靶向神经元FKBP5通过抑制NF-κB介导的神经炎症减轻NTG诱导的慢性偏头痛小鼠模型的机械性异常性疼痛

背景：慢性偏头痛（CM）是一种致残性神经系统疾病，以持续的三叉血管敏化和神经炎症为特征。虽然FK506结合蛋白51（FKBP5）调节慢性疼痛中的脊髓神经炎症，但其在三叉血管伤害性信息处理和CM发病机制中的具体作用仍 largely 未知。方法：我们使用硝酸甘油（NTG）诱导的CM小鼠模型。对三叉神经尾侧核（TNC）组织裂解液提取的总RNA进行RNA测序（RNA-seq）后，通过逆转录定量PCR（RT-qPCR）、Western blotting和免疫荧光验证靶标表达。为建立因果关系，我们使用神经元特异性CRISPR-Cas9编辑系统在TNC内敲除Fkbp5，同时使用特异性FKBP5拮抗剂SAFit2和核因子κB（NF-κB）抑制剂PDTC进行药理学干预。使用von Frey纤维评估偏头痛样行为，并结合NF-κB级联激活和 trigeminovascular 神经炎症的生化分析。结果：RNA-seq、RT-qPCR、Western blotting和免疫荧光一致证实NTG处理小鼠TNC中Fkbp5 mRNA和FKBP5蛋白显著上调，主要定位于神经元。同时，在TNC中观察到显著的小胶质细胞和星形胶质细胞激活。神经元特异性Fkbp5敲除和SAFit2药理学抑制均显著减轻NTG诱导的眶周和后爪机械性异常性疼痛。此外，FKBP5缺失减弱了NTG触发的p65和IκBα磷酸化，有效抑制了下游促炎细胞因子的释放，包括白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-6（IL-6）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α），以及降钙素基因相关肽（CGRP）和c-Fos的上调。关键的是，用PDTC靶向阻断NF-κB级联再现了FKBP5缺失的保护性行为学和生化效应。结论：我们证明神经元FKBP5与CM发病机制显著相关。FKBP5通过激活NF-κB介导的神经炎症级联维持机械性异常性疼痛。因此，靶向FKBP5代表了CM的一种有前景的治疗策略。