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软骨体外
此用户已注销
体外实验选用人永生化软骨细胞系是可行的,不用必须取置换患者的软骨部分
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问
流式分选对照管阳性比实验管多
土井挞克树
可能是对照管中的结合蛋白种类多,至少存在两种以上
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问
嗜酸性粒细胞有细胞株嘛
土井挞克树
没有细胞株,做过敏性鼻炎可以用提取的嗜酸性粒细胞
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问
皮下荷瘤小鼠取引流淋巴结
huarenqiang5
腋下、腹股沟、侧腹部及颈背部等部位都可以选择(其中腋下中后部皮下较好,成瘤率高)。而成功率受多方面因素影响,如接种的深度等等。操作时注意点: 接种深度:进针时先用针头刺破皮肤,持平注射器使针头在皮下行进一段距离(约1cm深)后开始注射,注射前针头稍微动一动,能动说明在皮下,否则可能在皮内或者肌肉内。(明确针头在皮下后方可注射,绝不可刺破皮肤或者刺破肌肉层。)接种点离进针点尽量较远,减
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问
CIA模型
huarenqiang5
按比例进行换算达到要求浓度基本上没有什么影响,
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问
膝关节HE染色分析
土井挞克树
1.看着像软骨膜2.血管翳。3.软骨膜
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问
wgs检测
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华大基因三到五天就可以查结果。
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问
基因精细定位除了筛选重组体之外,可以通过扩大群体去做吗
土井挞克树
不筛选重组体单纯通过提高样本量的话,是需要非常庞大的样本量的。不建议做
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问
悬浮细胞用六孔板转染,提的rna非常少,有什么解决办法吗
土井挞克树
rna含量低,可能是裂解的不够充分。可以用PBS洗掉培养基后,不用胰酶消化,直接在六孔板中加入trizol裂解
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问
想问一下细胞裂解液选择蛋白酶抑制剂时有什么原则吗?受不受组织来源的影响?胞膜和胞浆有区别吗?
土井挞克树
如果你知道具体的蛋白,比如胰蛋白可以选择胰蛋白裂解剂。如果不知道具体蛋白可以选择广谱的抑制剂
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问
想请教大家一个问题,酵母单杂点斑到3缺 发现多个PHIS-启动子片段 跟AD空载长的斑 都比 AD接蛋白 长的好,这是什么原因呢
huarenqiang5
主要考虑原因有:1、菌落涂布方法是否正确;2、自激活体系是否正确;3、蛋白对启动子的影响等。
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问
免疫组化和WB可以用同一种抗体吗?
申东熙老伯
可以的,买抗体的时候主要买能做这两种实验的抗体,一般都会标注清楚。
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问
一般一次上样的蛋白总量是多少,跟目的蛋白的表达量有关系吗?
balalaLy
跟目的蛋白的表达量有关系,目的蛋白表达低,总的蛋白上样量得加大
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问
大分子量蛋白200KD或以上,在做WB要注意什么呢?
balalaLy
用浓度低的胶,比如7-8%的分离胶,然后转膜条件250mA 3小时左右
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问
为什么要求纯度很高的DNA才能作为PCR的模板?
大草原的小灰驴
减少DNA模板的非特异性扩增,得到特异性比较高的PCR产物,减少抑制PCR反应的物质,防止产物被降解或者形成二聚体。
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问
cck8毒性试验画标准曲线之后要如何确定细胞数呢?
土井挞克树
1.先用细胞计数板计数所制备的细胞悬液中的细胞数量,然后接种细胞到培养板内。2、按比例(例如:1/2比例)依次用培养基等比稀释成一个细胞浓度梯度,一般要做3-5个细胞浓度梯度,每个浓度建议3-6个复孔。3、接种后培养2-4小时使细胞贴壁,然后加CCK试剂培养一定时间后测定OD值,制作出一条以细胞数量为横坐标(X轴),OD值为纵坐标(Y轴)的标准曲线。根据此标准曲线可以测定出未知样品的细胞数量(使用
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问
动物肿瘤移植的难点是什么。
balalaLy
动物的周龄不能太大,一般4-6周,细胞状态要好,不能有污染,从细胞消化下来到接种到皮下的时间要尽量短,控制在2小时内,期间,细胞需要在冰上保存。
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问
小鼠脑微血管内皮细胞bEnd.3复苏之后分叉,长很多尾足,求大神指点
汤姆卜丽波
可能是冻存或者复苏对它造成损伤了,加大血清量,不行就再复苏一个吧
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问
三组MTT法细胞实验得出的数据要做哪些处理,每组有三个重复。
汤姆卜丽波
先将各孔OD值减去本底OD值(培养基+MTT+DMSO,不含细胞)或者对照组OD值,各个复孔取平均值±SD值即为最终结果。然后看各组有无差异,你可以取平均值,也可以单取一组
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问
质粒提取浓度只有50ng/ml
genecreate
少用些洗脱液吧,应该和质粒本身没关系
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