pSLIK-IDH2-R172K-FLAG人源基因质粒

在大肠杆菌中高效表达外源蛋白的策略

-2652 176.Chen K S,Peters T C,Walker J R.J Bacteriol.1990,172:2504-2510 177.Buell G,Schulz M F,Selzer G.Nucleic Res.1985,13:1923-1938 178.Devli P E,Drummond R J,Toy P.Gene.1988,65:13-22S 179.Pedersen-Lane J,Maley G F,Chu E et al Protein Expres Purif

RNA介导的基因沉默

作物。在燕麦中，至今尚无 RNA 沉默的研究报道。RNAi 作为一种研究植物功能基因组的工具，确切地说，第一次大规模地使用是在拟南芥和玉米研究中，超过 100 个目的基因被沉默[41]。研究的关键一直集中在设计和构建可用的质粒载体，以便引发 RNAi 的外源基因能稳定地整合到染色体组中。本章将介绍目前在大麦和小麦中，下调基因表达所使用的 RNAi 和 VIGS 等多种方法。相对而言，虽然 RNA 基因沉默已是一项广泛应用的技术，但是，在植物研究中对其进行优化的报道相对较少。一段给定的序列能否产生 RNA

基因插入位点和模式

/0.5 pg 每个水稻基因组=107 基因组，6.3X10-18X107 g=63 pg 质粒对于每个 2 C 水稻基因组）。代表高拷贝数的外源基因插入的标样会产生的强杂交信号，信号衰减的时间比较长，甚至用化学法洗膜后信号还存在（见标注8) 。制备标样 DNA 时，可以在野生型 DNA 中加入多个不同的转基因质粒，但需保证这些质粒酶切后的产物长度不同，且其长度差异足够防止后期杂交信号的相互干扰。 注 14 : 大量提取已经鉴定过的 1 个（最好为 2 个）转基因系（ 作为阳性对照）和野生型（作为阴性