滤泡性淋巴瘤相关的BTK突变导致失活并增强AKT激活

目的：基于最近在滤泡性淋巴瘤（FL）中发现Bruton酪氨酸激酶（BTK）突变，我们研究了其功能特性。实验设计：我们在总计139例FL和11例转化型FL中发现了7%的新体细胞BTK突变，这些患者均未接受过B细胞受体（BCR）靶向药物的先前治疗。我们将野生型（WT）和突变型BTK重建到各种工程化淋巴瘤细胞系中。我们测量了工程化细胞系和原代人FL B细胞中BCR诱导的信号转导事件。结果：我们发现所有BTK突变体使BTK蛋白不稳定，并且一些突变体产生激酶死亡的BTK。PLCγ2是BTK的底物，但BTK突变体并未改变PLCγ2的磷酸化。相反，我们发现BTK突变体在抗免疫球蛋白（IG）处理的重组淋巴瘤细胞系中诱导了过度的AKT磷酸化表型。在原发性人类非恶性淋巴结来源的B细胞中，通过shRNA介导的BTK表达敲低导致强烈的抗IG诱导的AKT激活，同样，使用基于ibrutinib的蛋白水解靶向嵌合体（PROTAC）降解BTK蛋白在细胞系中也观察到类似效果。最后，通过分析携带WT或突变型BTK的原代人FL B细胞，我们在所有FL B细胞（包括所有BTK突变型FL）中检测到表面IG交联后AKT磷酸化升高。BCR交联后增强的AKT磷酸化可通过PI3Kδ抑制剂预处理而消除。结论：总之，我们的数据揭示了FL相关BTK突变的新颖且出乎意料的性质，对FL的靶向治疗开发具有直接意义。