RO4929097，一种选择性γ-分泌酶抑制剂，通过抑制Notch和ERK1/2信号在激光诱导小鼠模型中抑制视网膜下纤维化

目的：本研究旨在探讨RO4929097（RO），一种特异性γ-分泌酶抑制剂，是否能抑制激光诱导小鼠模型中的视网膜下纤维化及其相关分子机制。方法：使用雄性C57BL/6J小鼠通过激光光凝产生脉络膜新生血管（CNV）和视网膜下纤维化，RO在激光诱导后1天玻璃体内注射。在2D和3D构建中测量并量化CNV和视网膜下纤维化的大小。用TGFβ1处理ARPE-19细胞系和人原代RPE（phRPE）细胞，联合或不联合RO，以检查Notch相关分子、上皮间质转化（EMT）、细胞活力、迁移和收缩功能，以及Notch与其他EMT相关信号通路之间的串扰。结果：玻璃体内注射RO在激光诱导后第7天和第14天减少了激光诱导的年轻和年老小鼠中CNV和视网膜下纤维化的大小。此外，RO显著减弱了激光诱导小鼠RPE-脉络膜复合物中的EMT和Notch激活。在体外，TGFβ1激活了ARPE-19细胞中的Notch信号并诱导EMT，伴随EMT相关功能增强，这些均被RO抑制。RO对EMT的抑制作用在TGFβ1处理的phRPE细胞中得到进一步证实。RO阻断Notch信号可抑制ERK1/2信号；而ERK1/2抑制对Notch无影响。RO的作用不依赖于Smad2/3或p38，且Notch和Smad2/3的共抑制对EMT抑制显示出协同效应。结论：RO通过直接抑制Notch信号和间接抑制ERK1/2信号发挥其抗纤维化作用。靶向Notch信号可能为新生血管性年龄相关性黄斑变性（nAMD）中视网膜下纤维化的预防和治疗提供一种治疗策略。