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问
ROC的95%置信区间,比较
土井挞克树
你设置的区间有重叠,重新设置取消重叠
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问
怎么获取无菌的质粒
土井挞克树
可以进行灭菌的,变成无菌的质粒
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问
石蜡切片和冰冻切片做HE染色的优缺点
balalaLy
都可以用,石蜡切片的优点在于片子质量会比较好,缺点在于需要抗原修复,实验步骤比较多。冰冻切片由于冰冻容易造成冰晶使细胞破裂,导致组织形态会比较差。
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问
100KD左右的蛋白转膜230mA多长时间合适?用的8%的预制胶
申东熙老伯
转膜转90-120分钟比较合适。
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问
T4 DNA连接酶错用成Gibson酶
土井挞克树
不可以了,重新连接吧,这种情况不能用了
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问
多重qPCR怎么样可以在一个反应条件下达到最优
土井挞克树
考虑是质粒没选好,才会扩增效率低
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问
Elispot检测新鲜PBMC IFN-γ分泌,使用CD3及PHA均无斑点分泌。
土井挞克树
考虑体系内特异性产物有降解才会没有分泌斑点
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问
再也养不出这么好的神经干细胞了
bamboopiggy
神经干一般能传3-5代,所以只能不断的自己提,千万别去公司买,买的,售后态度巨差
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问
求助hepaRG怎么培养啊?
bamboopiggy
在正常培养液的基础上,加入1%DMSO或者2%DMSO即可,意思是将DMSO加入培养基,使其终浓度为1%或2%,换液确实是2-3天换一次
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问
细胞培养添加剂B27不能反复冻融,要如何分装保存?
loveliufudan
一般情况下,可以将 B27 细胞培养添加剂分装到冰箱里(2-8℃)保存,可以保存 2-3 个月。但是建议不要反复冻融,以保证 B27 的活性不受影响。使用前需要充分振荡后才能加入培养基中。
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问
小鼠肝脏HE染色的病理学分析
bamboopiggy
没看出来有纤维化的样子,你可以考虑网状纤维和(或)Masson三色染色,来看纤维化
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问
制备组织匀浆
balalaLy
这要看你的实验目的是什么。如果是提蛋白一般用专门的裂解液,如果是用于检测酶活性或者其它一些成分,要根据后续实验所用试剂的要求,有些检测试剂盒可能pbs或生理盐水都可以,有些会有要求不能含有某些成分。
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问
求助:大鼠皮肤HE染色下如何观察炎症浸润!
loveliufudan
三个关键:寻找炎症细胞,如淋巴细胞、巨噬细胞和中性粒细胞的浸润。评估组织内血管的扩张和炎症标志物的表达,例如红色血管、水肿和增生。评估组织内渗出物的数量和分布情况,以及炎症组织内细胞的增殖情况。
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问
同一种细胞,有的时候CCK8染色2h就可以了,有的时候需要一个晚上。
bamboopiggy
cck8一般作用时间是1-4个小时,过夜是没法用的。这个是细胞活力检测的试剂,其颜色的深浅,取决于细胞数目的多少
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问
信号通路蛋白和基因处理时间不一致
loveliufudan
有关信号通路基因处理时间和蛋白质处理时间的差别,可能是因为信号通路调控的机制不同。基因处理的时间是指在体内基因发挥功能的时间,而蛋白质处理时间是指从刺激发生到蛋白质表达反应的时间。因此,信号通路的基因处理时间可能需要数小时,而蛋白质反应的处理时间可能只需要数分钟。在某些情况下,短时间内观察蛋白质反应可能更能反映基因处理对信号通路的影响。但是,这并不代表所有情况都如此,具体情况还需要根据研究的特定目
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419 围观
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问
慢病毒qPCR检测没有敲低
bamboopiggy
多设计几个靶点,可能你设计的靶点不好。
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问
B16F10细胞状态差 怎么调整? 不知道什么原因细胞上总是有泡泡
loveliufudan
这种泡泡可能是细胞膜泡,它的形成是由于细胞膜的损伤导致的。细胞膜的损伤可能是由于一系列因素造成的,例如:消化时间过长、细胞过于密集、细胞被过度损伤、细胞老化、细胞生理活动异常等。避免这种情况,可以采取一些措施,例如调整细胞密度,调整培养条件等。
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问
AKT/m TOR通路
bamboopiggy
磷酸化的和total的mTOR都要做,其中磷酸化的是mTOR的活化形式,total是总的mTOR
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问
免疫细胞表面蛋白
dxy_uv8jfkbw
我们实验室从外周单核细胞培养mDCimDC一般在培养D4后表达HLA-DR+、CD86mDC表达HLA-DR+、CD80、CD83、CD86
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问
做ELISA实验,三遍,复孔之间重复性差异很大是什么原因呢?
dxy_r9ji8ui4
差异大是多大?一般要求不能超过15%,竞争法有时20%也能接受还有不要压着标曲的检测下限去测量,尽量高中低三档同时观察,非压着检测限的值去测,肯定容易重复性差标曲一定要做好,r2>0.99以后再谈别的,要看计算后的浓度值,不能看OD读值。每次实验标曲必做。标曲拟合方程尽量用4pl,拟合度更好
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