己糖激酶1和2介导葡萄糖利用，通过核糖体蛋白S6激酶1调控牛乳腺上皮细胞中κ-酪蛋白的合成

葡萄糖通过mTOR信号通路在牛乳腺上皮细胞（BMEC）中发挥重要作用。本研究旨在确定葡萄糖如何影响BMEC中己糖激酶（HK）活性，并探讨HK通过雷帕霉素靶蛋白复合物1（mTORC1）信号通路调控BMEC中κ-酪蛋白（CSN3）合成的机制。为此，利用CRISPR/Cas9系统敲除了BMEC中的HK1和HK2，并检测了基因和蛋白表达、葡萄糖摄取及细胞增殖。我们发现，随着葡萄糖浓度的增加，葡萄糖摄取、细胞增殖、CSN3基因表达水平以及HK1和HK2的表达均增加。值得注意的是，在17.5 mM葡萄糖处理的HK2敲除（HK2KO）BMEC中，葡萄糖摄取显著降低。此外，在相同葡萄糖处理条件下，与野生型BMEC相比，HK1敲除（HK1KO）和HK2KO BMEC的增殖能力和CSN3丰度均显著降低。我们进一步观察到，在17.5 mM葡萄糖处理后，HK1KO和HK2KO BMEC中核糖体蛋白S6激酶1（S6K1）的磷酸化水平降低。如预期，葡萄糖处理后，HK1KO和HK2KO BMEC中葡萄糖-6-磷酸水平及糖酵解相关基因的mRNA表达水平均降低。结果表明，在葡萄糖处理下，HK1和HK2的敲除抑制了BMEC的细胞增殖和CSN3表达，这可能与S6K1失活和糖酵解抑制有关。