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组织wb之怪异
balalaLy
有没有可能是前两个样品含血液量多,混进了过多的白蛋白?
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求助:Wb条带求大神解答
土井挞克树
可能是洗膜的时间和次数不够,延长洗膜时间。
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问
Marker跑成U字型,以及酶切结果
balalaLy
不止marker,其它条带也是u字型,应该是你的胶的问题。第五道的单酶切你对照一下你的质粒的大小是不是对应的,是的话就是这个单酶切成功了,第4道单酶切是不是这个酶不止一个酶切位点?而且切得不完全,第6道符合前面说的4、5的问题,第7道质粒比其它酶切过的线性DNA跑得快,也是对的。
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问
小鼠皮下肿瘤拍照问题
juyue2010
有标尺,一组一组拍照,可以对比
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问
老鼠胎盘
Dr_劉医生
应该是副胎盘,胎盘小叶发育不全导致的,主要你的崽鼠数量够,没多大问题
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问
小鼠C57的mcao MCAO模型
Dr_劉医生
线栓进血管之前得自己做好进栓深度标记的,不是都按照阻力来判定是否还能进,别出现严重缺血还进线
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问
求助|DSS造急性结肠炎成模标准
balalaLy
有一个评分表的,要综合体重、大便形状,血便的情况,一般3%的浓度7天体重和血便情况都会比较明显了,你这个明显还没有达到,延长时间或者将DSS浓度提高一点。
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问
产生孢子数量很少的放线菌如何配成一定浓度的孢子悬液呢
明査日月
适当提高培养液浓度增加营养 延长培养时间
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问
microRNA,circRNA,lncRNA,ceRNA,siRNA,shRNA有什么区别?
balalaLy
microRNA,circRNA,lncRNA,ceRNA,siRNA,shRNA有什么区别都是RNA,microRNA小RNA,circRNA环状RNA,lncRNA长链非编码RNA,ceRNA 内源竞争RNA,这些都是内源RNA,siRNA,shRNA是人工合成的,导入细胞后可以干扰或敲低目的RNA的外源性RNA
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问
线粒体dna
Dr_劉医生
可以,线粒体DNA本具有高拷贝数,且稳定,可以用rt-PCR检测,而且一般都会用sanger和高通量测序来对比序列
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问
CNV拷贝数变异 作图
Dr_劉医生
可以按肿瘤类型进行聚类分析,CNV在同一区域也可以进行对比
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问
蛋白沉淀
明査日月
加百分之十甘油对后续实验不会有影响
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问
qPCR的图方差很大怎么办?
juyue2010
若是技术重复导致的话,是操作问题,先做好mix,再分别加到每个孔,操作时间别太长,加好样直接上机。若是生物重复导致的话,那就是说样品处理平行度差
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问
PFA灌注固定的组织样本如果暂时不用应该怎么保存呢
balalaLy
1-2天的话可以泡在PFA中4度保存,时间长的话最好脱水后-80度冻存。虽然固定了,4度放太久也是会变质的。而且固定得越久后期的染色效果越不好。加入叠氮化钠也会对结果有影响,而且这个大小致癌,建议能不用就不用。
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问
灵敏度与特异度的提问
Dr_劉医生
可以用,类似于构建预测模型和已知的模型进行对比,但有个问题,你的筛查方法1检出阳性(就是灵敏度)也得参考金标准来,确认假阳性率有多少;不然单独筛查2用金标准存在误差
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问
中位生存时间大于中位随访时间
juyue2010
你的随访时间提前已固定,而中位生存是回归计算出的,不一样很正常
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问
膜蛋白内参选什么
balalaLy
有一种说法是actin不在膜上面表达,而GAPDH有表达,所以GAPDH会适合一点
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问
请问这是细胞污染了吗
土井挞克树
看镜下影像是污染了,需要清理培养基
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问
细胞污染
balalaLy
是真菌吧,用过的培养基可能也要排除一下,耗材得重新高压灭菌
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问
免疫组化染色中有杂信号怎么办?
土井挞克树
1.抗体问题一抗用多克隆抗体容易出现非特异性染色,建议用高纯度,高效价的针对更具特异性抗原决定簇的单克隆抗体来解决。单克隆抗体很贵,不过结果真的很好。尤其是背景非特异性染色不会太深。真是一分价钱一分货。一抗过期也会造成杯具,所以要注意抗体的有效期。2.抗体浓度过高/孵育时间过长一抗浓度太高也是出现非特异性染色的常见原因。解决的办法就是预实验。每次使用新抗体前应该多做预实验,摸索出最理想的工作浓度,
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