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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20
- 保质期:
2年
- 英文名:
Plasmid#17224;4831426K01RikAI447493A
- 库存:
100
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格:
干粉/液体
名称:pLenti6/UbC/mSlc7a1人源基因质粒
别称: Plasmid#17224;4831426K01RikAI447493A
启动子:CMV
复制子: pUC
质粒分类:基因文库质粒
原核抗性: Amp
克隆菌株: DH5a
培养条件: 37度
质粒属性
载体宿主:哺乳细胞
载体用途:蛋白表达
基因种属:人
基因类型:ORF
原核抗性:Amp
真核抗性:
荧光蛋白:
质粒简介:详询
质粒图谱
质粒序列:详询
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后,请先根据产品管壁标签来判断产品形式,并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉(常温运输,存于-20度,90天保质期,请务必转化挑单克隆培养,不要直接使用和测序)
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒;
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min,加入2μl质粒,再冰浴30min后,42℃热激60s,不要搅动,再冰浴2min;(从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作)
③加入900μl无抗的LB液体培养基,180rpm震荡37℃培养45min;
④6000rpm离心5min,仅留100μl上清液重悬细菌沉淀,并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;(可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布,可以比传统涂布方法获得更多转化子)
⑤将平板正向培养1h,再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h;
(菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态,要先转克隆感受态,重提质粒后再导入表达感受态)
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中,加入对应抗生素,220rpm震荡培养14h,根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种(冰袋运输,存于-80℃,保质期90天,请务必划线挑单克隆培养)
四区划线后挑单菌落培养,酵母菌需要先液体复苏再四区划线,再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种(冰袋运输,存于4℃,保质期7天)
穿刺接种,液体培养后四区划线,再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板(冰袋运输,存于4℃,保质期7天)
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒(冰袋运输,存于-20℃,保质期90天)
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒(常温运输,存于-20度,90天保质期,请务必转化挑单克隆培养,不要直接使用和测序)
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中,加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min,吸取5ul质粒转化,离心全涂。
二、转化图片
| P2921/pET-22b-Tev-REV质粒 |
| P2928/pECMV-3×FLAG-Halo-K73T质粒 |
| P3219/pLVML-3×FLAG-Halo-K73T-IRES-Puro质粒 |
| P2942/pHG52d34.5-CMV-PD-1(b)-mCherry质粒 |
| P2943/pHG52d34.5-CMV-Mil-15-mCherry质粒 |
| P2944/PHG52d34.5-CMV-Mil-21-mCherry质粒 |
| P2945/pBBR1MCS2-Tac-NDH2质粒 |
| P2946/pET28a-NDH2质粒 |
| P2947/pUC18-LasR-pLasRV-EGFP质粒 |
| P3008/pBV-Luc wt MBS1-4质粒 |
| P3009/pBV-Luc mut MBS1-4质粒 |
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文献和实验6xW7xs2tF3mD2mZSWiRkdaCZeWWrSItcUOmFn0ix60i5KwM7X6LRZBzWgGwIfuKXLpoN9240E6ec5aNGtMmni1fdOmyJgCiVc7a1h391t3dbxPGjRV5ZvFpbXI3V++WBltLWneMzFu90a/JgBulWW6x4SNGqYLZXUtxQ5Ah37L28N/dbFmScOH3vFj8djzjlYjAG49AtEl+4zGNOUYEIgIRgYjAAYvA79Ye74YlxBsgy5rE1xQJruAGri
我们实验室有PLVX 和PCDF 两种慢病毒载体,前者没有其他的辅助质粒,不知道哪些大侠用过这种载体系统,能不能共享下辅助质粒呢。有的话尽快联系我哦,QQ869055498 [img]data:image/png;base64,iVBORw0KGgoAAAANSUhEUgAAAh8AAAHVCAYAAABRxpmeAAAgAElEQVR4AeydBVhUXRPH/zSoGGCBqCCC3d3Y3d3dYuf32t
名称:转基因小鼠模型的建立(SOP)关键词:转基因小鼠目的:在动物体研究转化基因原理:转基因动物是指染色体基因组中整合有外源基因并能遗传给后代的一类动物。整合到动物染色体基因组的外源基因称为转基因。转基因技术则是指制备转基因动物所需的一套技术,它涉及外源基因的构建、载体和受体的筛选、基因导人技术、供转基因胚胎发育的体外培养系统和宿主动物等许多方面。当制备转基因动物时,外源基因可能只整合到动物的部分组织细胞的基因组,也可能整合进动物所有组织细胞的基因组中。部分组织细胞的基因组中整合有外源基因










