促甲状腺激素受体融合蛋白的表达、免疫原性及临床意义分析

甲状腺功能在很大程度上受促甲状腺激素受体（TSHR）的调节，TSHR与其抗体——促甲状腺激素受体抗体（TRAb）的相互作用会引起甲状腺功能的异常改变。本研究探讨了包含TSHR不同结构域的融合蛋白的表达、免疫原性及临床意义。构建了包含几个人TSHR（hTSHR）结构域的融合蛋白。体外实验中，这些融合蛋白作为抗原来特异性结合患者血清并采用ELISA进行分析。为了研究TSHR不同结构域的免疫原性和临床意义，体内实验包括用不同的hTSHR融合蛋白免疫BALB/c小鼠，测量血清自身抗体，评估甲状腺功能，进行组织学检查和流式细胞术以鉴定T细胞亚群的变化。合成了三种不同的hTSHR融合蛋白片段（hTSHR289、hTSHR290和hTSHR410）。hTSHR290融合蛋白与甲状腺功能减退症患者TRAb+血清表现出最强的结合反应，而hTSHR289融合蛋白与甲状腺功能亢进症患者血清中刺激性抗体表现出显著的特异性结合反应。hTSHR289融合蛋白组的小鼠观察到与甲状腺功能亢进相关的病理改变，而hTSHR290融合蛋白组的小鼠观察到与甲状腺功能减退相关的病理改变。免疫的BALB/c小鼠表现出CD4+ T细胞亚群水平升高，CD8+CD122+和CD4+CD25+ T细胞亚群水平降低。TSHR不同结构域的融合蛋白表现出不同的免疫原性。本研究制备的hTSHR289和hTSHR290融合蛋白可作为开发用于检测甲状腺刺激性免疫球蛋白和TSHR阻断抗体的ELISA试剂盒的基础。TSHR不同结构域的融合蛋白在小鼠中诱导了甲状腺功能亢进和甲状腺功能减退的临床症状。本研究为未来关于自身免疫性甲状腺疾病病因和机制的研究以及TRAb检测新方法的发明提供了科学依据。