用Hirt法提取法抽提染色体外游离DNA
病毒感染宿主细胞后常常存在一些非整合的线形或环状双链DNA分子,通常称为赫特(Hirt)DNA。下面是一个试剂盒的步骤:GENMED 赫特(HIRT)法病毒DNA 纯化试剂盒1. 准备 个 孔细胞培养板的细胞(不同试剂盒的具体用量不一,说明书中有具体流程)2. 抽掉 孔细胞培养板里的 孔培养液3. 轻轻沿壁加入 毫升GENMED 清理液(Reagent A),清洗生长的细胞表面4. 小心抽掉清理液 ...
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分子诊断实验方法
生物大分子主要指核酸(DNA和RNA)和蛋白质,通过从分子水平上完成DNA RNA或蛋白质检测,从而对疾病作出诊断的方法称为分子诊断,目前常用的方法有基因诊断和肿瘤标志物检测两种。基因诊断 基因诊断是用分子生物学的理论和技术,通过直接探查基因的存在状态或缺陷,从基因结构、定位、复制、转录或翻译水平分析基因的功能,从而对人体状态与疾病做出诊断的方法。 人体基因组的类型早在受精卵开始时就已形成,因 ...
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SNPs概念
SNPs概念(single nucleotide polymorphism , SNP,发音为“snips”), 主要是指在基因组水平上由单个核苷酸的变异所引起的 DNA 序列多态性。它是人类可遗传的变异中最常见的一种。占所有已知多态性的 90% 以上。 SNP 在人类基因组中广泛存在,平均每 500 ~ 1000 个碱基对中就有 1 个,估计其总数可达 300 万个甚至更多。 SNP 所表现的多态性只涉及到单个碱基的变异,这种变异可由单个碱基的转换 (transition) 或颠换 (transvers ...
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基因工程的克隆载体
基因工程所用的克隆载体常称之为分子克隆载体(molecular cloning vector),它是一类可供外源DNA插入并携带重组DNA分子进入适当宿主细胞的DNA分子。如果打一个十分浅显的比喻,分子克隆载体犹如航天技术中的运载火箭,外源DNA分子就如火箭上搭载的卫星,宿主细胞则如外部深邃的空间。分子克隆载体的主要功能就是将外源基因携带入宿主细胞,并在宿主细胞中进行DNA扩增和使外源基因得以高效表达。在这一点上又 ...
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