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        显微镜检测法

        相关实验:显微镜形态学观察细胞凋亡

        最新修订时间:

        原理

        细胞凋亡发生时会出现一定的形态学特征,如胞膜有小泡生成,细胞固缩,核质浓缩,染色质凝聚,DNA降解,胞膜最终形成许多凋亡小体,然后被邻近的巨噬细胞所吞噬。

        材料与仪器

        步骤

        利用光学显微镜,借助相应的染色方法,可以观察细胞凋亡时会出现的一系列形态特征。常用的染色法包括台盼蓝、吖啶橙 / 溴化乙啶(AO/EB)、Giemsa 和 HE 法等。在光学显微镜下可以观察到核固缩、质浓缩和凋亡小体等典型的凋亡现象。

        电镜形态学观察法是一种比较经典、可靠的方法,被认为是确定细胞凋亡的金标准。电镜下凋亡细胞表现为染色质凝集、核浓缩、核裂解、胞浆收缩和胞膜具有发泡现象及凋亡小体出现等。

        注意事项

        形态学方法的不足之处是它只能定性,不能有效的定量,而且判定时难免存在主观性,故常作为其他检测方法的基础。

        常见问题

        细胞发生凋亡或坏死,其细胞DNA均发生断裂,细胞内小分子量DNA片断增加,高分子DNA减少,胞质内出现DNA片断。但凋亡细胞DNA断裂点均有 规律的发生在核小体之间,出现180-200DNA片断,而坏死细胞的DNA断裂点为无特征的杂乱断,利用此特征可以确定群体细胞的死亡,并可与坏死细胞区别。 

        来源于《细胞凋亡检测的方法的研究进展》生物技术通报杂志。

        来源:丁香实验

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