TCF12调控的GRB7通过激活Notch1信号通路促进HER2+乳腺癌进展

背景：人表皮生长因子受体2阳性（HER2+）乳腺癌（BC）约占所有BC的五分之一，侵袭性强，复发率高，预后差。多项研究表明，生长因子受体结合蛋白7（GRB7）可能成为肿瘤诊断和预后的潜在治疗靶点。然而，GRB7在HER2+ BC中的作用及其潜在机制尚未完全阐明。本研究旨在探讨GRB7在HER2+ BC中的生物学功能和调控机制。方法：利用TCGA、GEO和CancerSEA数据库进行生物信息学分析，评估GRB7的临床意义。采用RT定量PCR、western blot和免疫荧光评估GRB7在BC细胞系和组织中的表达。采用MTT、EdU、集落形成、伤口愈合、Transwell和异种移植实验探讨GRB7在HER2+ BC中的生物学功能。对转染GRB7 siRNA的SK-BR-3细胞进行RNA测序，分析与GRB7相关的信号通路。采用染色质免疫沉淀分析（ChIP）和荧光素酶报告基因实验阐明GRB7在HER2+ BC中的潜在分子调控机制。结果：GRB7在BC中显著上调，并与不良预后相关，尤其是在HER2+ BC中。GRB7过表达增加HER2+ BC细胞的增殖、迁移、侵袭和集落形成，而GRB7缺失在HER2+ BC细胞中产生相反效应，并抑制异种移植瘤生长。ChIP-PCR和荧光素酶报告基因实验显示，TCF12直接结合GRB7基因启动子促进其转录。GRB7通过与Notch1相互作用激活Wnt/β-catenin通路及其他信号（如AKT、ERK），促进HER2+ BC上皮-间质转化（EMT）进展。此外，强制GRB7过表达激活Wnt/β-catenin促进EMT进展，并部分挽救TCF12沉默诱导的HER2+ BC增殖、迁移和侵袭抑制。结论：我们的工作阐明了GRB7在HER2+ BC中的致癌作用，可作为预后指标和有前景的治疗靶点。