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问
花板无梯度背景高是怎么回事？
丁香实验
在完成所有实验步骤进行底物TMB溶液显色后，酶标板中的孔有颜色但没有梯度，背景也可能较高，。出现该现象的可能原因：底物溶液TMB未置于阴凉避光处保存，实验前溶液已经变蓝。孵育温度过高或者孵育时间过长，发生了较强的非特异性吸附。没有按说明书要求洗板，特别是洗板时洗涤液的量少加了。加样时没有换枪头造成交叉污染。花板现象：低浓度或者低活性的包被抗体或者检测抗体，封闭不足导致的本底不稳定，洗板不充分，包被
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问
显色弱灵敏度低？
丁香实验
在完成所有实验步骤进行底物TMB溶液显色后，酶标板中孔的显色比较浅，即只有微弱的信号呈现。出现该现象的可能原因：产品过有效期，试剂没有按规定进行适当的保存。试剂，标准品或者样品在使用前没有平衡到室温。少加了试剂的量或者加入试剂的稀释比例不当。洗板或者加样过程中，酶标物受污染失活。孵育时间和孵育温度未达到实验要求。洗涤液稀释倍数不符合要求，洗板次数过多，洗板冲击力过大，洗板浸泡时间过长。底物溶液TM
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问
出现白板现象是怎么回事？
丁香实验
在完成所有实验步骤进行底物TMB溶液显色后，酶标板中所有孔的颜色均为无色，即无信号呈现。出现该现象的可能原因：试剂已过保质期，不同批次稀释液交叉使用。错加漏加检测A，检测B或者底物溶液TMB。洗板或者加样过程中，酶标记物被污染失活，稀释液中含有酶抑制剂如叠氮呐等。配置稀释液的蒸馏水可能被污染。洗涤液是浓缩型的，没有按比例进行稀释。酶标记物的活性和效价比较低。溶液的PH值不正确，一般稀释液的PH值应
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问
研究人血清中的一个蛋白，目前正在制备单抗。请问在用Elisa检测的时候用什么做标准品好？如果就用合成的重组蛋白是否合适？
丁香实验
首先回答你标准品这个，既然称之为标准品那么就可以作为标准的物质，那么就一定具有一定的溯源性。就实际情况来讲你用重组和天然的都可以，因为这两种在商品化Elisa试剂盒中都有使用。那么基于你这个问题再深入聊聊。首先我们分为两类：一是你想做个Elisa检测仅仅用于你项目或者论文的一部分；二是你是准备做商业化产品。第一种情况，你只需要大致做做，用重组就可以。不用深究；第二种情况，这种情况要求你论证更充分。
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问
ELISA检测时，如何排除其他抗体干扰？
丁香实验
就问题来讲我我认为是这样的体内的Ig的不同形式其实是存在在免疫的不同时期的，或者我们理解为半衰期不同。那么最后起到作用主要还是IgA，其他的都比较少。那么你想排除干扰，这个一般是在你产品的检测系统上下功夫。比如你二抗的特异性等。纯粹去除的，并且简单可行的我没遇见过。
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