间皮素/黏蛋白16信号在活化门静脉成纤维细胞中驱动老年雌性多药耐药蛋白2敲除小鼠胆汁淤积性纤维化和肝细胞癌的发展

背景与目的：活化肝星状细胞（aHSCs）对胆汁淤积性纤维化和癌症的贡献已有充分记录，但门静脉成纤维细胞（PFs），尤其是活化门静脉成纤维细胞（aPFs）中间皮素（Msln）-黏蛋白16（Muc16）-Thy-1细胞表面抗原（Thy-1）信号的作用尚不清楚。方法：在模拟原发性胆汁性胆管炎伴胆道纤维化的老年（16月龄）多药耐药蛋白2敲除（Mdr2−/−）小鼠中，研究了aPFs/间充质细胞在胆汁淤积性纤维化和肝细胞癌（HCC）发病机制中的作用。结果：老年雌性Mdr2−/−小鼠对胆汁淤积性纤维化和炎症更敏感，且比年龄匹配的雄性同窝小鼠发展出4倍多的腺瘤和GPC3+SOX9+AFP+ HCC。删除Msln或Muc16可改善Mdr2−/−Msln−/−和Mdr2−/−Muc16−/−小鼠的胆汁淤积性纤维化、炎症和HCC，而Mdr2−/−和Mdr2−/−Thy-1−/−小鼠表现出相似的表型，并发展为严重的纤维化和HCC。老年Mdr2−/−Msln−/−和Mdr2−/−Muc16−/−小鼠发展出更少且更小的HCC。在Mdr2−/−Msln−/−和Mdr2−/−Muc16−/−小鼠中，导管增生以及肝细胞和胆管细胞衰老被抑制，而肝细胞再生显著改善。Msln和Muc16缺陷的aPFs表现出较弱的纤维形成和炎症表型，并下调Col1a2、Col3a1、Tgfβ1、MMP3、Cxcl9、Clcl7、Lgals1和MMP2/3的表达。Msln−/− aPFs中MMP3的缺失与肝细胞增殖增加有关。基于体外研究，MMP3介导的肝HGFR（c-Met）脱落被确定为aPFs抑制HGF-c-Met诱导的AKT、ERK、p38磷酸化，从而促进原代人肝细胞增殖的机制之一。反过来，在MMP3抑制剂存在下，MMP3刺激的人肝细胞增殖得以恢复。结论：这些发现表明aPFs介导胆管细胞和肝细胞之间的串扰，调节肝细胞功能，并且aPFs中的Msln-Muc16信号对胆汁淤积性纤维化和HCC具有致病作用。Msln和Muc16可能成为抗纤维化治疗以及HCC和硬化性胆管炎患者的新靶点。