BAP31通过NF-κB信号通路促进脓毒症中内皮细胞与巨噬细胞的黏附

目的：探讨B细胞受体相关蛋白31（BAP31）在脓毒症发病机制中的作用。方法：建立盲肠结扎穿刺（CLP）诱导的C57BL/6J小鼠和脂多糖（LPS）攻击的内皮细胞（HUVECs）模型，分别模拟脓毒症动物模型和细胞模型。使用Cre/LoxP和shRNA方法分别在体内和体外敲低BAP31。通过中性粒细胞/巨噬细胞-内皮共培养评估中性粒细胞或巨噬细胞对内皮细胞的浸润和黏附。使用Cox比例风险模型评估小鼠的生存时间。采用Western blotting（WB）和实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测Toll样受体（TLR）信号通路、转化生长因子β激活激酶1（TAK1）信号通路和磷脂酰肌醇3-激酶-蛋白激酶B（PI3K/AKT）信号通路。结果：BAP31缺失降低了CLP诱导的小鼠死亡率、组织学损伤（间质水肿较轻）以及中性粒细胞和巨噬细胞的浸润。免疫组织化学和免疫荧光显示，BAP31敲低在体内和体外均显著降低ICAM1和VCAM1的表达。共培养显示，在BAP31敲低的细胞中，LPS诱导的中性粒细胞或巨噬细胞与内皮细胞的黏附显著减弱。此外，内皮细胞中BAP31敲低降低了脓毒症期间巨噬细胞表面CD80和CD86的表达以及白细胞介素1β（IL-1β）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）的水平。机制上，LPS诱导TLR4、MyD88和TRAF6的激活，以及TAK1、PI3K、AKT、IκBα和IKKα/β的磷酸化，导致内皮细胞中核因子κB（NF-κB）p65的激活。然而，BAP31敲低显著逆转了相关蛋白的表达。结论：BAP31上调内皮细胞中ICAM1和VCAM1的表达，导致脓毒症相关的器官损伤。这可能涉及TLR信号通路、TAK1通路和PI3K-AKT信号通路的激活。