关键词: 流式细胞术 流式细胞术 FCM
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1、流式细胞仪(Flow Cytometer):是集光电子物理,光电测量,计算机,细胞荧光化学,单抗技术为一体的高科技细胞分析仪。2、流式细胞术(Flow Cytometry):利用流式细胞仪对处于快速流动的细胞或生物颗粒进行多参数、快速(每秒可达1000-10000个)的定量分析和分选(纯度可达99%以上)的技术。
流式细胞术(Flow Cytometry,FCM)
(本篇文章来源于网络,如有异议请联系我们,我们将在3个工作日内作出处理。)流式细胞仪结构 • 激光光源及光束形成系统• 流动室及液流驱动系统• 光学系统:透镜、滤光片、小孔,聚焦光源, 收集不同波长的荧光信号。• 信号检测与分析:光电倍增管(PMT)、补偿 电路。荧光信号转换为电信号,并将信号放大。• 存储、显示、分析系统:计算机。• 细胞分选系统流式免疫分型技术要点标本的获取和运输标本的制备和染色仪器的校准和质控流式细胞仪数据获取与储存FCM的主要测定指标FSC, SSC, FL1, FL2, FL3 (FL4)其中:FSC:反映细胞的大小;SSC:反映细胞内颗粒性FCM标记方法单标:一种单抗/tube: FL1, FSC, SSC(三参数)双标:(两种单抗/tube):FL1, FL1, FSC, SSC(四参数)三/四标:(三种单抗/tube)(四种单抗/tube): FL1-FL3/4, FSC, SSC荧光素种类FITC(异硫氰酸荧光素):绿色 530nmPE(藻红蛋白):橙黄色 575nmPerCP(多甲藻黄素叶绿素蛋白):深红色 675nmPI(碘化丙啶):橙红色 620nm 488nm波长的氩离子激光激发APC(别藻兰蛋白):红色 660nm630nm波长的氦氖激光或红色二极管激光激发抗体的选择PE最强,适用于弱表达抗原FITC最便宜,适用于强表达抗原,适用范围广biotin-avidin不适合 弱抗原的检测数据显示方式单参数直方图双参数二维点图等高图二维密度图三维图流式细胞的主要信息:FluorescenceFL1FL2FL3FL4流式常见图形 (Histogram Plot)流式常见图形 (Dot Plot)
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