Pro5 五聚体特异性细胞毒性 T 细胞的理想检测工具

特异性细胞毒性 T 细胞作为患者感染某种疾病的效应细胞，想要从外周血的单个核细胞中得到她可谓是百里挑一，难度很大，但是随着生物技术的发展组织相容性复合物 (MHC) 一抗原肽五聚体給我们带来了福音，使病毒感染后的特异性细胞毒性 T 细胞快速，准确识别出来。

组织相容性复合物 (MHC) 一抗原肽五聚体 (Pentamer) 复合物是目前检测特异性细胞毒 T 淋巴细胞 (cytotoxic T lymphocytes，CTL) 最为敏感而特异的方法之一，正被广泛应用于多种病毒感染性疾病发病机制的研究以及作为临床感染转归的预测指标。组织相容性复合物 (MHC) 一抗原肽五聚体 (Pentamer) 复合物识别特异的 CTL 或者特异的 T 细胞。组织相容性复合物 (MHC) 一抗原肽五聚体 (Pentamer) 复合物在 T 淋巴细胞介导的细胞免疫反应在疫苗清除病原体方面起着重要的作用。五聚体在国内被乙型肝炎研究者广为应用。

虽然 MHC-肽四聚体也可以特异性结合抗原特异性 T 淋巴细胞，但是 Pro5 五聚体较四聚体有明显的优势。Tsai 等认为 MHC-肽四聚体检查技术可以特异性结合抗原特异性的 T 淋巴细胞，能对特异性的 CD8+的 T 淋巴细胞进行直接计数。但是外周血单个核细胞中 HBV 特异性 CTL 的数量低于 1%,TCR 与 MHC-肽复合物的结合也是一个动态的变化过程，表现在边结合边解离的不稳定状态 [1]。Hoffmann 等 [2] 认为 MHC-肽四聚体（MHC-Peptide Tetramers）对 TCR 的结合，可以导致 T 淋巴细胞立体空间变化，从而竞争抗-CD3 特异性的结合；Denkberg 等 [3] 发现 CD8 抗体可以阻断 MHC-Peptide Tetramers 与 TCR 的结合。Pro5 五聚体标记更为灵活，生物素标记的五聚体和未标记的五聚体可以自选荧光素标记，为标记的 Pro5 五聚体可以在-80℃ 长期储存，需要时使用。而四聚体是将生物素标记的 MHC 单体与荧光标记的链霉亲和素多聚体化而制成，只能已标记好的形式提供，在 4℃ 储存，效期相对较短。

如果您正在试图检测一个数量极少的抗原特异性 T 细胞群，你就会理解一个敏感、准确、并能产生重复性结果的研究工具的重要性，而这正是五聚体所能提供的。五聚体与特异性的 T 细胞受体直接结合。五聚体可以用于检测和分离仅占淋巴细胞 0.02% 的稀少抗原特异性细胞毒性 T 细胞。

[1]Altman JD,Moss PA,Goulder PJ, et al.Phenotypic analysis of antigen-specific T lymphocytes.Science,1996,274:94-96.

[2] Hoffmann TK,Donnenberg VS,Friebe- Hoffmann U,et al.Competition of peptide-MHC class I tetrameric complexes with anti-CD3 provides evidence for specificity of peptide binding to the TCR complex. Cytometry,2000, 41:321-328.

[3]Denkberg G,Cohen CJ,Reiter Y.Critical Role for CD8 in Binding of MHC Tetramers to TCR:CD8 Antibodies Block Specific Binding of Human Tumor-Specific MHC-Peptide Tetramers to TCR.J Immunol,2001,167:270-276.

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