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问
请问克隆引物和qPCR引物有什么区别,可以用qPCR引物做基因克隆用吗?
bamboopiggy
看你的实验目的,克隆的引物一般是在基因的起始和结尾设计,但是qPCR的引物的产物一般是50-200bp左右的,如果你要克隆50-200bp左右的片段,就可以用qPCR的引物。
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问
请问sgRNA化学合成靠谱吗
汤姆卜丽波
如果你需要在几天内进行多个sgRNA的转染,以此筛选某个基因重要功能靶点或者需要快速敲除多个基因时;涉及在细胞/基因治疗领域中的CRISPR解决方案时;涉及的细胞是原代T细胞、造血干细胞或祖细胞的基因编辑选择它比较合适
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问
PCR求助
bamboopiggy
你这不是正常的melt curve,数据不能用了。找一下原因,是试剂还是机器的原因。
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问
UCSC验证别人已发表文献的引物出现no match,什么原因?
bamboopiggy
是不是方向问题?有的软件要求reverse方向的引物要反向互补才能对比上
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问
讨论:这些不完全透亮的是死细胞吗?
秋秋欣欣
细胞是具有通透性的,这些发亮的不具有通透性的细胞是死细胞
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问
###大鼠肝移植
秋秋欣欣
门静脉套管和下腔静脉套管比较合适。
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问
OT-1和OT-2小鼠的鉴定
bamboopiggy
OT-1小鼠是体内CD8+T特异性识别OVA,OT-2小鼠是体内CD4+T特异性识别OVAOT-1 的原始参考文献,Enhancement of Adaptive Immunity by the Human Vaccine Adjuvant AS01 Depends on Activated Dendritic Cells 以及另外一篇文献:Quantitative PCR for detecti
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问
求助|大家有用聚乙烯醇自己配抗淬灭封片剂的吗,请问所需溶剂及比例
bamboopiggy
配方包括:聚乙烯醇、甘油、重氮双环辛烷、金属离子螯合剂、碳酸盐缓冲液、Tris‑HCl缓冲液、防腐剂、水。这个现在很便宜,建议直接买了省事。
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问
THP-1诱导后消化
汤姆卜丽波
试试用胰酶加0.3-0.5%的EDTA,消化个七八分钟,拍一拍
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问
酶切实验中如何避免假阳性
dxy_g9y5gije
首先,多做几个重复,这样容易发现是否出现假阳性其次设置对照,未酶切片段和酶切片段同时跑胶,应当存在明显差异
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问
求助:响应面分析方法实际值与预测值之间的差异如何理解?怎么设计试验减少二者差异?
秋秋欣欣
响应面分析方法是利用实验设计、建模等寻找最优的最优值,与实际值之间肯定存在着一定的差异。要减少二者差异就需要确定最优条件,寻找最优区域。
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问
想用转铁蛋白做动物实验,请问一下人源的或者牛的转铁蛋白能用于小鼠的实验吗?
汤姆卜丽波
可以的,有很多实验都是这样操作的
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问
请问进行乳腺细胞添加单一氨基酸试验时,细胞培养时间怎么确定?什么时候收集细胞?
汤姆卜丽波
可以做一个预实验,按照细胞密度梯度添加,还要区分状态,时间不准确,准确的细胞密度和状态,找到最适値
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问
能不能分享一些动物肠道吻合的经验和技巧?
汤姆卜丽波
1、要保证吻合口处无张力,吻合肠段的肠袢应游离足够长度。2、要保证吻合口有良好的血液供给,应可清晰看到血管分支供应吻合口;肠管在无肠钳夹闭的情况下,肠管断端切缘应有活动性出血;肠管断端处的肠系膜不可分离过多,一般距断端1.0cm以内,否则易影响吻合口的血液供应。3、吻合口处的缝合过稀或打结过松可导致吻合口不愈或吻合口漏。4、肠壁边缘内翻不宜过多,以防止造成吻合口狭窄。5、术中应注意无菌操作, 做好
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问
用作靶向集团的抗体怎么选择啊?救救孩子
秋秋欣欣
最好是单克隆抗体,然后能与靶标特异性的结合。
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问
天然产物生物合成的问题
汤姆卜丽波
同位素示踪法标记,结合生物信息学、分子生物学、分子遗传学以及生物化学等方法来研究天然产物生物合成的精细过程,除了将天然产物结构与相应生物合成基因相对应,还包括阐明生物合成的调控机制。还可以应用基因组测序。
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问
水稻OsMAPKKKK基因预测定位在核
秋秋欣欣
杂交定位一下看具体是在哪个位置
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问
下面图分别是什么意思?感谢
汤姆卜丽波
左右两边是一个意思两种图示,都是突变的定量,串珠的位置及大小表示突变率,右图看不同颜色区域的面积
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问
细胞内硝酸根离子的原位显示
大草原的小灰驴
有细胞的硝酸银染色法,反应过程需要在避光条件,染色之后直接镜检或者瑞氏染色法复染后镜检。细胞内的核仁组织区染成黑色。
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问
组织冷冻之后想做流式有些疑问?
镜泽BioLab
做不了流式,流式是活细胞染色。病理染色也不能做,细胞内的水分形成冰晶破坏细胞形态。只能做WB和PCR
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