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- Xybio
- 上海
- P1664
- 2026年01月21日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20
- 保质期：
2年
- 英文名：
Plasmid#13642;CD289
- 库存：
100
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格：
干粉/液体
基本信息
名称：pcDNA3-TLR9-YFP人源基因质粒
别称: Plasmid#13642;CD289
启动子：CMV
复制子: pUC
原核抗性: Amp
筛选标记：G418
克隆菌株: DH5a
培养条件: 37度
质粒属性
载体宿主：哺乳细胞
载体用途：蛋白表达
基因种属：人
基因类型：ORF
原核抗性：Amp
真核抗性：Neo/G418
荧光蛋白：黄色
质粒简介
pcDNA3-TLR9-YFP是一个人源基因哺乳细胞过表达质粒。
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported 9198 bp ds-DNA circular SYN 03-DEC-2017
DEFINITION synthetic circular DNA
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..9198
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
enhancer 235..614
/label=CMV enhancer
/note="human cytomegalovirus immediate early enhancer"
promoter 615..818
/label=CMV promoter
/note="human cytomegalovirus (CMV) immediate early
promoter"
promoter 863..881
/label=T7 promoter
/note="promoter for bacteriophage T7 RNA polymerase"
misc_feature 913..4008
/label=TLR9
CDS 4015..4734
/codon_start=1
/product="enhanced YFP"
/label=EYFP
/note="mammalian codon-optimized"
/translation="MVSKGEELFTGVVPILVELDGDVNGHKFSVSGEGEGDATYGKLTL
KFICTTGKLPVPWPTLVTTFGYGLKCFARYPDHMKQHDFFKSAMPEGYVQERTIFFKDD
GNYKTRAEVKFEGDTLVNRIELKGIDFKEDGNILGHKLEYNYNSHNVYIMADKQKNGIK
VNFKIRHNIEDGSVQLADHYQQNTPIGDGPVLLPDNHYLSYQSALSKDPNEKRDHMVLL
EFVTAAGITLGMDELYK"
promoter complement(4750..4768)
/label=SP6 promoter
/note="promoter for bacteriophage SP6 RNA polymerase"
polyA_signal 4794..5018
/label=bGH poly(A) signal
/note="bovine growth hormone polyadenylation signal"
rep_origin 5064..5492
/direction=RIGHT
/label=f1 ori
/note="f1 bacteriophage origin of replication; arrow
indicates direction of (+) strand synthesis"
promoter 5506..5836
/label=SV40 promoter
/note="SV40 enhancer and early promoter"
rep_origin 5687..5822
/label=SV40 ori
/note="SV40 origin of replication"
CDS 5903..6697
/codon_start=1
/gene="aph(3')-II (or nptII)"
/product="aminoglycoside phosphotransferase from Tn5"
/label=NeoR/KanR
/note="confers resistance to neomycin, kanamycin, and G418
(Geneticin(R))"
/translation="MIEQDGLHAGSPAAWVERLFGYDWAQQTIGCSDAAVFRLSAQGRP
VLFVKTDLSGALNELQDEAARLSWLATTGVPCAAVLDVVTEAGRDWLLLGEVPGQDLLS
SHLAPAEKVSIMADAMRRLHTLDPATC-PFDHQAKHRIERARTRMEAGLVDQDDLDEEHQ
GLAPAELFARLKARMPDGEDLVVTHGDACLPNIMVENGRFSGFIDCGRLGVADRYQDIA
LATRDIAEELGGEWADRFLVLYGIAAPDSQRIAFYRLLDEFF"
polyA_signal 6871..6992
/label=SV40 poly(A) signal
/note="SV40 polyadenylation signal"
rep_origin complement(7443..8031)
/direction=LEFT
/label=ori
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
CDS complement(8202..9062)
/codon_start=1
/gene="bla"
/product="beta-lactamase"
/label=AmpR
/note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and
related antibiotics"
/translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI
ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS
PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW
EPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA
LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS
LIKHW"
promoter complement(9063..9167)
/gene="bla"
/label=AmpR promoter
ORIGIN
1 gacggatcgg gagatctccc gatcccctat ggtcgactct cagtacaatc tgctctgatg
61 ccgcatagtt aagccagtat ctgctccctg cttgtgtgtt ggaggtcgct gagtagtgcg
121 cgagcaaaat ttaagctaca acaaggcaag gcttgaccga caattgcatg aagaatctgc
181 ttagggttag gcgttttgcg ctgcttcgcg atgtacgggc cagatatacg cgttgacatt
241 gattattgac tagttattaa tagtaatcaa ttacggggtc attagttcat agcccatata
301 tggagttccg cgttacataa cttacggtaa atggcccgcc tggctgaccg cccaacgacc
361 cccgcccatt gacgtcaata atgacgtatg ttcccatagt aacgccaata gggactttcc
421 attgacgtca atgggtggac tatttacggt aaactgccca cttggcagta catcaagtgt
481 atcatatgcc aagtacgccc cctattgacg tcaatgacgg taaatggccc gcctggcatt
541 atgcccagta catgacctta tgggactttc ctacttggca gtacatctac gtattagtca
601 tcgctattac catggtgatg cggttttggc agtacatcaa tgggcgtgga tagcggtttg
661 actcacgggg atttccaagt ctccacccca ttgacgtcaa tgggagtttg ttttggcacc
721 aaaatcaacg ggactttcca aaatgtcgta acaactccgc cccattgacg caaatgggcg
781 gtaggcgtgt acggtgggag gtctatataa gcagagctct ctggctaact agagaaccca
841 ctgcttactg gcttatcgaa attaatacga ctcactatag ggagacccaa gcttggtacc
901 gagctcggat ccatgggttt ctgccgcagc gccctgcacc cgctgtctct cctggtgcag
961 gccatcatgc tggccatgac cctggccctg ggtaccttgc ctgccttcct accctgtgag
1021 ctccagcccc acggcctggt gaactgcaac tggctgttcc tgaagtctgt gccccacttc
1081 tccatggcag caccccgtgg caatgtcacc agcctttcct tgtcctccaa ccgcatccac
1141 cacctccatg attctgactt tgcccacctg cccagcctgc ggcatctcaa cctcaagtgg
1201 aactgcccgc cggttggcct cagccccatg cacttcccct gccacatgac catcgagccc
1261 agcaccttct tggctgtgcc caccctggaa gagctaaacc tgagctacaa caacatcatg
1321 actgtgcctg cgctgcccaa atccctcata tccctgtccc tcagccatac caacatcctg
1381 atgctagact ctgccagcct cgccggcctg catgccctgc gcttcctatt catggacggc
1441 aactgttatt acaagaaccc ctgcaggcag gcactggagg tggccccggg tgccctcctt
1501 ggcctgggca acctcaccca cctgtcactc aagtacaaca acctcaccgt ggtgccccgc
1561 aacctgcctt ccagcctgga gtatctgctg ttgtcctaca atcgcatcgt caaactggcg
1621 cctgaggacc tggccaatct gaccgccctg cgtgtgctcg atgtgggcgg aaattgccgc
1681 cgctgcgacc acgctcccaa cccctgcatg gagtgccctc gtcacttccc ccagctacat
1741 cccgatacct tcagccacct gagccgtctt gaaggcctgg tgttgaagga cagttctctc
1801 tcctggctga atgccagttg gttccgtggg ctgggaaacc tccgagtgct ggacctgagt
1861 gagaacttcc tctacaaatg catcactaaa accaaggcct tccagggcct aacacagctg
1921 cgcaagctta acctgtcctt caattaccaa aagagggtgt cctttgccca cctgtctctg
1981 gccccttcct tcgggagcct ggtcgccctg aaggagctgg acatgcacgg catcttcttc
2041 cgctcactcg atgagaccac gctccggcca ctggcccgcc tgcccatgct ccagactctg
2101 cgtctgcaga tgaacttcat caaccaggcc cagctcggca tcttcagggc cttccctggc
2161 ctgcgctacg tggacctgtc agacaaccgc atcagcggag cttcggagct gacagccacc
2221 atgggggagg cagatggagg ggagaaggtc tggctgcagc ctggggacct tgctccggcc
2281 ccagtggaca ctcccagctc tgaagacttc aggcccaact gcagcaccct caacttcacc
2341 ttggatctgt cacggaacaa cctggtgacc gtgcagccgg agatgtttgc ccagctctcg
2401 cacctgcagt gcctgcgcct gagccacaac tgcatctcgc aggcagtcaa tggctcccag
2461 ttcctgccgc tgaccggtct gcaggtgcta gacctgtccc acaataagct ggacctctac
2521 cacgagcact cattcacgga gctaccacga ctggaggccc tggacctcag ctacaacagc
2581 cagccctttg gcatgcaggg cgtgggccac aacttcagct tcgtggctca cctgcgcacc
2641 ctgcgccacc tcagcctggc ccacaacaac atccacagcc aagtgtccca gcagctctgc
2701 agtacgtcgc tgcgggccct ggacttcagc ggcaatgcac tgggccatat gtgggccgag
2761 ggagacctct atctgcactt cttccaaggc ctgagcggtt tgatctggct ggacttgtcc
2821 cagaaccgcc tgcacaccct cctgccccaa accctgcgca acctccccaa gagcctacag
2881 gtgctgcgtc tccgtgacaa ttacctggcc ttctttaagt ggtggagcct ccacttcctg
2941 cccaaactgg aagtcctcga cctggcagga aaccagctga aggccctgac caatggcagc
3001 ctgcctgctg gcacccggct ccggaggctg gatgtcagct gcaacagcat cagcttcgtg
3061 gcccccggct tcttttccaa ggccaaggag ctgcgagagc tcaaccttag cgccaacgcc
3121 ctcaagacag tggaccactc ctggtttggg cccctggcga gtgccctgca aatactagat
3181 gtaagcgcca accctctgca ctgcgcctgt ggggcggcct ttatggactt cctgctggag
3241 gtgcaggctg ccgtgcccgg tctgcccagc cgggtgaagt gtggcagtcc gggccagctc
3301 cagggcctca gcatctttgc acaggacctg cgcctctgcc tggatgaggc cctctcctgg
3361 gactgtttcg ccctctcgct gctggctgtg gctctgggcc tgggtgtgcc catgctgcat
3421 cacctctgtg gctgggacct ctggtactgc ttccacctgt gcctggcctg gcttccctgg
3481 cgggggcggc aaagtgggcg agatgaggat gccctgccct acgatgcctt cgtggtcttc
3541 gacaaaacgc agagcgcagt ggcagactgg gtgtacaacg agcttcgggg gcagctggag
3601 gagtgccgtg ggcgctgggc actccgcctg tgcctggagg aacgcgactg gctgcctggc
3661 aaaaccctct ttgagaacct gtgggcctcg gtctatggca gccgcaagac gctgtttgtg
3721 ctggcccaca cggaccgggt cagtggtctc ttgcgcgcca gcttcctgct ggcccagcag
3781 cgcctgctgg aggaccgcaa ggacgtcgtg gtgctggtga tcctgagccc tgacggccgc
3841 cgctcccgct acgtgcggct gcgccagcgc ctctgccgcc agagtgtcct cctctggccc
3901 caccagccca gtggtcagcg cagcttctgg gcccagctgg gcatggccct gaccagggac
3961 aaccaccact tctataaccg gaacttctgc cagggaccca cggccgaact cgagatggtg
4021 agcaagggcg aggagctgtt caccggggtg gtgcccatcc tggtcgagct ggacggcgac
4081 gtaaacggcc acaagttcag cgtgtccggc gagggcgagg gcgatgccac ctacggcaag
4141 ctgaccctga agttcatctg caccaccggc aagctgcccg tgccctggcc caccctcgtg
4201 accaccttcg gctacggcct gaagtgcttc gcccgctacc ccgaccacat gaagcagcac
4261 gacttcttca agtccgccat gcccgaaggc tacgtccagg agcgcaccat cttcttcaag
4321 gacgacggca actacaagac ccgcgccgag gtgaagttcg agggcgacac cctggtgaac
4381 cgcatcgagc tgaagggcat cgacttcaag gaggacggca acatcctggg gcacaagctg
4441 gagtacaact acaacagcca caacgtctat atcatggccg acaagcagaa gaacggcatc
4501 aaggtgaact tcaagatccg ccacaacatc gaggacggca gcgtgcagct cgccgaccac
4561 taccagcaga acacccccat cggcgacggc cccgtgctgc tgcccgacaa ccactacctg
4621 agctaccagt ccgccctgag caaagacccc aacgagaagc gcgatcacat ggtcctgctg
4681 gagttcgtga ccgccgccgg gatcactctc ggcatggacg agctgtacaa gtaatctaga
4741 gggccctatt ctatagtgtc acctaaatgc tagagctcgc tgatcagcct cgactgtgcc
4801 ttctagttgc cagccatctg ttgtttgccc ctcccccgtg ccttccttga ccctggaagg
4861 tgccactccc actgtccttt cctaataaaa tgaggaaatt gcatcgcatt gtctgagtag
4921 gtgtcattct attctggggg gtggggtggg gcaggacagc aagggggagg attgggaaga
4981 caatagcagg catgctgggg atgcggtggg ctctatggct tctgaggcgg aaagaaccag
5041 ctggggctct agggggtatc cccacgcgcc ctgtagcggc gcattaagcg cggcgggtgt
5101 ggtggttacg cgcagcgtga ccgctacact tgccagcgcc ctagcgcccg ctcctttcgc
5161 tttcttccct tcctttctcg ccacgttcgc cggctttccc cgtcaagctc taaatcgggg
5221 catcccttta gggttccgat ttagtgcttt acggcacctc gaccccaaaa aacttgatta
5281 gggtgatggt tcacgtagtg ggccatcgcc ctgatagacg gtttttcgcc ctttgacgtt
5341 ggagtccacg ttctttaata gtggactctt gttccaaact ggaacaacac tcaaccctat
5401 ctcggtctat tcttttgatt tataagggat tttggggatt tcggcctatt ggttaaaaaa
5461 tgagctgatt taacaaaaat ttaacgcgaa ttaattctgt ggaatgtgtg tcagttaggg
5521 tgtggaaagt ccccaggctc cccaggcagg cagaagtatg caaagcatgc atctcaatta
5581 gtcagcaacc aggtgtggaa agtccccagg ctccccagca ggcagaagta tgcaaagcat
5641 gcatctcaat tagtcagcaa ccatagtccc gcccctaact ccgcccatcc cgcccctaac
5701 tccgcccagt tccgcccatt ctccgcccca tggctgacta atttttttta tttatgcaga
5761 ggccgaggcc gcctctgcct ctgagctatt ccagaagtag tgaggaggct tttttggagg
5821 cctaggcttt tgcaaaaagc tcccgggagc ttgtatatcc attttcggat ctgatcaaga
5881 gacaggatga ggatcgtttc gcatgattga acaagatgga ttgcacgcag gttctccggc
5941 cgcttgggtg gagaggctat tcggctatga ctgggcacaa cagacaatcg gctgctctga
6001 tgccgccgtg ttccggctgt cagcgcaggg gcgcccggtt ctttttgtca agaccgacct
6061 gtccggtgcc ctgaatgaac tgcaggacga ggcagcgcgg ctatcgtggc tggccacgac
6121 gggcgttcct tgcgcagctg tgctcgacgt tgtcactgaa gcgggaaggg actggctgct
6181 attgggcgaa gtgccggggc aggatctcct gtcatctcac cttgctcctg ccgagaaagt
6241 atccatcatg gctgatgcaa tgcggcggct gcatacgctt gatccggcta cctgcccatt
6301 cgaccaccaa gcgaaacatc gcatcgagcg agcacgtact cggatggaag ccggtcttgt
6361 cgatcaggat gatctggacg aagagcatca ggggctcgcg ccagccgaac tgttcgccag
6421 gctcaaggcg cgcatgcccg acggcgagga tctcgtcgtg acccatggcg atgcctgctt
6481 gccgaatatc atggtggaaa atggccgctt ttctggattc atcgactgtg gccggctggg
6541 tgtggcggac cgctatcagg acatagcgtt ggctacccgt gatattgctg aagagcttgg
6601 cggcgaatgg gctgaccgct tcctcgtgct ttacggtatc gccgctcccg attcgcagcg
6661 catcgccttc tatcgccttc ttgacgagtt cttctgagcg ggactctggg gttcgaaatg
6721 accgaccaag cgacgcccaa cctgccatca cgagatttcg attccaccgc cgccttctat
6781 gaaaggttgg gcttcggaat cgttttccgg gacgccggct ggatgatcct ccagcgcggg
6841 gatctcatgc tggagttctt cgcccacccc aacttgttta ttgcagctta taatggttac
6901 aaataaagca atagcatcac aaatttcaca aataaagcat ttttttcact gcattctagt
6961 tgtggtttgt ccaaactcat caatgtatct tatcatgtct gtataccgtc gacctctagc
7021 tagagcttgg cgtaatcatg gtcatagctg tttcctgtgt gaaattgtta tccgctcaca
7081 attccacaca acatacgagc cggaagcata aagtgtaaag cctggggtgc ctaatgagtg
7141 agctaactca cattaattgc gttgcgctca ctgcccgctt tccagtcggg aaacctgtcg
7201 tgccagctgc attaatgaat cggccaacgc gcggggagag gcggtttgcg tattgggcgc
7261 tcttccgctt cctcgctcac tgactcgctg cgctcggtcg ttcggctgcg gcgagcggta
7321 tcagctcact caaaggcggt aatacggtta tccacagaat caggggataa cgcaggaaag
7381 aacatgtgag caaaaggcca gcaaaaggcc aggaaccgta aaaaggccgc gttgctggcg
7441 tttttccata ggctccgccc ccctgacgag catcacaaaa atcgacgctc aagtcagagg
7501 tggcgaaacc cgacaggact ataaagatac caggcgtttc cccctggaag ctccctcgtg
7561 cgctctcctg ttccgaccct gccgcttacc ggatacctgt ccgcctttct cccttcggga
7621 agcgtggcgc tttctcaatg ctcacgctgt aggtatctca gttcggtgta ggtcgttcgc
7681 tccaagctgg gctgtgtgca cgaacccccc gttcagcccg accgctgcgc cttatccggt
7741 aactatcgtc ttgagtccaa cccggtaaga cacgacttat cgccactggc agcagccact
7801 ggtaacagga ttagcagagc gaggtatgta ggcggtgcta cagagttctt gaagtggtgg
7861 cctaactacg gctacactag aaggacagta tttggtatct gcgctctgct gaagccagtt
7921 accttcggaa aaagagttgg tagctcttga tccggcaaac aaaccaccgc tggtagcggt
7981 ggtttttttg tttgcaagca gcagattacg cgcagaaaaa aaggatctca agaagatcct
8041 ttgatctttt ctacggggtc tgacgctcag tggaacgaaa actcacgtta agggattttg
8101 gtcatgagat tatcaaaaag gatcttcacc tagatccttt taaattaaaa atgaagtttt
8161 aaatcaatct aaagtatata tgagtaaact tggtctgaca gttaccaatg cttaatcagt
8221 gaggcaccta tctcagcgat ctgtctattt cgttcatcca tagttgcctg actccccgtc
8281 gtgtagataa ctacgatacg ggagggctta ccatctggcc ccagtgctgc aatgataccg
8341 cgagacccac gctcaccggc tccagattta tcagcaataa accagccagc cggaagggcc
8401 gagcgcagaa gtggtcctgc aactttatcc gcctccatcc agtctattaa ttgttgccgg
8461 gaagctagag taagtagttc gccagttaat agtttgcgca acgttgttgc cattgctaca
8521 ggcatcgtgg tgtcacgctc gtcgtttggt atggcttcat tcagctccgg ttcccaacga
8581 tcaaggcgag ttacatgatc ccccatgttg tgcaaaaaag cggttagctc cttcggtcct
8641 ccgatcgttg tcagaagtaa gttggccgca gtgttatcac tcatggttat ggcagcactg
8701 cataattctc ttactgtcat gccatccgta agatgctttt ctgtgactgg tgagtactca
8761 accaagtcat tctgagaata gtgtatgcgg cgaccgagtt gctcttgccc ggcgtcaata
8821 cgggataata ccgcgccaca tagcagaact ttaaaagtgc tcatcattgg aaaacgttct
8881 tcggggcgaa aactctcaag gatcttaccg ctgttgagat ccagttcgat gtaacccact
8941 cgtgcaccca actgatcttc agcatctttt actttcacca gcgtttctgg gtgagcaaaa
9001 acaggaaggc aaaatgccgc aaaaaaggga ataagggcga cacggaaatg ttgaatactc
9061 atactcttcc tttttcaata ttattgaagc atttatcagg gttattgtct catgagcgga
9121 tacatatttg aatgtattta gaaaaataaa caaatagggg ttccgcgcac atttccccga
9181 aaagtgccac ctgacgtc
//
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
名称：pcDNA3-TLR9-YFP人源基因质粒
别称: Plasmid#13642;CD289
启动子：CMV
复制子: pUC
原核抗性: Amp
筛选标记：G418
克隆菌株: DH5a
培养条件: 37度
质粒属性
载体宿主：哺乳细胞
载体用途：蛋白表达
基因种属：人
基因类型：ORF
原核抗性：Amp
真核抗性：Neo/G418
荧光蛋白：黄色
质粒简介
pcDNA3-TLR9-YFP是一个人源基因哺乳细胞过表达质粒。
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported 9198 bp ds-DNA circular SYN 03-DEC-2017
DEFINITION synthetic circular DNA
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..9198
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
enhancer 235..614
/label=CMV enhancer
/note="human cytomegalovirus immediate early enhancer"
promoter 615..818
/label=CMV promoter
/note="human cytomegalovirus (CMV) immediate early
promoter"
promoter 863..881
/label=T7 promoter
/note="promoter for bacteriophage T7 RNA polymerase"
misc_feature 913..4008
/label=TLR9
CDS 4015..4734
/codon_start=1
/product="enhanced YFP"
/label=EYFP
/note="mammalian codon-optimized"
/translation="MVSKGEELFTGVVPILVELDGDVNGHKFSVSGEGEGDATYGKLTL
KFICTTGKLPVPWPTLVTTFGYGLKCFARYPDHMKQHDFFKSAMPEGYVQERTIFFKDD
GNYKTRAEVKFEGDTLVNRIELKGIDFKEDGNILGHKLEYNYNSHNVYIMADKQKNGIK
VNFKIRHNIEDGSVQLADHYQQNTPIGDGPVLLPDNHYLSYQSALSKDPNEKRDHMVLL
EFVTAAGITLGMDELYK"
promoter complement(4750..4768)
/label=SP6 promoter
/note="promoter for bacteriophage SP6 RNA polymerase"
polyA_signal 4794..5018
/label=bGH poly(A) signal
/note="bovine growth hormone polyadenylation signal"
rep_origin 5064..5492
/direction=RIGHT
/label=f1 ori
/note="f1 bacteriophage origin of replication; arrow
indicates direction of (+) strand synthesis"
promoter 5506..5836
/label=SV40 promoter
/note="SV40 enhancer and early promoter"
rep_origin 5687..5822
/label=SV40 ori
/note="SV40 origin of replication"
CDS 5903..6697
/codon_start=1
/gene="aph(3')-II (or nptII)"
/product="aminoglycoside phosphotransferase from Tn5"
/label=NeoR/KanR
/note="confers resistance to neomycin, kanamycin, and G418
(Geneticin(R))"
/translation="MIEQDGLHAGSPAAWVERLFGYDWAQQTIGCSDAAVFRLSAQGRP
VLFVKTDLSGALNELQDEAARLSWLATTGVPCAAVLDVVTEAGRDWLLLGEVPGQDLLS
SHLAPAEKVSIMADAMRRLHTLDPATC-PFDHQAKHRIERARTRMEAGLVDQDDLDEEHQ
GLAPAELFARLKARMPDGEDLVVTHGDACLPNIMVENGRFSGFIDCGRLGVADRYQDIA
LATRDIAEELGGEWADRFLVLYGIAAPDSQRIAFYRLLDEFF"
polyA_signal 6871..6992
/label=SV40 poly(A) signal
/note="SV40 polyadenylation signal"
rep_origin complement(7443..8031)
/direction=LEFT
/label=ori
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
CDS complement(8202..9062)
/codon_start=1
/gene="bla"
/product="beta-lactamase"
/label=AmpR
/note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and
related antibiotics"
/translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI
ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS
PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW
EPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA
LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS
LIKHW"
promoter complement(9063..9167)
/gene="bla"
/label=AmpR promoter
ORIGIN
1 gacggatcgg gagatctccc gatcccctat ggtcgactct cagtacaatc tgctctgatg
61 ccgcatagtt aagccagtat ctgctccctg cttgtgtgtt ggaggtcgct gagtagtgcg
121 cgagcaaaat ttaagctaca acaaggcaag gcttgaccga caattgcatg aagaatctgc
181 ttagggttag gcgttttgcg ctgcttcgcg atgtacgggc cagatatacg cgttgacatt
241 gattattgac tagttattaa tagtaatcaa ttacggggtc attagttcat agcccatata
301 tggagttccg cgttacataa cttacggtaa atggcccgcc tggctgaccg cccaacgacc
361 cccgcccatt gacgtcaata atgacgtatg ttcccatagt aacgccaata gggactttcc
421 attgacgtca atgggtggac tatttacggt aaactgccca cttggcagta catcaagtgt
481 atcatatgcc aagtacgccc cctattgacg tcaatgacgg taaatggccc gcctggcatt
541 atgcccagta catgacctta tgggactttc ctacttggca gtacatctac gtattagtca
601 tcgctattac catggtgatg cggttttggc agtacatcaa tgggcgtgga tagcggtttg
661 actcacgggg atttccaagt ctccacccca ttgacgtcaa tgggagtttg ttttggcacc
721 aaaatcaacg ggactttcca aaatgtcgta acaactccgc cccattgacg caaatgggcg
781 gtaggcgtgt acggtgggag gtctatataa gcagagctct ctggctaact agagaaccca
841 ctgcttactg gcttatcgaa attaatacga ctcactatag ggagacccaa gcttggtacc
901 gagctcggat ccatgggttt ctgccgcagc gccctgcacc cgctgtctct cctggtgcag
961 gccatcatgc tggccatgac cctggccctg ggtaccttgc ctgccttcct accctgtgag
1021 ctccagcccc acggcctggt gaactgcaac tggctgttcc tgaagtctgt gccccacttc
1081 tccatggcag caccccgtgg caatgtcacc agcctttcct tgtcctccaa ccgcatccac
1141 cacctccatg attctgactt tgcccacctg cccagcctgc ggcatctcaa cctcaagtgg
1201 aactgcccgc cggttggcct cagccccatg cacttcccct gccacatgac catcgagccc
1261 agcaccttct tggctgtgcc caccctggaa gagctaaacc tgagctacaa caacatcatg
1321 actgtgcctg cgctgcccaa atccctcata tccctgtccc tcagccatac caacatcctg
1381 atgctagact ctgccagcct cgccggcctg catgccctgc gcttcctatt catggacggc
1441 aactgttatt acaagaaccc ctgcaggcag gcactggagg tggccccggg tgccctcctt
1501 ggcctgggca acctcaccca cctgtcactc aagtacaaca acctcaccgt ggtgccccgc
1561 aacctgcctt ccagcctgga gtatctgctg ttgtcctaca atcgcatcgt caaactggcg
1621 cctgaggacc tggccaatct gaccgccctg cgtgtgctcg atgtgggcgg aaattgccgc
1681 cgctgcgacc acgctcccaa cccctgcatg gagtgccctc gtcacttccc ccagctacat
1741 cccgatacct tcagccacct gagccgtctt gaaggcctgg tgttgaagga cagttctctc
1801 tcctggctga atgccagttg gttccgtggg ctgggaaacc tccgagtgct ggacctgagt
1861 gagaacttcc tctacaaatg catcactaaa accaaggcct tccagggcct aacacagctg
1921 cgcaagctta acctgtcctt caattaccaa aagagggtgt cctttgccca cctgtctctg
1981 gccccttcct tcgggagcct ggtcgccctg aaggagctgg acatgcacgg catcttcttc
2041 cgctcactcg atgagaccac gctccggcca ctggcccgcc tgcccatgct ccagactctg
2101 cgtctgcaga tgaacttcat caaccaggcc cagctcggca tcttcagggc cttccctggc
2161 ctgcgctacg tggacctgtc agacaaccgc atcagcggag cttcggagct gacagccacc
2221 atgggggagg cagatggagg ggagaaggtc tggctgcagc ctggggacct tgctccggcc
2281 ccagtggaca ctcccagctc tgaagacttc aggcccaact gcagcaccct caacttcacc
2341 ttggatctgt cacggaacaa cctggtgacc gtgcagccgg agatgtttgc ccagctctcg
2401 cacctgcagt gcctgcgcct gagccacaac tgcatctcgc aggcagtcaa tggctcccag
2461 ttcctgccgc tgaccggtct gcaggtgcta gacctgtccc acaataagct ggacctctac
2521 cacgagcact cattcacgga gctaccacga ctggaggccc tggacctcag ctacaacagc
2581 cagccctttg gcatgcaggg cgtgggccac aacttcagct tcgtggctca cctgcgcacc
2641 ctgcgccacc tcagcctggc ccacaacaac atccacagcc aagtgtccca gcagctctgc
2701 agtacgtcgc tgcgggccct ggacttcagc ggcaatgcac tgggccatat gtgggccgag
2761 ggagacctct atctgcactt cttccaaggc ctgagcggtt tgatctggct ggacttgtcc
2821 cagaaccgcc tgcacaccct cctgccccaa accctgcgca acctccccaa gagcctacag
2881 gtgctgcgtc tccgtgacaa ttacctggcc ttctttaagt ggtggagcct ccacttcctg
2941 cccaaactgg aagtcctcga cctggcagga aaccagctga aggccctgac caatggcagc
3001 ctgcctgctg gcacccggct ccggaggctg gatgtcagct gcaacagcat cagcttcgtg
3061 gcccccggct tcttttccaa ggccaaggag ctgcgagagc tcaaccttag cgccaacgcc
3121 ctcaagacag tggaccactc ctggtttggg cccctggcga gtgccctgca aatactagat
3181 gtaagcgcca accctctgca ctgcgcctgt ggggcggcct ttatggactt cctgctggag
3241 gtgcaggctg ccgtgcccgg tctgcccagc cgggtgaagt gtggcagtcc gggccagctc
3301 cagggcctca gcatctttgc acaggacctg cgcctctgcc tggatgaggc cctctcctgg
3361 gactgtttcg ccctctcgct gctggctgtg gctctgggcc tgggtgtgcc catgctgcat
3421 cacctctgtg gctgggacct ctggtactgc ttccacctgt gcctggcctg gcttccctgg
3481 cgggggcggc aaagtgggcg agatgaggat gccctgccct acgatgcctt cgtggtcttc
3541 gacaaaacgc agagcgcagt ggcagactgg gtgtacaacg agcttcgggg gcagctggag
3601 gagtgccgtg ggcgctgggc actccgcctg tgcctggagg aacgcgactg gctgcctggc
3661 aaaaccctct ttgagaacct gtgggcctcg gtctatggca gccgcaagac gctgtttgtg
3721 ctggcccaca cggaccgggt cagtggtctc ttgcgcgcca gcttcctgct ggcccagcag
3781 cgcctgctgg aggaccgcaa ggacgtcgtg gtgctggtga tcctgagccc tgacggccgc
3841 cgctcccgct acgtgcggct gcgccagcgc ctctgccgcc agagtgtcct cctctggccc
3901 caccagccca gtggtcagcg cagcttctgg gcccagctgg gcatggccct gaccagggac
3961 aaccaccact tctataaccg gaacttctgc cagggaccca cggccgaact cgagatggtg
4021 agcaagggcg aggagctgtt caccggggtg gtgcccatcc tggtcgagct ggacggcgac
4081 gtaaacggcc acaagttcag cgtgtccggc gagggcgagg gcgatgccac ctacggcaag
4141 ctgaccctga agttcatctg caccaccggc aagctgcccg tgccctggcc caccctcgtg
4201 accaccttcg gctacggcct gaagtgcttc gcccgctacc ccgaccacat gaagcagcac
4261 gacttcttca agtccgccat gcccgaaggc tacgtccagg agcgcaccat cttcttcaag
4321 gacgacggca actacaagac ccgcgccgag gtgaagttcg agggcgacac cctggtgaac
4381 cgcatcgagc tgaagggcat cgacttcaag gaggacggca acatcctggg gcacaagctg
4441 gagtacaact acaacagcca caacgtctat atcatggccg acaagcagaa gaacggcatc
4501 aaggtgaact tcaagatccg ccacaacatc gaggacggca gcgtgcagct cgccgaccac
4561 taccagcaga acacccccat cggcgacggc cccgtgctgc tgcccgacaa ccactacctg
4621 agctaccagt ccgccctgag caaagacccc aacgagaagc gcgatcacat ggtcctgctg
4681 gagttcgtga ccgccgccgg gatcactctc ggcatggacg agctgtacaa gtaatctaga
4741 gggccctatt ctatagtgtc acctaaatgc tagagctcgc tgatcagcct cgactgtgcc
4801 ttctagttgc cagccatctg ttgtttgccc ctcccccgtg ccttccttga ccctggaagg
4861 tgccactccc actgtccttt cctaataaaa tgaggaaatt gcatcgcatt gtctgagtag
4921 gtgtcattct attctggggg gtggggtggg gcaggacagc aagggggagg attgggaaga
4981 caatagcagg catgctgggg atgcggtggg ctctatggct tctgaggcgg aaagaaccag
5041 ctggggctct agggggtatc cccacgcgcc ctgtagcggc gcattaagcg cggcgggtgt
5101 ggtggttacg cgcagcgtga ccgctacact tgccagcgcc ctagcgcccg ctcctttcgc
5161 tttcttccct tcctttctcg ccacgttcgc cggctttccc cgtcaagctc taaatcgggg
5221 catcccttta gggttccgat ttagtgcttt acggcacctc gaccccaaaa aacttgatta
5281 gggtgatggt tcacgtagtg ggccatcgcc ctgatagacg gtttttcgcc ctttgacgtt
5341 ggagtccacg ttctttaata gtggactctt gttccaaact ggaacaacac tcaaccctat
5401 ctcggtctat tcttttgatt tataagggat tttggggatt tcggcctatt ggttaaaaaa
5461 tgagctgatt taacaaaaat ttaacgcgaa ttaattctgt ggaatgtgtg tcagttaggg
5521 tgtggaaagt ccccaggctc cccaggcagg cagaagtatg caaagcatgc atctcaatta
5581 gtcagcaacc aggtgtggaa agtccccagg ctccccagca ggcagaagta tgcaaagcat
5641 gcatctcaat tagtcagcaa ccatagtccc gcccctaact ccgcccatcc cgcccctaac
5701 tccgcccagt tccgcccatt ctccgcccca tggctgacta atttttttta tttatgcaga
5761 ggccgaggcc gcctctgcct ctgagctatt ccagaagtag tgaggaggct tttttggagg
5821 cctaggcttt tgcaaaaagc tcccgggagc ttgtatatcc attttcggat ctgatcaaga
5881 gacaggatga ggatcgtttc gcatgattga acaagatgga ttgcacgcag gttctccggc
5941 cgcttgggtg gagaggctat tcggctatga ctgggcacaa cagacaatcg gctgctctga
6001 tgccgccgtg ttccggctgt cagcgcaggg gcgcccggtt ctttttgtca agaccgacct
6061 gtccggtgcc ctgaatgaac tgcaggacga ggcagcgcgg ctatcgtggc tggccacgac
6121 gggcgttcct tgcgcagctg tgctcgacgt tgtcactgaa gcgggaaggg actggctgct
6181 attgggcgaa gtgccggggc aggatctcct gtcatctcac cttgctcctg ccgagaaagt
6241 atccatcatg gctgatgcaa tgcggcggct gcatacgctt gatccggcta cctgcccatt
6301 cgaccaccaa gcgaaacatc gcatcgagcg agcacgtact cggatggaag ccggtcttgt
6361 cgatcaggat gatctggacg aagagcatca ggggctcgcg ccagccgaac tgttcgccag
6421 gctcaaggcg cgcatgcccg acggcgagga tctcgtcgtg acccatggcg atgcctgctt
6481 gccgaatatc atggtggaaa atggccgctt ttctggattc atcgactgtg gccggctggg
6541 tgtggcggac cgctatcagg acatagcgtt ggctacccgt gatattgctg aagagcttgg
6601 cggcgaatgg gctgaccgct tcctcgtgct ttacggtatc gccgctcccg attcgcagcg
6661 catcgccttc tatcgccttc ttgacgagtt cttctgagcg ggactctggg gttcgaaatg
6721 accgaccaag cgacgcccaa cctgccatca cgagatttcg attccaccgc cgccttctat
6781 gaaaggttgg gcttcggaat cgttttccgg gacgccggct ggatgatcct ccagcgcggg
6841 gatctcatgc tggagttctt cgcccacccc aacttgttta ttgcagctta taatggttac
6901 aaataaagca atagcatcac aaatttcaca aataaagcat ttttttcact gcattctagt
6961 tgtggtttgt ccaaactcat caatgtatct tatcatgtct gtataccgtc gacctctagc
7021 tagagcttgg cgtaatcatg gtcatagctg tttcctgtgt gaaattgtta tccgctcaca
7081 attccacaca acatacgagc cggaagcata aagtgtaaag cctggggtgc ctaatgagtg
7141 agctaactca cattaattgc gttgcgctca ctgcccgctt tccagtcggg aaacctgtcg
7201 tgccagctgc attaatgaat cggccaacgc gcggggagag gcggtttgcg tattgggcgc
7261 tcttccgctt cctcgctcac tgactcgctg cgctcggtcg ttcggctgcg gcgagcggta
7321 tcagctcact caaaggcggt aatacggtta tccacagaat caggggataa cgcaggaaag
7381 aacatgtgag caaaaggcca gcaaaaggcc aggaaccgta aaaaggccgc gttgctggcg
7441 tttttccata ggctccgccc ccctgacgag catcacaaaa atcgacgctc aagtcagagg
7501 tggcgaaacc cgacaggact ataaagatac caggcgtttc cccctggaag ctccctcgtg
7561 cgctctcctg ttccgaccct gccgcttacc ggatacctgt ccgcctttct cccttcggga
7621 agcgtggcgc tttctcaatg ctcacgctgt aggtatctca gttcggtgta ggtcgttcgc
7681 tccaagctgg gctgtgtgca cgaacccccc gttcagcccg accgctgcgc cttatccggt
7741 aactatcgtc ttgagtccaa cccggtaaga cacgacttat cgccactggc agcagccact
7801 ggtaacagga ttagcagagc gaggtatgta ggcggtgcta cagagttctt gaagtggtgg
7861 cctaactacg gctacactag aaggacagta tttggtatct gcgctctgct gaagccagtt
7921 accttcggaa aaagagttgg tagctcttga tccggcaaac aaaccaccgc tggtagcggt
7981 ggtttttttg tttgcaagca gcagattacg cgcagaaaaa aaggatctca agaagatcct
8041 ttgatctttt ctacggggtc tgacgctcag tggaacgaaa actcacgtta agggattttg
8101 gtcatgagat tatcaaaaag gatcttcacc tagatccttt taaattaaaa atgaagtttt
8161 aaatcaatct aaagtatata tgagtaaact tggtctgaca gttaccaatg cttaatcagt
8221 gaggcaccta tctcagcgat ctgtctattt cgttcatcca tagttgcctg actccccgtc
8281 gtgtagataa ctacgatacg ggagggctta ccatctggcc ccagtgctgc aatgataccg
8341 cgagacccac gctcaccggc tccagattta tcagcaataa accagccagc cggaagggcc
8401 gagcgcagaa gtggtcctgc aactttatcc gcctccatcc agtctattaa ttgttgccgg
8461 gaagctagag taagtagttc gccagttaat agtttgcgca acgttgttgc cattgctaca
8521 ggcatcgtgg tgtcacgctc gtcgtttggt atggcttcat tcagctccgg ttcccaacga
8581 tcaaggcgag ttacatgatc ccccatgttg tgcaaaaaag cggttagctc cttcggtcct
8641 ccgatcgttg tcagaagtaa gttggccgca gtgttatcac tcatggttat ggcagcactg
8701 cataattctc ttactgtcat gccatccgta agatgctttt ctgtgactgg tgagtactca
8761 accaagtcat tctgagaata gtgtatgcgg cgaccgagtt gctcttgccc ggcgtcaata
8821 cgggataata ccgcgccaca tagcagaact ttaaaagtgc tcatcattgg aaaacgttct
8881 tcggggcgaa aactctcaag gatcttaccg ctgttgagat ccagttcgat gtaacccact
8941 cgtgcaccca actgatcttc agcatctttt actttcacca gcgtttctgg gtgagcaaaa
9001 acaggaaggc aaaatgccgc aaaaaaggga ataagggcga cacggaaatg ttgaatactc
9061 atactcttcc tttttcaata ttattgaagc atttatcagg gttattgtct catgagcgga
9121 tacatatttg aatgtattta gaaaaataaa caaatagggg ttccgcgcac atttccccga
9181 aaagtgccac ctgacgtc
//
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
| P1374/pECMV-3×FLAG-pLK4人源基因质粒 |
| P1698/pECMV-3×FLAG-LCK人源基因质粒 |
| P1605/pECMV-CCNL2-3×FLAG人源基因质粒 |
| P1184/pEGFP-PDL1人源基因质粒 |
| P1188/pEGFP-P65人源基因质粒 |
| P1204/NGFR人源基因质粒 |
| P1212/pEF-hSEMA4C-Fc人源基因质粒 |
| P1213/pLVX-PARK7-EGFP-IRES-Puro人源基因质粒 |
| P1310/pCDNA3.1-LPAR2人源基因质粒 |
| P1224/pCDNA3.1-FLAG-LPAR2人源基因质粒 |
| P4101/pCDNA3.1-3×HA-TBK1人源基因质粒 |
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文献和实验相关实验
表达载体的构建方法及步骤 一、载体的选择及如何阅读质粒图谱 目前，载体主要有病毒和非病毒两大类,其中质粒 DNA 是一种新的非病毒转基因载体。 一个合格质粒的组成要素： （1）复制起始位点 Ori 即控制复制起始的位点。原核生物 DNA 分子中只有一个复制起始点。而 真核生物 DNA 分子有多个复制起始位点。 （2）抗生素抗性基因可以便于加以检测，如 Amp+ ,Kan+ （3）多克隆位点 MCS 克隆携带外源基因片段 （4） P/E 启动子/增强
非病毒载体介导的基因治疗有许多优点，但就目前大多数表达体系而言普遍存在外源基因表达水平低而短暂等问题为了使外源基因稳定持续表达，必须对质粒DNA 进行改造。附着体质粒载体(episomal vector)可以使外源基因以附着体形式复制，分离到子代细胞，从而使基因高效持续表达，是种新型的非病毒表达载体 。 我们构建了以EB病毒(Epstein Barr virus，EBV)复制子(EBV replicon，EBVR)为基础的附着体质粒载体，并将报告基因增强型绿色
【求助】逆转录病毒、慢病毒载体与其他真核表达载体在稳定筛选时的区别？
roy_liu823 逆转录病毒和慢病毒载体经包装后可以得到携带外源基因的病毒，将病毒感染细胞后，外源基因可以整合到细胞基因组中，经过稳定的筛选后，就可以得到稳定表达外源基因的细胞。 而一些真核表达载体如pcDNA3.1经脂质体转染进细胞后，也可以整合到细胞基因组中，并经过G418的筛选后，也可以得到稳定表达外源基因的细胞。我就很困惑：这两者有什么区别？用逆转录病毒或慢病毒载体的优势在哪？如果我想得到能稳定表达某一基因的骨髓基质干细胞，是不是用pcDNA3
pcDNA3-TLR9-YFP人源基因质粒
￥100 - 1000
