• 我要登录|
  • 免费注册
    |
  • 我的丁香通
    • 企业机构:
    • 成为企业机构
    • 个人用户:
    • 个人中心
  • 移动端
    移动端
丁香通 logo丁香实验_LOGO
搜实验

    大家都在搜

      大家都在搜

        0 人通过求购买到了急需的产品
        免费发布求购
        发布求购

        细胞增殖检测细胞浓度问题?

        相关实验:细胞增殖检测:MTT 法

        user-title

        心细北方

        做MTT时,96孔培养板细胞浓度多少合适,不至于营养竞争?

        wx-share
        分享

        4 个回答

        user-title

        天一湖医者

        有帮助

        细胞的浓度并不需要那么精确,关键是接种于每孔的细胞数就大致处于同一水平。比如做MTT,起初用的细胞浓度为5000/ml,每孔100ul,培养3天观察,发现细胞数太少,各孔OD值反面难于比较。后来换用 10000/ml,结果就很好。当然细胞数也不能太多,这其实取决于你细胞的生长速度,生长快的细胞,可接种浓度低点。这主要是使细胞增殖率不致受处理因素之外的其他因素影响,比 如接触抑制,营养竞争。总之,做MTT时细胞数应较低,目的就是为了排除其他因素的影响,以使每孔细胞生长情况尽可能地反映出处理因素的影响。细胞接种的浓度和你的实验目的、要求、细胞种类、处理因素的特殊要求都有关系。没有简单的,每孔接种多少的一个标准。当然,可以用楼上建议的浓度开 始摸索。同时,注意肿瘤细胞核正常细胞的生长数度也不一样,前者生长快,后者慢,细胞数的量也有讲究。到底多少合适,得根据你的实验具体要求来摸索。我做 b16转染时,因为脂质体要求细胞融合度为30%-50%,曾经没孔接种过300-500个细胞,效果非常好,

        user-title

        dxy_gwrp7ndq

        有帮助

        悬浮细胞通常是4x10 4/ml ,贴壁细胞通常是5x10 4/ml

        user-title

        未来9

        有帮助

        选择适当的细胞接种浓度,常用10000个/ml。一般情况下,96孔培养板的一内贴壁细胞长满时约有100000个细胞。但由于不同细胞贴壁后面积差异很大,因此,在进行MTT试验前,要进行预实验检测其贴壁率、倍增时间以及不同接种细胞数条件下的生长曲线,确定试验中每孔的接种细胞数和培养时间,以保证培养终止致细胞过满。这样,才能保证MTT结晶形成酌量与细胞数呈的线性关系。否则细胞数太多敏感性降低,太少观察不到差异。

        user-title

        bamboopiggy

        有帮助

        先做预实验,不同的细胞不一样,并且看你是做growth curve还是药物抑制

        ad image
        提问
        扫一扫
        丁香实验小程序二维码
        实验小助手
        丁香实验公众号二维码
        扫码领资料
        反馈
        TOP
        打开小程序