食品中大肠菌群的测定实验

六、大肠菌群最可能数(MPN)检索表中数值的计算

大肠菌群最可能数检索表中数值，系通过几率计算出来的。由于我国在大肠菌群检验中，对检样采用了三个不同的lo倍递减接种量，每个接种量各接种丁3个乳糖胆盐发酵管。因此，乳糖阳性管可能只出现在一个管组内，也可能出现在两个管组内，或者三个管组内部出现。为此，就乳糖阳性管出现的这三种不同情况各举一例，以说明检索表中最可能数求出的情况。

1．仅有一组乳糖发酵管内有大肠菌群存在时．用公式（1）计算：
    Nλ＝2.303×lgA/B                              （1）
N——检出大肠菌群的乳糖发酵管所加样品量；
λ——大肠菌群的最可能数，个／mL或个／g；
A——加进所有各管组乳糖发酵管内样品的总量；
B——所有各管组未检出大肠菌群管中样品的总量。
例1；管       组    ①    ②     ③
     管        数    3     3      3
     每管内样品量  10mI   10mL  10mL
     阳 性 管 数    3      0      0
因此，N＝10     A＝33.3     B＝3.3
代入公式(1) 得
10λ=2.303×lg33.3/3.3
                            =2.303×lg10.091
                            =2.3
                         λ＝0.23个／mI
所以每100mL样品内大扬菌群最可能数为23个。根据表5—4中样品接种量较例1低10倍，故其大肠菌群效应为230个。

2. 两组乳糖发酵管内有大肠菌群存在时，用公式(2)计算

式中  N1P——管组②每管内加N1mL(g)样品量，有P个大肠菌群阳性管；
      N2γ——管组②每管内加N2mL(g)样品量，有γ个大肠菌群阳性管；
      γ——大肠菌群的员可能数(个／mL或个／g)；
      A——加进所有各管组乳糖发酵管内样品的总量；
      B——所有各管组未检出大肠菌群管中样品的总量。

应用公式(2)时，须先假定λ值，用试算法代进公式内以计算出k值，当代进公式的假定值与计算出的λ值相符(或最接近时)时，则所假定的λ值，即为大肠菌群的最可能数。

例2：管       数    ①     ②     ⑧
     管        数     3      3      3
     每管内样品量   10mL   10mL   0.1mL
     阳 性 管 数      0      3      2
因此，N1=1   N1P=3   N2=0.1   N2γ=0.2    A=33.3    B=30.1

    设λ=0.16个/mL，代入上式得：
    lgK＝一0.4343×0.1×0.16
    ＝1.9930512
所以，K=0.98412712
    将以上各值代入公式(2) 得：

＝2.303×0.0679963
＝0.1565955
此计算的λ值与所假设的λ值相符，因此大肠菌群最可能数为0.16个／mL，由表5-4中样品接种量较例3低10倍，故大扬菌群数应为160个。

3．三组乳糖发酵管内都有大肠菌群存在时，用公式 (3) 计算：


式中 A——加进所有各管组乳糖发酵管内样品的总量；
     B——所有各管内未检出大肠菌群管中样品的总邑，
    N1P——管组①每管加入N1 mL(g)样品，有P个大肠菌群阳性管；
    N2γ——管组②每管加入N2 mL(g)样品，有γ个大肠菌群阳性管；
    N3t——管组③每管加入N3 mL(g)样品，有t个大肠菌群阳性管；
    λ——大肠菌群的最可能数，个／mL或个／g。
应用公式(3)时，与应用公式(2)相同，也须先假定λ值，用计算法代入公式内以计算出λ值，当代进公式的假定值与计算出的λ值相符(或最接近)时，则所假定的λ值，即为大肠菌群的最可能数。

例3：管       数     ①     ②     ⑧
     管        数     3      3      3
     每管内样品量   10mL   10mL   10mL
     阳 性 管 数      2      3      1
因此，N1=10   N1P=20   N2=1   N2γ=3  N3t=0.1   A=33.3    B=10.2


设λ＝0.36个／mL，代入①②③式可得；
    lgK1＝-0.4343×l×0.36
    ＝一0.156348
所以，K1=0.69767312
lgK2＝0.4343×0.1×0.36
    ＝-0.0156348
K2＝0.96464
    lgK2＝0.4343×（1+0.1）×0.36
    ＝-0.1719828
所以，K3＝0.6730033
将以上各值代入公式 (3) 得：
                            10λ＝2.303×

                                   =2.303×lg37.705191
                               =3.6304517
所以，λ＝0.363045l7

由计算结果的λ值与所假设的λ值相符，因此大肠菌群员可能数为0.36个／mL(g)所以100mL(g)样品中大肠菌群最可能数为36个，根据表5—4中样品接种量较例3010倍，故大肠菌群最可能数为360个。