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问
CasRx系统引物设计
土井挞克树
1.sgRNA设计1.1设计原则1) II型CRISPR系统(SpCas 9)的sgRNA 靶点一般为20nt2)sgRNA序列的碱基组成:基因特异的sgRNA 模板序列位于PAM 序列前,PAM序列的特征为NGG (N可以为任意核苷酸)3)sgRNA的序列应避免以4个以上的T结尾,GC%含量为30%-70%4)sgRNA的序列与On-target和Off-target的匹配数都应尽可能的高。5)
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问
wb出问题了
土井挞克树
可能是非特异性结合,或者你的样品中有蛋白酶
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问
有用过PA棕榈酸诱导c2c12胰岛素抵抗吗?查文献,说的是500-700mM,大家都是怎么做的?
土井挞克树
可以做,建议选择700m,比较好成模。
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问
求助三种DNS试剂区别
土井挞克树
推荐你看这片张海健的文章,里边说明的很详细。
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问
想咨询一下各位大佬,从植物中提取的蛋白多肽怎么能提高它的浓度了,
土井挞克树
会破坏蛋白结构,不建议这么做。
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问
植物细胞悬浮培养求大佬解答
土井挞克树
有可能是培养温度的影响,尝试改变下
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问
索莱宝的LPS粉末
土井挞克树
最好不要,与试剂要求不一样会影响实验。
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问
请问这是真菌还是死细胞呀?
土井挞克树
看境下影像,像是真菌污染考虑清理。
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问
求助脑HE切片怎么看,这些细胞和组织正常状态等,有学习资料可以提供吗?
土井挞克树
HE染色是一种组织病理的染色方法,通过这个染色可能明确的区分出组织以及细胞的结构。HE染色,既是苏木素伊红染色法,是最常用的染色方法。在质量较佳的HE染色切片上,各种组织或细胞的一般形态及特点都可以观察到。苏木素染液为碱性,主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色;伊红为酸性染料,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。
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问
自己做的兔抗多克隆抗体,在目的条带的位置出现非特异性条带怎么解决
土井挞克树
这样就需要调高筛选精度,尽量把非特异性条带筛选掉
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问
实验设计
土井挞克树
最好是这样,这样严谨一些,看一下蛋白表达
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问
Caco2单层膜建立
土井挞克树
需要检测系数,如果数据可以的条件下可以用。
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问
细胞周期
土井挞克树
吹打时间尝试延长一下,把粘连吹打下
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问
细菌细胞共培养如何做CCK8?
土井挞克树
还是推测是操作中的问题,排除材料的问题可能是时间,温度等影响
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问
脂多糖 caco-2 cck8
土井挞克树
不正常。一般这个浓度已经足够诱导了
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问
血液或尿液中造影剂的含量可以测定吗?
土井挞克树
可以的,可以测量半衰期以及清除率等
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问
CHO细胞培养及转染效率低的问题
土井挞克树
实验室微生物系统怎么样,检查一下培养基
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884 围观
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问
qPCR标曲低浓度曲线分不开,模板超声没用
土井挞克树
建议更换引物探针,高重复性容易导致曲线不明显
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问
我细胞状态挺好,但是就是不长并且在瓶子上还死了一些(sf21,悬浮细胞,27℃220rpm培养的)
土井挞克树
可以在显微镜下观察是否有污染,这种情况可能有杂质污染
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问
磷酸化和总蛋白变化趋势一致
土井挞克树
老外的文章,总蛋白和磷酸化蛋白一般都会做WB。对结果的解读,以下意见,供参考:(1)内参一致,总蛋白不变,磷酸化蛋白表达升高或者降低:说明经过某种处理(外部操作,抑制剂,上游蛋白基因敲除或者siRNA等)后,对该蛋白(及其代表的信号通路)的活性产生影响(促进或抑制);(2)内参一致,总蛋白升高或者降低:说明经过实验组的处理方法能够诱导总蛋白的表达或者降解。至于磷酸化活性的变化,和总蛋白的表达高低有
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