小胶质细胞TREM1介导的神经炎症通过NF-κB通路参与慢性偏头痛模型的中枢敏化

背景：由小胶质细胞活化介导的神经炎症促进中枢敏化，中枢敏化与慢性偏头痛（CM）的发展相关。TREM1受体可放大炎症反应。然而，其与CM的关系尚不清楚。因此，本研究致力于阐明TREM1在CM中的确切作用。方法：反复腹腔注射硝酸甘油（NTG）建立CM模型。使用von Frey纤维丝和热板实验评估机械和热敏感性。通过Western blotting检测TREM1、NF-κB通路、NLRP3炎症小体组分和促炎细胞因子。使用免疫荧光检测TREM1和NLRP3的细胞分布、小胶质细胞数量、免疫反应性和形态变化。我们研究了TREM1拮抗剂（LR12）和NF-κB抑制剂（PDTC）对疼痛行为以及c-fos和CGRP产生的影响。此外，我们还研究了LR12和PDTC是否影响小胶质细胞和NLRP3炎症小体的活化。我们合成了siRNA和TREM1过表达质粒，转染经LPS处理的BV2细胞和正常BV2细胞，并用PDTC处理TREM1过表达的BV2细胞。使用Western blotting定量NF-κB通路、NLRP3炎症小体组分和促炎细胞因子。结果：NTG给药后，TREM1表达显著上调，并仅定位于TNC中的小胶质细胞，且与NLRP3共定位良好。此外，观察到经典NF-κB通路的激活。LR12和PDTC预处理有效减轻了机械性痛觉过敏，抑制了c-fos和CGRP的表达，并抑制了CM小鼠的NF-κB活性。此外，抑制TREM1和NF-κB活性减轻了NTG诱导的小胶质细胞和NLRP3活化，以及促炎细胞因子的产生。在体外，敲低TREM1导致脂多糖（LPS）处理后NF-κB通路激活减弱，NLRP3炎症小体组分和促炎细胞因子表达降低。TREM1过表达后，NF-κB通路被激活，NLRP3炎症小体组分和促炎细胞因子上调，PDTC逆转了这种现象。结论：我们的研究结果表明，TREM1通过NF-κB通路调节小胶质细胞和NLRP3的活化，从而促进中枢敏化，并提示其参与慢性偏头痛的发病机制。