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qRT-PCR结果如何用SPSS软件分析差异?
bamboopiggy
你只要把ct拿到按照deltadelta ct法的计算公式,得到基因的拷贝数,用excel也能算
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问
植物中看一个磷酸化酶对下游基因是稳定还是降解,如何看上样量是一样的
bamboopiggy
植物应该也有内参吧?只要内参齐就可以啊,然后看你目的蛋白改变的趋势
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问
RUNX2WB检测中实际检测条带与预测不符
bamboopiggy
看抗体说明书,好多蛋白都与预测位置有差异,先看说明书,不行跑全膜,只要有趋势就可以
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问
RUNX2和PGC1 alpha在WB检测中
bamboopiggy
1.确定蛋白没降解。2.找个阳参,确定抗体好使
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问
细胞凋亡检测试验对照组的设置
bamboopiggy
引起凋亡的因素有好多,跑流式,其实不用阳参,只要在右下象限的就是早凋的
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问
如何分离到纯的神经元细胞?
天一湖医者
实验材料 母鼠试剂、试剂盒 BSS仪器、耗材 无菌器械显微镜实验步骤 1. 杀死怀孕 18 天母鼠(常用过量 CO2 使其窒息),用无菌器械取出胚胎,放在无菌的培养皿中。 2. 取下胚胎的头,放在盛有 4 ml 不含 Ca2+ 和 Mg2+ 的平衡盐溶液(BSS)的培养皿中。 3. 从头颅骨上取下脑,放在 35 mm 培养皿中的 BSS 液滴上,培养皿中半装满 Paraplast(Sigm
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问
qPCR引物做預實驗融峰曲線是單峰但是ct值比較高,樣本cDNA-20放置半年,是不是應該考慮樣本的問題
bamboopiggy
对,cdna虽然很tough但是如果-20放半年还是会有降解的。ct值会变高
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问
磷酸化蛋白的 WB 检测怎么操作才能避免去磷酸化?
bamboopiggy
在lysis里加入蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂
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问
DNA损伤指标(如gamma-h2ax)的foci如何快速准确的计数?
bamboopiggy
应该有图像处理的对应软件,如果没有,可以用ps里面那个点点的功能,最后会告诉你数值
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问
蛋白质溶液-20℃保存一段时间溶解后出现混浊
dxy_gwrp7ndq
长期保存可放-20C,但前提是添加50%甘油或冻干,否则冻融也会导致蛋白失活!
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问
为什么在做菌落PCR鉴定的时候阴性对照(模板为水)也能P出条带?
zj佐罗
可能存在污染的风险。建议重新做,排查是否是试剂问题还是水的问题。
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问
细胞如何做多个抗体的免疫荧光染色?
bamboopiggy
可以同时染,如果二抗不一样的话,还可以把最明显的先染,最后染表达量低的
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问
用组织做免疫荧光,最后荧光拍照时组织上那些斑斑点点的非特异性染色怎么去除?
bamboopiggy
都封片了,没法去除了,下次做的时候,降低一下抗体浓度,或增加洗涤次数试试
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问
如何确定原核表达出来的蛋白质是我想要的蛋白呢?
bamboopiggy
用你目的蛋白的抗体,跑个wb不就可以了吗?
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问
检测到的条带分子质量与预测的不符?有哪几种可能的原因
小米粒e
可能基因有污染可能是非特异性扩增,引物特异性不高,退火温度不理想都会这样。
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问
秋水仙素处理为何可以诱发多倍体形成,除此之外还有什么替代品?
bamboopiggy
秋水仙碱能抑制有丝分裂,破坏纺锤体,使染色体停滞在分裂中期。紫杉醇也可以诱导
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问
关于免疫印迹实验的相关问题
小米粒e
注意一下跑胶时候的电压以及时间,跑的时候经常看着点。转膜的时候记得缓冲液新配置
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问
WB目标带是空白,周围有背景
bamboopiggy
因为你蛋白浓度太高了,把发光试剂很快消耗光了,来不及拍照,可以试试降低蛋白浓度。
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问
家人们,做实验的时候,如何才能更好地避免引物被污染啊?
bamboopiggy
在配引物mix的时候,不要碰样品,把引物配好,都收起来只留mix,分装以后,再去碰样品
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513 围观
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问
我做coip实验用的是碧云天的兔IgG,效果不好。请问大家用的都是什么牌子的IgG啊?
小米粒e
我用的也是santa cruz。
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