细胞色素P4501A1（CYP1A1）抑制剂佛手柑素增强宿主对多重耐药创伤弧菌感染的耐受性

目的：创伤弧菌（V. vulnificus）感染具有起病急、进展快、治疗困难等特点。细菌耐药性对临床抗感染治疗构成重大挑战，也因此成为研究课题。增强宿主感染耐受性是一种新的感染预防策略，可提高患者生存率。我们的团队初步确定细胞色素P4501A1（CYP1A1）是一个重要靶点，因为它负向调节机体的感染耐受性。本研究探讨了CYP1A1抑制剂佛手柑素相比抗生素联合治疗，在感染多重耐药创伤弧菌的小鼠存活及重要器官保护方面的优越效果。方法：采用浓度递增法诱导多重耐药创伤弧菌的产生。我们建立了C57BL/6J雄性小鼠的致死性感染模型，并评估佛手柑素对小鼠存活的影响。在C57BL/6J雄性小鼠中建立轻度感染模型，采用酶联免疫吸附法测定血清肌酐、尿素氮、天冬氨酸氨基转移酶和丙氨酸氨基转移酶水平，评估佛手柑素对肝肾功能的影响。通过肝和肾组织的苏木精-伊红染色评估佛手柑素存在下小鼠器官的形态学变化。采用细菌生长曲线和器官载菌量测定评估佛手柑素是否对多重耐药创伤弧菌有直接抗菌作用。通过酶联免疫吸附法定量血清中的炎症因子，通过实时定量聚合酶链反应检测肝和肾组织中炎症因子的表达水平，评估佛手柑素对炎症因子水平的影响。通过Western blot分析肝、肾组织及人肝癌细胞-2和人肾细胞-2细胞系中IκBα、磷酸化IκBα、p65和磷酸化p65蛋白表达，评估佛手柑素对核因子κB信号通路的影响。采用单因素方差分析和Kaplan-Meier分析进行统计分析。结果：在感染多重耐药创伤弧菌的小鼠中，佛手柑素延长了存活时间（p = 0.014），降低了血清肌酐（p = 0.002）、尿素氮（p = 0.030）、天冬氨酸氨基转移酶（p = 0.029）和丙氨酸氨基转移酶（p = 0.003）水平，并保护了肝和肾组织的细胞形态。佛手柑素抑制了血清中白细胞介素（IL）-1β、IL-6和肿瘤坏死因子（TNF）-α的表达（IL-1β: p = 0.010，IL-6: p = 0.029，TNF-α: p = 0.025），并抑制了肝（IL-1β: p = 0.010，IL-6: p = 0.011，TNF-α: p = 0.037）和肾（IL-1β: p = 0.016，IL-6: p = 0.011，TNF-α: p = 0.008）组织中炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α的蛋白表达。佛手柑素不影响多重耐药创伤弧菌的增殖或小鼠腹膜灌洗液（p = 0.225）、肝（p = 0.186）或肾（p = 0.637）中的细菌载量。结论：佛手柑素增强小鼠对多重耐药创伤弧菌感染的耐受性。本研究可为创伤弧菌的新型临床治疗策略的开发提供参考和指导。