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问
为什么 Western Blot 的条带向两边扩散?
larixa
你的胶是失败的,胶的比例有无问题,微波炉加热是否充分,趁热倒胶时是否均匀,冷却凝结时是否静置,冷却时间是否足够。都可能出现小问题。从你的叙述来看,你的胶可能不止一处存在问题。先不要浪费你的样品,先研究一下怎样做出能用的凝胶。
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问
请问裂解细胞进行检测,最少多少动物量就可以完整检测一次
月亮先生
我用七八万的目的细胞群,也能做出荧光定量的实验。就是出峰可能晚了一点
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问
转膜内参不是很清楚该怎么办?
糖guo
也可以考虑放两张膜来转
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问
神经瘤细胞能直接放液氮罐冻存吗?
angell_202
神经瘤细胞不能冻液氮罐吗?为什么?如果是-80度直接放液氮罐,如果现准备冻存,按冻存步骤来。
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问
有用胎盘组织做RT-PCR的吗?
yhy_yun
你可以试试其他内参,例如U6等,胎盘组织和人体其他组织的成分是不一样的。
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问
我用多聚赖氨酸包被了,还是脱片很严重,请问有好的解决方法吗?
丁小燕
只有在用PBS洗涤时要轻柔,每一步都要轻柔才行!
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问
细胞免疫荧光用 4% 多聚甲醛固定,1% BSA 封闭,这两步可以不要吗?省去会有什么影响?
stellaff
“加荧光标记抗鼠抗体(第二抗体)工作液20ul,混匀振荡置4℃/30分钟(时间不能超过)。”请问这步必须是4℃/30分钟吗?时间不能超过,如果超过了会有什么影响?” 二抗不一定就是4℃ 30分钟,我们经常采用室温下避光孵育1小时,这样也可以得到较好的效果。细胞免疫荧光是需要固定的,根据目的蛋白的不同可以选择多聚甲醛或者丙酮,一般固定20分钟。封闭也是需要的 可以减少非特异性背景。
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问
beta-actin条带灰度一致,但是宽度不一致?
我是金博士
说明上样量不均匀。
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1647 围观
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问
请问大家:我扩增的时候出现两个峰,是不是引物的问题?
我是金博士
不一定,也有可能是引物设计的不好,可以提高下退火温度再看看
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1103 围观
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问
请问标注的 primer B 和 C 一般需要多长的片段呢?
我是金博士
这个还是比较容易的,你要考虑下多设计几对引物,你可以搜索下overlap PCR引物设计注意事项,蛮多的。
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问
冻存的细胞可以先在-80°冰箱放几天再移入液氮吗?
我是金博士
理论上市不太有影响的,最好还是按要求哦
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问
sds-page
我是金博士
煮过就没有问题了,已经变性了呀
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问
为什么我的琼脂糖电泳跑胶总是出现笑脸或者皱眉条带?
我是金博士
不知道是啥笑脸图?如果说条带不均一,那很大程度上是配胶不均匀。我们一般都是微波炉中高热加热
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问
如何测定特定细胞的周期时间?
ljjl8310
没有诀窍吧?只能每天进行检测吧?
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1666 围观
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问
为什么经过酶切过后胶回收分子量变大了?
3065 围观
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问
为什么我的浓缩胶开裂了(导致样本渗入凝胶内)?
过年好
上样的时候,把玻璃板和胶之间撑开了,所以样品会渗到玻璃板和胶之间了。
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问
新手求助啊 提出蛋白 然后呢。然后呢
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问
分子量27kd的 NGF的显色时间
875 围观
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问
山羊抗人的单克隆抗体可以直接注射到小鼠体内吗?
我是金博士
山羊抗人的单克隆抗体,这个是二抗,主要用来结合一抗的,跟你描述的不一样。
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问
WB做出来总是有杂带并且mmp-2带很细很细背景很高很高不知如何处理?
我是金博士
如果杂带不影响主带就没问题,WB中没有杂带的情况是很少的。
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