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求助,WB背景黑,条带淡怎么解决
Eason老歌迷
现在都夏天了,你减少二抗孵育时间看看。我之前也遇到过这种情况。
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问
使用鸡毒支原体作为病原菌,细胞细菌污染。
bamboopiggy
你用支原体清除剂,或者是:阿奇霉素、强力霉素,或有时左氧氟沙星或莫西沙星,试试,青链霉素对没有细胞壁的细菌没有作用的
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问
脑立体定位注射如何确定深度
府宅
在翻到该核团所在的页面,多是冠状切面,核团的长度要看所占的页数(右下角有一个Bregma值,用第一页的这个数值减去最后一页的这个数值就是核团的长度)。根据这些数据估算核团的长度。核团的宽度、高度可直接由图上的坐标读出,即在各页面上挑选一个横截面最大的,在核团中心点一点,经这个点划水平线和垂直线,水平线和纵坐标的交点就是核团的深度坐标(颅骨下多少mm),垂直线和横坐标的交点就是核团左右坐标(中线旁开
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问
求做western和IP裂解蛋白的注意事项(小分子蛋白10kd左右),因为一直IP不下来,input有时候也无条带……
Eason老歌迷
裂解蛋白,一定要在冰上进行,因为有的蛋白很容易降解,尤其是现在天气热,你搁常温一会就降解了
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问
细胞来源,如何才能确定?各位前辈:本人预涉及胃癌细胞实验,手里有几株细胞,可不知细胞具体 来源,不知如何查询?
bamboopiggy
MKN45 established from the poorly differentiated adenocarcinoma of the stomach (medullary type) of a 62-year-old woman MKN-1 (mutant P53):Gastric adenosquamous carcinoma ,Derived from metastatic site:
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问
细胞转染后出现了很多小点点,是凋亡吗?
bamboopiggy
出现的黑点可能是细胞碎片,可以在收样的时候,用pbs洗掉
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问
寻找多个序列的直系同源序列,如何精准查确?
Eason老歌迷
同源序列的查找,顾名思义就是我们要找的是和这个序列相似的序列,比如拟南芥,我们找到这个植物的一个序列,那就是把一个数据库当作比对的参照物,把这个一个拟南芥的序列与这个数据库进行比较,查看那些物种的序列和这个序列相似,这个是线上的方法,我们直接利用ncbi中的官网的方法比较blast。
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问
关于TGF-BETA/SMAD通路的相关问题?
府宅
可使用加减三甲散及其虫药可使SMAD表达降低
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问
STR引物设计如何开始呢?
天一湖医者
引物以18~30bp为宜;引物中C+G含量宜在50%左右;引物内部和引物之间不应含有互补序列;引物的碱基顺序与非扩增区域的同源性应小于70%;引物的3’末端与模板DNA一定要配对,但末端没有严格的限制,故引物设计时可在5’末端加上限制性内切酶位点和/或启动密码ATG等;引物合成后必须纯化以去除合成产物中的不完整序列、脱嘌呤产物、碱基修饰链等“杂质”;引物的终浓度一般为0.2~0.5μmol/L,过
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问
蛋白分子量62-21kd,忽然发现一直用的PVDF膜是0.22μm的,对结果有影响吗?
秋秋欣欣
出现哑铃状的结果图最可能是你胶的问题,0.22的膜转62的蛋白完全没有问题
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问
蛋白表达不出来
bamboopiggy
先提一下质粒送测序,确定你的质粒还在
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问
目的基因ct和外参ct
天一湖医者
可以用,不同基因之间表达量差异很大,可达上千甚至上万倍之差,所以CT值差10以内属正常现象。
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问
重组腺病毒抗原表达鉴定
秋秋欣欣
是不是病毒量不够,没有转染成功啊
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问
酒精肝小鼠死亡急求各位大佬给点建议
bamboopiggy
你造模成功了么?是不是酒精肝引起的肝性脑病?
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问
biolegend的Fixation Buffer可否用于表面染色后的细胞保存?
bamboopiggy
paraformaldehyde 是多聚甲醛,如果你的biolegend的fixation buffer成分也是多聚甲醛,可以用的
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问
ImageJ连续处理图片,每张图都需要Calibrate吗?
bamboopiggy
需要啊,因为每张图的底色可能都不一样
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问
SOC培养基已经混合好的粉末如何灭菌
dxy_gwrp7ndq
可以用0.22um滤器过滤除菌。
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问
请问各位大佬知道为什么我的PMB单独加到培养液里RAW细胞没有反应,但是跟我的一个蛋白混合后加就会引起细胞的炎性反应吗?
天一湖医者
有可能是血清浓度问题,或者是培养液有问题。,
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问
跑WB的时候 内参总是特别粗 还喜欢连在一起 请问怎么回事?
bamboopiggy
降低内参的抗体的浓度,以及二抗的浓度
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问
想知道同源重组对于链霉菌有什么特殊需要注意的吗
府宅
用硫链丝菌素抗性基因作为筛选标记,可以简单直接地获得可能发生同源重组的菌株,以便进一步从分子水平上用杂交进行验证
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