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- Xybio
- 上海
- P2879
- 2025年07月12日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20
- 保质期：
2年
- 英文名：
Plasmid#66807
- 库存：
100
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格：
干粉/液体
名称：pSLIK-IDH2-R172K-FLAG人源基因质粒
别称: Plasmid#66807
复制子: pUC
原核抗性: Amp
筛选标记：Hyg
克隆菌株: Stbl3
培养条件: 37度
质粒属性
载体宿主：哺乳细胞
载体用途：蛋白表达
基因种属：人
基因类型：ORF
原核抗性：Amp
真核抗性：Hyg
荧光蛋白：
质粒简介
pSLIK-IDH2-R172K-FLAG质粒由上海烜雅生物科技有限公司提供
质粒图谱
质粒序列：详询
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
| P4956/pECMV-3×FLAG-METTL3（1同义突变）人源基因质粒 |
| P1169/pECMV-3×FLAG-H-FABP人源基因质粒 |
| P1170/pECMV-3×FLAG-TRAF6-S12F人源基因质粒 |
| P1171/pECMV-3×FLAG-GSK3B人源基因质粒 |
| P1172/pECMV-3×FLAG-CD1D人源基因质粒 |
| P1719/pECMV-3×FLAG-CD4人源基因质粒 |
| P1830/pECMV-3×FLAG-CD22人源基因质粒 |
| P1195/pECMV-3×FLAG-AFP人源基因质粒 |
| P4834/pCDNA3.1-AFP人源基因质粒 |
| P4100/pECMV-3×FLAG-CCNE2人源基因质粒 |
| P4270/pECMV-3×FLAG-AATF人源基因质粒 |
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文献和实验-2652 176.Chen K S,Peters T C,Walker J R.J Bacteriol.1990,172:2504-2510 177.Buell G,Schulz M F,Selzer G.Nucleic Res.1985,13:1923-1938 178.Devli P E,Drummond R J,Toy P.Gene.1988,65:13-22S 179.Pedersen-Lane J,Maley G F,Chu E et al Protein Expres Purif
作物。在燕麦中，至今尚无 RNA 沉默的研究报道。RNAi 作为一种研究植物功能基因组的工具，确切地说，第一次大规模地使用是在拟南芥和玉米研究中，超过 100 个目的基因被沉默[41]。研究的关键一直集中在设计和构建可用的质粒载体，以便引发 RNAi 的外源基因能稳定地整合到染色体组中。本章将介绍目前在大麦和小麦中，下调基因表达所使用的 RNAi 和 VIGS 等多种方法。相对而言，虽然 RNA 基因沉默已是一项广泛应用的技术，但是，在植物研究中对其进行优化的报道相对较少。一段给定的序列能否产生 RNA
/0.5 pg 每个水稻基因组=107 基因组，6.3X10-18X107 g=63 pg 质粒对于每个 2 C 水稻基因组）。代表高拷贝数的外源基因插入的标样会产生的强杂交信号，信号衰减的时间比较长，甚至用化学法洗膜后信号还存在（见标注8) 。制备标样 DNA 时，可以在野生型 DNA 中加入多个不同的转基因质粒，但需保证这些质粒酶切后的产物长度不同，且其长度差异足够防止后期杂交信号的相互干扰。 注 14 : 大量提取已经鉴定过的 1 个（最好为 2 个）转基因系（ 作为阳性对照）和野生型（作为阴性
