcggtcgccg catacactat tctcagaatg
         7861 acttggttga gtactcacca gtcacagaaa agcatcttac ggatggcatg acagtaagag
         7921 aattatgcag tgctgccata accatgagtg ataacactgc ggccaactta cttctgacaa
         7981 cgatcggagg accgaaggag ctaaccgctt ttttgcacaa catgggggat catgtaactc
         8041 gccttgatcg ttgggaaccg gagctgaatg aagccatacc aaacgacgag cgtgacacca
         8101 cgatgcctgt agcaatggca acaacgttgc gcaaactatt aactggcgaa ctacttactc
         8161 tagcttcccg gcaacaatta atagactgga tggaggcgga taaagttgca ggaccacttc
         8221 tgcgctcggc ccttccggct ggctggttta ttgctgataa atctggagcc ggtgagcgtg
         8281 ggtctcgcgg tatcattgca gcactggggc cagatggtaa gccctcccgt atcgtagtta
         8341 tctacacgac ggggagtcag gcaactatgg atgaacgaaa tagacagatc gctgagatag
         8401 gtgcctcact gattaagcat tggtaactgt cagaccaagt ttactcatat atactttaga
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         8641 aaaaaccacc gctaccagcg gtggtttgtt tgccggatca agagctacca actctttttc
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         9001 ccacgcttcc cgaagggaga aaggcggaca ggtatccggt aagcggcagg gtcggaacag
         9061 gagagcgcac gagggagctt ccagggggaa acgcctggta tctttatagt cctgtcgggt
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         9181 ggaaaaacgc cagcaacgcg gcctttttac ggttcctggc cttttgctgg ccttttgctc
         9241 acatgttctt tcctgcgtta tcccctgatt ctgtggataa ccgtattacc gcctttgagt
         9301 gagctgatac cgctcgccgc agccgaacga ccgagcgcag cgagtcagtg agcgaggaag
         9361 cggaagagcg cccaatacgc aaaccgcctc tccccgcgcg ttggccgatt cattaatgca
         9421 gctggcacga caggtttccc gactggaaag cgggcagtga gcgcaacgca attaatgtga
         9481 gttagctcac tcattaggca ccccaggctt tacactttat gcttccggct cgtatgttgt
         9541 gtggaattgt gagcggataa caatttcaca caggaaacag ctatgaccat gattacgcca
         9601 agcgcgcaat taaccctcac taaagggaac aaaagctgga gctgcaagct taatgtagtc
         9661 ttatgcaata ctcttgtagt cttgcaacat ggtaacgatg agttagcaac atgccttaca
         9721 aggagagaaa aagcaccgtg catgccgatt ggtggaagta aggtggtacg atcgtgcctt
         9781 attaggaagg caacagacgg gtctgacatg gattggacga accactgaat tgccgcattg
         9841 cagagatatt gtatttaagt gcctagctcg atacataaac
    //

    质粒菌株产品操作说明书
    一、扩增流程
             收到产品后,请先根据产品管壁标签来判断产品形式,并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
             1、质粒干粉(常温运输,存于-20度,90天保质期,请务必转化挑单克隆培养,不要直接使用和测序)
                  收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒;
                  1100μl 感受态于冰上解冻10min,加入2μl质粒,再冰浴30min后,42热激60s,不要搅动,再冰浴2min;(从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作)
                  加入900μl无抗的LB液体培养基,180rpm震荡37培养45min
                  6000rpm离心5min,仅留100μl上清液重悬细菌沉淀,并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;(可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布,可以比传统涂布方法获得更多转化子)
                  将平板正向培养1h,再倒置37培养14h。如果要求是30度则培养20h
    (菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态,要先转克隆感受态,重提质粒后再导入表达感受态)
                  挑取单菌落至LB液体培养基中,加入对应抗生素,220rpm震荡培养14h,根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
            2、甘油菌种(冰袋运输,存于-80,保质期90天,请务必划线挑单克隆培养)
                  四区划线后挑单菌落培养,酵母菌需要先液体复苏再四区划线,再挑单菌落液体培养。
            3、穿刺菌种(冰袋运输,存于4,保质期7天)
                  穿刺接种,液体培养后四区划线,再挑单菌落液体培养。
            4、菌落平板(冰袋运输,存于4,保质期7天)
                  直接挑取单菌落至液体培养基中。
            5、液体质粒(冰袋运输,存于-20,保质期90天)
                  单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
            6、滤纸质粒(常温运输,存于-20度,90天保质期,请务必转化挑单克隆培养,不要直接使用和测序)
                  收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中,加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min,吸取5ul质粒转化,离心全涂。

    二、转化图片
    IKKalpha (S176ES180E)-pcw107-V
    IKKalpha (S176ES180E)-pcw107-V
    P4123/pECMV-3×FLAG-RTN3人源基因质粒
    P4124/pECMV-3×FLAG-SCAMP5人源基因质粒
    P4125/pECMV-3×FLAG-SCAMP4人源基因质粒
    P4126/pECMV-3×FLAG-SLC26A1人源基因质粒
    P4127/pECMV-3×FLAG-SOD2人源基因质粒
    P4128/pECMV-3×FLAG-STX5人源基因质粒
    P4129/pECMV-3×FLAG-FAM3A人源基因质粒
    P4130/pECMV-3×FLAG-GLIPR1L1人源基因质粒
    P4131/pECMV-3×FLAG-DDIT4人源基因质粒
    P4132/pECMV-3×FLAG-ABHD4人源基因质粒
    P4133/pECMV-3×FLAG-CD69人源基因质粒

     

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