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花板无梯度背景高是怎么回事?

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在完成所有实验步骤进行底物TMB溶液显色后,酶标板中的孔有颜色但没有梯度,背景也可能较高,。 出现该现象的可能原因: 底物溶液TMB未置于阴凉避光处保存,实验前溶液已经变蓝。 孵育温度过高或者孵育时间过长,发生了较强的非特异性吸附。 没有按说明书要求洗板,特别是洗板时洗涤液的量少加了。 加样时没有换枪头造成交叉污染。 花板现象:低浓度或者低活性的包被抗体或者检测抗体,封闭不足导致的本底不稳定,洗板不充分,包被板子的问题。
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