SETD2驱动METTL14介导的m6A抑制Piezo1衰减并激活TGM2以促进肺动脉高压

背景：肺动脉高压（PAH）的特征是由肺动脉平滑肌细胞（PASMC）增殖驱动的病理性血管重塑。虽然METTL14介导的N6-甲基腺苷（m6A）RNA修饰已被认为与PAH有关，但将m6A与PASMC功能障碍联系起来的上游调控因子和下游效应因子仍不清楚。本研究探讨了组蛋白甲基转移酶SETD2在通过Piezo1和转谷氨酰胺酶2（TGM2）驱动METTL14依赖性m6A修饰以促进PAH中的作用。方法：对C57BL/6小鼠进行低氧处理，并对肺动脉平滑肌细胞（PASMCs）进行周期性牵张，以建立体内和体外PAH模型。通过染色质免疫沉淀（ChIP）研究了SETD2介导的H3K36me3对METTL14的表观遗传调控。使用甲基化RNA免疫沉淀测序（MeRIP-seq）、RNA-seq和双荧光素酶报告基因数据来确定METTL14是否以m6A依赖性方式增强Piezo1的表达。为了分析多个数据集之间的比较，使用单因素方差分析。结果：METTL14过表达使PASMC增殖增加1.45倍（与对照组相比），并使总RNA中的整体m6A水平升高1.73倍，poly A+ RNA中的m6A水平升高1.43倍。SETD2驱动的H3K36me3组蛋白修饰使METTL14表达上调1.76倍，从而放大m6A沉积。在低氧诱导的PAH小鼠中，METTL14过表达加重了血流动力学严重程度，使右心室收缩压（RVSP）增加29%，平均肺动脉压（mPAP）增加33%（与单独低氧相比）。PASMCs中SETD2敲除使RVSP降低24%，mPAP降低28%，肺动脉中膜厚度（PAMT）降低29%，同时m6A水平降低48%。通过METTL14介导的m6A修饰在腺苷1080位点使Piezo1 mRNA稳定性增加2.36倍，使PASMCs中Piezo1蛋白表达增加3.58倍。Piezo1过表达增加细胞内Ca²⁺内流，使TGM2活性增加1.79倍，并在SETD2缺陷的情况下恢复PASMC增殖。结论：本研究确定了一个新的SETD2/H3K36me3/METTL14/m6A轴，该轴稳定Piezo1 mRNA，促进Ca²⁺依赖性TGM2活化和PASMC增殖，从而在PAH中发挥作用。靶向该通路——通过SETD2、METTL14或Piezo1抑制——可能为改善PAH中的血管重塑提供治疗潜力。