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实验问答

28,859,236 科研人在看

问请问如何提取 IgAN 患者血清中的免疫复合物？

云天昊

离子交换层析法提取IgG　　常用的离子交换剂有DEAE纤维素或QAE纤维素，以QAE-Sephadex最为理想，DE22、32、52也可应用。取QAE-SephadexA25或A50经酸处理并在0.05mol/LpH7.5～8.6的磷酸盐缓冲液中平衡，将水分抽干，称湿重Ig加于10ml血清中，在室温30min后，离心或过滤除去离子交换剂。上清液再如此处理一次，即获得较纯的IgG。

1 回答1948 围观

问DNA 提取有杂带，有哪些办法可以提取得更干净？

wangyy1990

胶回收即可，一般我们实验室是这么弄的，简单粗暴有效率。

5 回答6922 围观

问为什么 WB 未显影？

木木的世界

转膜的时候，一张膜的电极放反了，就会导致蛋白没有转到膜上。

7 回答3230 围观

问为什么要使用无血清培养基？

JMZ贝雷帽

避免细胞本身的增值对实验造成的影响

2 回答5751 围观

问umr-106 细胞培养结果完全不能用，到底是为什么呀？

wangyy1990

是的，“如果血清里里不含你药物的成分，且不和你药物相互作用，是可以加血清的。”。我们一般也是1%的血清，后期不加血清。

3 回答2755 围观

问内参结果不均一的原因？

傲气的鸿雁

可能是你蛋白浓度测得不准，导致你加样误差太大。

2 回答2648 围观

问大鼠平滑肌细胞培养，细胞不贴壁了是什么原因？

ptosir

你的细胞出现了比较明显的形态变化，有些变得更像上皮组织细胞了，如果不是细胞老化或细胞株本身有问题的因素，可能还是培养条件和培养方法的问题。说说你的具体培养方法吧

2 回答1987 围观

问为何我提取组织 DNA 后，DNA 的纯度很低？

我是金博士

可以多管浓缩，最后过柱子的时候，把很多管的都集中到一管。

1 回答4382 围观

问为什么 WB 实验的目的条带总是多条？

ptosir

可能性1.你曝光的时候胶片或膜之间发生了轻微的错动；2.蛋白有部分降解；3.抗体与杂蛋白有非特异性结合，恰好杂蛋白分子量和目的蛋白分子量相近；4.蛋白出现了部分降解；如果以上可能性都排除了的话，恭喜你，很有可能发现了目的蛋白的蛋白修饰条带。当目的蛋白在细胞内有磷酸化、乙酰化等修饰存在时会产生卫星条带。

1 回答3922 围观

问PM是一种什么毒株？

云天昊

PV是减毒毒株，pm为固定毒株

1 回答1381 围观

问求助western blot非特异条带非常多

hw26904636

我感觉抗体原因很重要。封闭1个小时应该够了。一抗孵育选择4度摇床过夜可以减少非特异性的表达

1 回答2164 围观

问急需 VE1 抗体，哪里有？急！

1243 围观

问如何从悬浮细胞中提取蛋白质？

云天昊

将细胞悬浮液收集后先离心，然后加裂解液裂解

1 回答3677 围观

问求问刚出生胎鼠的膝关节部位软骨如何取材？

danieldan08

胎鼠太小了，不好取材，直接酶消化好了

1 回答3378 围观

问密度梯度离心里 Conc.6% 是什很么意思？

clujyh430

分离液的浓度为6%,这个是以前的产品，sigma有最新的

1 回答1961 围观

问组织培养培养基

2109 围观

问Herceptin 发酵后为什么抗体碱峰过高？

1553 围观

问怎么提取细胞培养基中的分泌蛋白？

1952 围观

问悬浮细胞复苏后培养 2.3 天会出现小黑点会是什么原因？

云天昊

保存的细胞有问题吧

1 回答2757 围观

问培养鸡胚成肌细胞第四天绝大部分细胞都死了是为什么？

yasha110

我虽然没养过，但是师兄一直在做，他的经验就是鸡胚胚龄很重要，大龄的胸肌分化过度，不好消化。

3 回答2206 围观

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