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显微成像实验技巧宝典
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相差显微镜技术
相差显微镜是在普通光学显微镜上增加环状光阑、相差物镜(镜头上标有PC或PH字样)、绿色滤光片和合轴调整望远镜四种附件。倒置显微镜组成和普通显微镜一样,只不过物镜与照明系统颠倒,物镜安装在载物台的下方,光源及聚光器安装在载物台的上方。由于工作距离的限制,最大放大率为60x。一般研究用倒置相差显微镜配置有4x、10x、20x及40x相差物镜。
荧光显微镜技术
一些化学物质经短波高能光激发后能吸收并储存能量而进入激发态,当其从激发态再回复到基态时,过剩的能量以荧光的形式发射。荧光发射的特点是在接受能量后即刻引起发光,而一旦停止供能,荧光现象也随之瞬间消失。各种荧光分子有其特定的吸收光谱和发射光谱(荧光光谱),即在某一特定波长处有最大吸收峰和最大发射峰,因此要观察不同的荧光应选用不同波长的激发光,得到的荧光强度才能最大。有些物质能够自发荧光,如维生素A的红
荧光显微镜观察法
1. 细胞凋亡是指为维持内环境稳定,由基因控制的细胞自主的有序的死亡。细胞凋亡与细胞坏死不同,细胞凋亡不是一件被动的过程,而是主动过程,它涉及一系列基因的激活、表达以及调控等的作用,它并不是病理条件下,自体损伤的一种现象,而是为更好地适应生存环境而主动争取的一种死亡过程。2. 细胞凋亡有别于细胞坏死,它有一系列的细胞形态学和生物化学的改变,包括出现染色体浓缩、DNA降解、凋亡小体的形成等。在正常的
显微镜检测法
细胞凋亡发生时会出现一定的形态学特征,如胞膜有小泡生成,细胞固缩,核质浓缩,染色质凝聚,DNA降解,胞膜最终形成许多凋亡小体,然后被邻近的巨噬细胞所吞噬。
显微镜观察
一. 双手取出显微镜,持显微镜时,应右手握镜臂,左手托镜座,保持其水平位置,轻放于实验台上。检查,清洁机械和光学部分,检查有问题时,及时报告老师。 二. 低倍镜的使用 1. 对光将低倍接物镜转至镜筒下方。旋转反光镜使外来光线反射入反光镜。光线较强时,多用平光镜,较弱时用凹面镜。若光度不够,可提高聚光器,开大光圈。 2. 调节焦距从侧面注视物镜,转动粗调节器(大螺旋)使镜筒缓慢下降,直至低倍镜
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