如何 30 秒完成抗体标记?

Abcam 为您提供超过 45 种的一步法快速抗体标记试剂盒！Perfect！

Abcam 已于 2019 年底收购了 Expedeon（原 Innova Biosciences）蛋白质组学和免疫学业务，扩充了 Abcam 原有的产品线，新增产品线包括抗体和蛋白标记试剂盒、纳米颗粒、寡核苷酸标记以及 ATP 酶和 GTP 酶活检测试剂盒等。尤其是「一步法」抗体标记试剂盒-Lightning-Link^®系列产品极大程度的简化了抗体标记流程，是目前世界上操作最简便的抗体标记试剂盒，在全球各大科研实验室得到广泛应用。

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随着蛋白组学的深入研究，多因子检测的需求日趋增加。但很多科研人员在选择多种标记的抗体时遇到困难，发现很多时候从市面上购买不到所需的标记好的商业化一抗，而不得不选择使用二抗。因此也很难避免可能发生的交叉反应、非特异性结合以及繁琐的孵育洗涤步骤。下面比较下直接法与间接法的优缺点。

方法

优点

缺点

直接法

操作简单，结果可靠；

仅需使用一抗，检测快速；

无二抗的非特异性结合。

由于标记可能导致一抗的免疫反应性降低；

信号放大作用较弱。

间接法

一抗含有多个标记二抗可结合的表位，因而灵敏度升高，信号放大作用较强。

二抗可能发生非特异性结合；

孵育及洗涤步骤增多。

表 1. 直接法与间接法的比较

直接检测法中，标记物通过共价键直接连接到一抗上。而对于间接检测法，标记物则是共价连接到与一抗特异性结合的二抗上。间接法检测包括两步：第一步，用未标记的一抗进行孵育，抗体与抗原结合（若存在抗原），洗去未结合的抗体（一般 3～5 次），第二步则是加入标记二抗孵育（通常 1 小时），洗涤去掉未结合的二抗，然后量化结合在一抗上的标记物。在直接法中，标记物直接与一抗共价结合，因此仅需与含有抗原的样本孵育这一步骤，而且只需一次洗涤，而间接法则需要两轮孵育与洗涤步骤。直接法简化了试验的流程，降低了试验的变异性，增加了数据的可靠性。然而一抗的共价修饰可以导致抗体亲和力的改变，这种情况的出现与标记二抗带来的非特异性结合的问题相比而言，显得无关紧要。下表列举出了直接法与间接法的主要优缺点比较。

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图 1. 间接法与直接法流式染色比较。CD45RC 纯化抗体商业化购得，然后用 Lightning-Link^® R-PE 抗体标记试剂盒按流程进行标记。图中左下方流式染色结果为所购 CD45RC 纯化抗体孵育细胞，然后用 R-PE 标记二抗孵育上机检测，图中右下方流式染色结果为用 Lightning-Link^® R-PE 标记的 CD45RC 抗体, 直接孵育细胞，上机检测。图中示意图说明：CD45RC 抗原用红色显示、 CD45RC 抗体用蓝色显示、二抗灰色显示。

InnovaBiosciences 一步法快速标记试剂盒的特点：

特点	优势
操作简单：一步法标记快速: 手上操作时间仅 30 秒	节省科研时间，无需特殊专业知识和操作技能
无需脱盐、透析等分离步骤	回收率达 100%，无抗体或蛋白的损失
适用于多种下游实验	灵活性较好
冻干粉提供	环境温度运输，有效期较长
可标记 ug 级到 g 级抗体量	适用于基础科研及工业生产
近乎苛刻的质检标准	高品质，批间差小，可重复性好
可提供 50 种标记物	可用于 WB、IHC、ELISA、免疫荧光、流式细胞术以及荧光共振能量转移检测等
认可度高，已超 300 多篇 SCI 文献引用	可成功应用于多个研究领域

目前，InnovaBiosciences 可以提供从紫外到远红外光谱的多种荧光标记试剂盒。

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除经典的荧光标记试剂盒，其他特色产品还包括：

● 酶标记试剂盒（辣根过氧化物酶/碱性磷酸酶/葡萄糖氧化酶）

● 生物素/链亲和素标记试剂盒

● 纳米颗粒及标记试剂盒（磁珠标记、金属铕标记、乳胶珠子标记、金纳米颗粒标记、胶体金等）FlexLISA®系列 ELISA 套装

● 链亲合素结合物

● Protein A 结合物

● 抗体纯化试剂盒

● ATP 酶及 GTP 酶活检测试剂盒

● 亲和树脂等

产品详情请联系中国授权代理商---四正柏生物科技有限公司。

编辑： weicf 来源：丁香园

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