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文献和实验菌种活化:干粉标准菌株 标准贮备菌株 工作菌株; 1.1 金黄色葡萄球菌、大肠埃希氏菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌标准菌株: 挑取部分干粉溶解于0.9% 无菌氯化钠溶液中,划线接种于营养琼脂平板上,36℃±1℃ 培养18-24 小时。并观察菌落形态。 a. 金黄色葡萄球菌:菌落凸起,圆形,不透明; b. 大肠埃希氏菌:菌落稍凸,圆形,湿润,乳白色; c. 铜绿假单胞菌:菌落扁平,圆形,边缘不整齐,光滑湿润,可产生蓝绿或黄绿色素; d. 枯草芽孢杆菌: 表面粗糙不透明
、无菌 30-mm 组织培养皿、解剖显微镜、透明质酸酶、移液管、工作液、M16 溶液(Sigma)、3 mL 注射器等。 5.DNA 显微注射用器材: 1)受精卵的收集与移动用器材:巴氏移液管、酒精灯、特制吸管、玻璃刀等。 2)凹玻片准备:一块标准的凹型载玻片(硅化)、矿物油(Sigma)、工作液等。 3)注射设备的设置:微型水力驱动设备、Hamilton Gas-Tite™ 注射器(250 μL)、Intramedic™ 管道系统(外径 1.27 mm,内径 0.86 mm)、两只玻璃管道连接
和标准一次性提示每个中间相丸上装载。 尽快正视盖玻片放在充满井,覆盖均匀。要影响一个防水密封,用锅铲施加压力,以使暴露的间隔胶带粘物表面接触的盖玻片。 中间相和沉淀配药过程可以反复进行,直至盘上所有井装载和密封。 明确标示板,用于跟踪目的。感光蛋白质通常是由铝箔包装之前,他们在孵化室的板处理。 放置在温度控制腔板,通常在20 ° C。 定期的时间表,晶体生长的检查井,偏振光显微镜使用10或20倍的目标
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