UV法 检测质粒浓度

UV法测质粒浓度，核心是测A260和A280。A260用于核酸定量，A280用于判断蛋白污染。双链DNA浓度计算公式：A260 × 50 ng/μL × 稀释倍数。纯度看A260/A280，1.8-2.0之间较好；低于1.8可能有蛋白或酚污染，高于2.0可能有RNA污染。用NanoDrop测的话，同时关注A260/A230，低于2.0可能提示盐、酚或EDTA残留。

操作要点：用TE或无酶纯水做空白，石英比色皿或微量检测台要干净，样品稀释到吸光度在0.1-1.0线性范围内，测前混匀、避免气泡。高盐、高EDTA会干扰读数，尽量用TE或水稀释。

常见误区：UV法只能测总核酸浓度和粗略纯度，不能区分超螺旋、开环和线性质粒，也不能区分质粒DNA、基因组DNA和RNA。如果样本里RNA多，浓度会被高估。想看超螺旋比例，还是要跑琼脂糖凝胶电泳。稀释倍数别算错，空白别忘做，比色皿别用手摸光面。