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蛋白纯化实验宝典
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问
DTT特性在蛋白纯化和保存中有什么作用？
bamboopiggy
Cys存在于多种蛋白中，且其中的-SH常作为活性中心发挥作用，或者，两个-SH连接成二硫键，是维持蛋白质高级构象重要桥梁。-SH具有很强的还原性，溶液被溶液中的溶解氧或其它氧化物氧化，从使蛋白失去活性。所以，在蛋白纯化 和保存时，在溶液中加入一定量的DTT，以免蛋白-SH被氧化而失活
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问
蛋白纯化出现沉淀怎么回事？怎么解决呢？
天一湖医者
首先需要确定沉淀的诱因：pH值处于等电点附近、高盐下析出还是样品结构的稳定性，当然还有可能是HCP在作祟？第一种和第二种就比较简单，调整pH值或者盐浓度；第三种情况的话就需要做一些缓冲液的筛选以及添加剂的筛选；HCP的话就考虑增加去除HCP的淋洗工艺
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6051 围观
问
蛋白纯化实验前需要先做好哪些准备？
dxy_gwrp7ndq
对于微生物，应注意它的生长期，在微生物的对数生长期，酶和核酸的含量较高，可以获得高产量，以微生物为材料时有两种情况： （1）得用微生物菌体分泌到培养基中的代谢产物和胞外酶等； （2）利用菌体含有的生化物质，如蛋白质、核酸和胞内酶等。植物材料必须经过去壳，脱脂并注意植物品种和生长发育状况不同，其中所含生物大分子的量变化很大，另外与季节性关系密切。对动物组织，必须选择有效成份含量丰富的脏器组织为原材料
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