β-Catenin (D10A8) XP® Rabbit m

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特异性/敏感性β-Catenin (D10A8) XP^® Rabbit mAb 可检测总 β 连环蛋白的内源水平。

产品使用信息

为了获得最佳的 ChIP 和 ChIP-seq 结果，每次免疫沉淀使用 20 μl 抗体和 10 μg 染色质（大约 4 x 10⁶ 个细胞）。该抗体已使用 SimpleChIP^® Enzymatic Chromatin IP Kits 进行了验证。

来源/纯化 使用与人 β 连环蛋白 Pro714 周围残基相对应的合成肽，对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。

保存 保存在 10 mM sodium HEPES (pH 7.5)、150 mM NaCl、100 µg/ml BSA、50% 甘油和低于 0.02% 的NaN3中。存储温度为 -20℃。请不要分装抗体。

背景 β-Catenin是 Wnt 信号转导通路中的一个关键下游效应分子 (1)。它与脊椎动物的两个重要生物过程有关：早期胚胎发育 (2) 和肿瘤形成 (3)。CK1 可在 Ser45 位点磷酸化 β-Catenin。该磷酸化会导致 β-Catenin随后能被 GSK-3 磷酸化 (4-6)。GSK-3β 通过在 Ser33、Ser37 和 Thr41 位点磷酸化 β-Catenin以将其降解 (7)。这些位点发生突变会提高 β-Catenin的稳定性，并且已在多种肿瘤细胞系中发现了这些突变 (8)。

1. Cadigan, K.M. and Nusse, R. (1997) Genes Dev 11, 3286-305.
2. Wodarz, A. and Nusse, R. (1998) Annu Rev Cell Dev Biol 14, 59-88.
3. Polakis, P. (1999) Curr Opin Genet Dev 9, 15-21.
4. Amit, S. et al. (2002) Genes Dev 16, 1066-76.
5. Liu, C. et al. (2002) Cell 108, 837-47.
6. Yanagawa, S. et al. (2002) EMBO J 21, 1733-42.
7. Yost, C. et al. (1996) Genes Dev 10, 1443-54.
8. Morin, P.J. et al. (1997) Science 275, 1787-90.

Western Blotting

使用 β-Catenin (D10A8) XP^® Rabbit mAb 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。

IHC-P (paraffin)

使用 β-Catenin (D10A8) XP^® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人乳腺癌细胞进行免疫组织化学分析。

IHC-P (paraffin)

使用 β-Catenin (D10A8) XP^® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人结肠癌细胞进行免疫组织化学分析。

IHC-P (paraffin)

使用 β-Catenin (D10A8) XP^® Rabbit mAb 对石蜡包埋的 HeLa（左图）或 NCI-H28（右图）细胞团进行免疫组织化学分析。

IHC-P (paraffin)

在对照肽（左图）或抗原特异性肽（右图）存在的情况下，使用 β-Catenin (D10A8) XP^® Rabbit mAb 对石蜡包埋的小鼠结肠细胞进行免疫组织化学分析。

IHC-P (paraffin)

使用 β-Catenin (D10A8) XP^® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人肺癌细胞进行免疫组织化学分析。

IHC-F (frozen)

使用 β-Catenin (D10A8) XP^® Rabbit mAb 对冷冻的小鼠结肠细胞进行免疫组织化学分析。

Flow Cytometry

使用 β-Catenin (D10A8) XP® 兔单克隆抗体（实线）或浓度匹配的 Rabbit Isotype Control #3900（虚线）对 NCI-H28（蓝色）和 HeLa 细胞（绿色）进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L), F(ab')₂ Fragment (Alexa Fluor^® 488 Conjugate) #4412 用作二抗。

IF-IC

使用 β-Catenin (D10A8) XP^® Rabbit mAb（绿色）对 HeLa（左图）和 NCI-H28（右图）细胞进行共聚焦免疫荧光分析。蓝色伪彩 = DRAQ5^® #4084（DNA 荧光染料）。

IF-F

使用 β-Catenin (D10A8) XP^® Rabbit mAb（绿色）对小鼠结肠进行共聚焦免疫荧光分析。使用 DY-554 phalloidin（红色）标记肌动蛋白纤丝。蓝色伪彩 = DRAQ5^® #4084（DNA 荧光染料）。

Chromatin IP

使用 SimpleChIP^® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9005，对 HCT116 细胞中提取的交联染色质，在加入 β-Catenin (D10A8) XP^® Rabbit mAb 或 Non-phospho (Active) β-Catenin (Ser33/37/Thr41) (D13A1) Rabbit mAb #8814 后进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP^® ChIP-seq DNA Library Prep Kit for Illumina^® #56795 制成 DNA 库。本图显示整个 AXIN2（β-Catenin的一个已知靶基因）范围内的结合作用（参见包含 ChIP-qPCR 数据的其他图）。如需了解其他 ChIP-seq 情况，请下载产品说明书。

使用 SimpleChIP^® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003 对 HCT 116 细胞的交联染色质，在加入 β-Catenin (D10A8) XP^® Rabbit mAb 或 Normal Rabbit IgG #2729 后进行染色质免疫沉淀法分析。使用 SimpleChIP^®Human Axin2 Intron 1 Primers #8973、SimpleChIP^®Human CaMK2D Intron 3 Primers #5111、human c-Myc promoter primers 和 SimpleChIP^® Human α Satellite Repeat Primers #4486 并通过实时 PCR 对富集的 DNA 进行定量分析。每份样品的免疫沉淀 DNA 含量，用染色质投入总量（相当于 1）相对应的信号进行表示。

应用缩写：

物种交叉反应性缩写：

仅供研究使用。不得用于诊断流程。
Cell Signaling Technology 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的商标。
SignalStain 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的商标。
SimpleChIP 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的注册商标。
XP 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的注册商标。
DRAQ5 是 Biostatus Limited 的注册商标。
Illumina 是 Illumina, Inc 的注册商标。