如何铸就抗体的质量
现在市面上抗体的厂家繁多,竞争激烈,如何能在众多厂家中挑选质量上乘,价格到位的抗体呢?影响抗体的质量有如下几个方面:一、抗原的设计抗原的设计是影响抗体质量的首要因素,抗原的质量好坏直接影响到抗体的应用结果,如抗体的特异性等。二、家兔的免疫和饲养三、抗体的纯化如何从家兔的血清中提取纯度高的抗体呢?严格地讲要通过以下三个步骤:1. 用Protein A-Sepharo ...
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免疫及生物制剂
免疫及生物制剂 免疫及生物治疗针对自身免疫病的发病及病变进展的主要环节,抑制自身免疫的病理过程并达到治疗的目的。目前已有数个生物治疗药物被美国或者欧洲国家FDA批准用于自身免疫病的治疗,数十种生物治疗药物在进行临床试验,有些方法已显示出很好的研究及应用前景。 1.T细胞受体多肽及T细胞疫苗 主要包括TCR抑制性多肽和TCR疫苗。给动物注射髓鞘碱性蛋白特异的减活T细胞克隆(亚致病剂量 ...
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改良过碘酸钠标记法制备酶标抗体
改良过碘酸钠标记法制备酶标抗体 HRP分子中与酶活性无关的糖基被过碘酸钠氧化为醛基,再与抗体蛋白的氨基形成Schiff碱。为了防止酶蛋白的氨基与醛基发生自身偶联,在标记前先用2,4-二硝基氟苯(DNFB)封闭酶蛋白中残留的a-和e-氨基。酶与抗体的结合反应后,再加入硼氢化钠还原成稳定的结合物。(1) 取HRP 5mg溶于0.2mol/L,pH5.6醋酸盐缓冲液1ml中,加入1%DNFB无 ...
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杂交瘤细胞的保存与复苏
杂交瘤细胞的保存与复苏 目前冻存细胞均采用-196℃液氮保存,以保持其特性和活性。 1、杂交瘤细胞的冻存 收集培养的杂交瘤细胞或从小鼠体内取出的杂交瘤细胞,加入一定量的细胞冻存液(30~40%小牛血清,50~60%不完全RPMI-1640培养液,10%DMSO),使细胞浓度为1~5×106个/ml。将细胞悬液分装到1ml冻存管中,先置于-20℃冰箱1h,再移置-80℃冰箱,最后置 ...
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