DAPI染DNA的原理及使用方法
DAPI 即4'6-二脒基-2-苯基吲哚(4'6-diamidino-2-phenylindole),分子式为C16H15N5·2C3H6O3 ,分子量457.48。DAPI是一种能够与DNA强力结合的荧光染料。它结合到双链DNA小沟的AT碱基对处,一个DAPI分子可以占据三个碱基对的位置。结合到双链DNA上DAPI分子的荧光强度提高大约20倍,常用与荧光显微镜观测,根据荧光的强度可以确定DNA的 ...
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染色体 G 显带核型分析
核型分析简介染色体是细胞分裂期高度凝集的 DNA 蛋白质纤维,是间期染色质结构紧密盘绕折叠的结果。核型是指一个体细胞内的全部染色体按其大小、形态特征排列起来构成的图像。将待检细胞进行染色体数目、形态结构分析,确定其核型是否与正常核型一致,称为核型分析。染色体核型分析,是遗传学科学研究和辅助临床诊断的重要手段之一,是分析染色体易位、缺失,诊断各种遗传病变的关键指标。染色体核型分析实验是选择增殖旺盛期的细胞进行秋水仙素处理 . ...
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DNA的Feulgen染色法
1.目的与原理实验目的:学习DNA的Feulgen染色方法,观察染色结果,了解反应原理。实验原理:DNA经弱酸(1mol/L HCl)水解,其上的嘌呤碱和脱氧核糖之间的键打开,使脱氧核糖的一端形成游离的醛基,这些醛基在原位与Schiff试剂(无色品红亚硫酸溶液)反应,形成紫红色的化合物,使细胞内含有DNA的部位呈紫红色阳性反应。紫红色的产生,是由于反应产物的分子内含有醌基,醌基是一个发色团,所以具 ...
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【原创】FISH操作中的常见问题及对策
FISH检测要求使用中性福尔马林(不恰当的pH值会损伤DNA)固定24-48小时。固定时间不足会导致组织较软,在预处理过程中会丢失部分组织和信号。固定时间过长导致组织变脆,不利于切片,也会导致大分子交联情况严重,很难进行消化。福尔马林固定石蜡包埋的组织需要用蛋白酶进行消化以去除多余的组织来暴露细胞。如果消化不足(酶浓度低、温度不适合、时间太短),镜下会出现云雾状组织覆盖在细胞上,无法观测到暴露独立的细胞核,从而降低 ...
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