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- 石蜡组织包埋
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- 2026年04月24日
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晶莱生物
- 服务名称：
石蜡组织包埋
- 规格：
样本
组织石蜡包埋切片实验步骤
1、取材：新鲜组织固定于4%多聚J醛24h以上。将组织从固定液取出在通风橱内用手术刀将目的部位组织修平整，将修切好的组织和对应的标签放于脱水盒内。
2、脱水：将脱水盒放进吊篮里于脱水机内依次梯度酒精进行脱水。75%酒精4h-85%酒精2h-90%酒精2h-95%酒精1h-无水乙醇I 30min-无水乙醇II 30min-醇苯5-10min-二甲苯I 5-10min-二甲苯II 5-10min-蜡I 1h-蜡II 1h-蜡III 1h。
3、包埋：将浸好蜡的组织于包埋机内进行包埋。先将融化的蜡放入包埋框，待蜡凝固之前将组织从脱水盒内取出按照包埋面的要求放入包埋框并贴上对应的标签。于-20°冻台冷却，蜡凝固后将蜡块从包埋框中取出并修整蜡块。
4、切片：将修整好的蜡块置于石蜡切片机上切片，片厚4μm。 切片漂浮于摊片机40℃ 温水上将组织展平，用载玻片将组织捞起，并放进60℃ 烘箱内烤片。待水烤干蜡烤化后取出常温保存备用。
实验注意事项：
1、固定剂应有足够的量，一般为组织块体积的10∽15倍。
2、根据组织的不同和实验目的的不同，选取不同的固定剂。
3、固定时间依材料大小、固定剂种类而异，可从1小时到几时小时，有时中间需要更新固定剂。某些固定剂对组织的硬化作用较强，作用时间应严加控制，不能过长。
4、取材切面要平整，厚度不易超过2mm，否则脱水效果不能保证，
5、对于有特许要求的组织，取材时要保证对目的组织的完整保留。
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文献和实验免疫纳米金染色与免疫胶体金―银法染色基本相似，也可分为包埋前染色和包埋后染色。下面分别介绍包埋前免疫纳米金单重染色和与免疫酶染色结合的双重染色基本程序： 包埋前免疫，纳米金单重染色按以下步骤进行免疫染色： 1. 含1％正常血清或1%BSA的PBS预孵育20～30分钟； 2. 特异性第一抗体4℃孵育24～48小时后PBS漂洗3次，每次10分钟； 3. 纳米金标记IgGFab，片段(1：100，Nanoprobes)室温孵育2小时或4℃孵育12小时后PBS漂洗3次，每次10
1．取材组织块，经固定后，常规石蜡包埋，4μm切片。 2．切片常规用二甲苯脱蜡，经各级乙醇至水洗：二甲苯（I）5min→二甲苯（Ⅱ）5min→100％乙醇2min→95％的乙醇1min→80％乙醇1min→75％乙醇1min→蒸馏水洗2min。 3．苏木素染色5min，自来水冲洗。 4．盐酸乙醇分化30s（提插数下）。 5．自来水浸泡15min或温水（约50℃）5min
在制作切片或超薄切片时，由于组织是柔软的，或局部的软硬不均，这样制作厚薄均匀的切片是困难的。所以有必要用一定物质浸透组织内部，整个组织一样硬化，以利于切成薄片，这种物质叫做包埋剂。一股用光学显微镜观察的切片，用石蜡、火棉胶、炭蜡、明胶等作包埋剂；电子显微镜则用环氧树脂、聚苯乙烯树脂、异丁烯树脂及水溶性树脂。
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